Extraccion Del Adn

Gracias Arauco por la colaboración con este video. Para este experimento necesitás:      

Semillas (garbanzos, porotos o lentejas) Sal Detergente líquido Ablandador de carne o jugo de ananá (piña) Alcohol etílico 95% (funciona también con isopropil) y paciencia, mucha paciencia…

Acá va el procedimiento que tenés que seguir:

1) Lo primero es tomar 1/2 taza de porotos, una pizca de sal (¿será para darle d arle sabor?) y una taza de agua. Todo eso se coloca en una licuadora y se procesa durante 15 segundos. Finalmente, la mezcla resultante se filtra para eliminar cualquier partícula de gran tamaño. 2) A la mezcla que obtuviste agregale 2 cucharaditas de detergente líquido y revolvé sin formar espuma. Luego dejá reposar por 5-10 minutos. Sería conveniente que probaras con distintos detergentes ya que algunos no funcionarán tan bien como otros. Finalmente colocá la mezcla en 3 envases de prueba. 3) Agregá a cada envase una pizca de ablandador de carne y revolvé muy des-pa-ci-to. des-pa-ci-to. Si lo hacés rápidamente tal vez no logres ver nada al final del experimento. Si no tenés ablandador de carne (que por cierto es un producto muy yankie) podés utilizar jugo de ananá o solución para lentes de contacto.

4) Incliná el envase de la mezcla y vertí muy lentamente alcohol etílico 95% (alcohol común de cualquier botiquín) de modo que se forme una capa sobre la mezcla anterior de porotos. Vertí tanto alcoho l como mezcla hay en el envase.

El ADN comenzará a “coagular” como una masa blancuzca y subirá hasta la parte donde está el alcohol. 5) Felicitaciones!!! Acabás de realizar tu primera extración casera de ADN.

Puedes retirarlo con la ayuda de un palillo. En este caso las proteínas y la grasa se quedan en la parte acuosa de la mezcla y el ADN asciende hasta llegar al alcohol. El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Puede ser necesario que intentes varias veces el experimento, con distintas fuentes de ADN, distintos detergentes y ablandadores; ya que muchas veces no sale como lo esperado y sólo se puede tener paciencia para volver a intentarlo. Vamos que vale la pena!!! Suerte. ¿Porqué funciona así?

El agua con una pizca de sal es una mezcla isotónica. Es para que lo que se va a sacar de la semilla “sufra” lo menos posible. En la licuador a se rompe la cubierta de las semillas. Pero las células vegetales están enteras (son demasiado pequeñas). Pa ra eso se usa el detergente. Zumo de piña, de papaya, ablandador de carne… todo esto son enzimas que cortan las  proteínas. Se trata de romper lo que hay dentro de la célula dejando intacto el ADN. Al añadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene más afinidad con el alcohol que con el agua.  Este experimento ha sido traducido al español de su artículo original 

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Extracción de ADN 

Objetivo 

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Utilizar unas sencillas técnicas para poder extraer el ADN de un producto natural Observar la estructura fibrilar del ADN.

Introducción ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados.

Materiales 

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Vasos de precipidos o vasitos de plático.  Tubos de ensayo Un cuchillo Palitos de pinchos Una batidora

Productos       

Cebolla grandes frescas Kiwis Agua destilada Detergente lavavajillas Sal Zumo de piña o de papaya Alcohol de 96º muy frío

Realización práctica

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1.- Cortamos la zona central de la cebolla en dados 2.- En un vaso de agua echamos 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y una de sal y añadimos agua destilada hasta llenar el vaso. 3.- Mezclamos esta solución con los trozos de cebolla 4.- Licúamos el conjunto, con la batidora, a velocidad máxima durante 30 segundos 5.- Filtramos el líquido obtenido con un filtro de café. 6.- Llenamos un cuarto de un tubo de ensayo con la disolución filtrada. Añade otro tanto de zumo de piña y mezclamos bien. 7.- Añadimos un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, cuidadosamente, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado. 8.- Dejamos reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas. A continuación introducimos la varilla y extraemos una maraña de fibras blancas de ADN.

Extrayendo ADN

Precauciones

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Cuando añadas el alcohol frío debes hacerlo de forma que resbale por las paredes del tubo para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.

Explicación científica La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. La solución de lavavajillas y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear. Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN. ADN en la interfase agua-alcohol

El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.

Curiosidades y otras cosas

El ADN fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich Miescher, biólogo suizo, en los núcleos de las células del pus obtenidas de los vendajes quirúrgicos desechados y en el esperma del salmón. Él llamó a la sustancia nucleína, aunque no fue reconocida hasta 1943 gracias al experimento realizado por Oswald Avery La estructura del ADN es una pareja de largas cadenas de nucleótidos. La estructura de doble hélice del ADN fue descubierta en 1953 por J ames Watson y Francis Crick. Una larga hebra de ácido nucleico está enrollada alrededor de otra hebra formando un par entrelazado. Dicha hélice mide 3,4 nm de paso de rosca y 2,37 nm de diámetro, y está formada, en cada vuelta, por 10,4 pares de nucleótidos enfrentados entre sí por sus bases nitrogenadas. Sólo tenemos un 30% más de genes que un diminuto gusano, el cual tiene solo un milímetro de longitud y posee 959 células, en tanto que nosotros alrededor de 100 billones. Y mientras que los seres humanos poseemos aproximadamente 100.000 millones de neuronas, el diminuto gusano cuenta unicamente con 302. En comparación con el arroz nos va aún peor, puesto que un grano de arroz tiene muchos más genes que una persona, y todavía no se le ha ocurrido ni la más tonta de las ideas.

Bibliografía        

Extracción del ADN de una cebolla. ¿Cómo ver su ADN con un experimento casero?. Extracción de ADN Extracción casera de ADN. Extracción de ADN de tejidos vegetales. Curiosidades del ADN. Origami Dna model. Extracción de ADN.

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Extracción del ADN de una cebolla Mª L. Tato

(PR-5)

El rincón de la Ciencia nº 5, Marzo 2000

La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear  para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.

El material que se necesita es fácil de encontrar y el procedimiento es sencillo. ¡Animo! e intenta hacerlo en casa. MATERIAL:

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una cebolla grande fresca detergente lavavajillas sal agua destilada zumo de piña o papaya alcohol de 96º muy frío (puede sustituirse por vodka helado) un vaso de los de agua un vaso de cristal alto (se mantiene en la nevera hasta que vaya a utilizarse) un cuchillo una varilla de cristal una batidora

¿Cómo hacerlo?  

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Corta la zona central de la cebolla en cuadrados En un vaso de agua echa 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y una de sal y añade agua destilada hasta llenar el vaso. Mezcla esta solución con los trozos de cebolla Licúa el conjunto, con la batidora, a velocidad máxima durante 30 segundos Filtra el líquido obtenido con un filtro de café Llena hasta la mitad aproximadamente un vaso de cristal alto con la disolución filtrada  Añade 3 cucharaditas de café de zumo de piña o papaya y mezcla bien  Añade un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, cuidadosamente, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte. Deja reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas. A continuación introduce la varilla y extrae una maraña de fibras blancas de ADN.

¿Qué ha ocurrido? La solución de lavavajillas y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear. Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.

El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. --

CÓMO EXTRAER ADN DE CUALQUIER COSA VIVIENTE Cómo extraer ADN de cualquier cosa viviente iADN! ¿Quieres decir que puedo verlo? ¿Cómo?  Sólo sigue estos tres sencillos pasos:

Alcohol Detergente eNzimas (ablandador de carne) ¿Es tan simple? iDime más! Primero necesitas encontrar algo que contenga ADN. Ya que el ADN es el plano de instrucciones para la vida, cualquier cosa viviente contiene ADN.

Para este experimento preferimos usar arvejas (guisantes) verdes. Pero también hay montones de otras fuentes de ADN, como por ejemplo: 

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Espinacas Hígado de pollo Cebollas Brócoli

Aquí está la parte divertida. Pon en una licuadora: 

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Tu fuente de ADN (más o menos 100 ml o 1/2 de taza de arvejas ) Un pellizco grande de sal de mesa (menos de un ml o 1/8 de cucharadita) Agua fría. El doble de la cantidad de tu fuente de ADN (más o menos 200 ml o 1 de taza)

Licua todo a alta velocidad por 15 segundos. El licuado separa las células de las arvejas unas de otras, por lo que ahora tienes una muy diluida sopa de células de arvejas . Debido a que este paso es un revoltijo, ciertas fuentes de ADN no deben ser usadas, como por ejemplo: 

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Al perro Fido, la mascota de tu familia, El dedo gordo de tu hermana menor Bichos que atrapaste en el jardín

Y ahora, sigue estos tres pasos:

1. Vierte tu sopa de células de arvejas a través de un colador dentro de otro contenedor (como una taza medidora por ejemplo). ¿Cuánta sopa de arvejas tienes? Añade como 1/6 de esa cantidad de detergente líquido (más o menos 30 ml o dos cucharadas soperas) y

mézclalo. Deja reposar la mezcla entre 5 y 10 minutos. Vierte la mezcla en tubos de ensayo u en otros contenedores pequeños de vidrio, cada uno como 1/3 lleno.

Prueba usar uno de estos detergentes o el que sea que tengas a mano. ¿Por qué estoy usando detergente?

2. Añade un pellizquito de enzima a cada tubo de ensayo y agítalo suavemente. iSe cuidadoso! Si lo agitas demasiado fuerte romperás en ADN haciéndolo más difícil de ver. Usa ablandador de carne como enzima. Si no puedes encontrar ablandador, intenta usar jugo de piña o solución limpiadora para lentes de contacto. ¿Qué es una enzima?

3. Ladea tu tubo de ensayo y lentamente vierte el alcohol (isopropílico al 7095% o alcohol etílico) sobre la pared del tubo de manera que forme una capa sobre la mezcla de arvejas. Sigue virtiendo hasta que tengas en el tubo aproximadamente la misma cantidad de alcohol que de mezcla de arvejas.

El ADN se elevará desde la mezcla de arvejas hasta la capa de alcohol. Puedes usar un palito de madera u otro tipo de gancho para arrastrar el ADN que está en el alcohol.

¿Qué es esa cosa pegajosa?

El alcohol es menos denso que el agua, por lo que flota en la parte superior. Debido a que se formaron dos capas separadas, toda la grasa y proteína que rompimos en los dos primeros pasos y el ADN tiene que decir: "¿Mmmmm... a que capa debería de ir?"  Esto es algo así como buscar en una recámara el lugar más confortable para sentarse. Alguien escogerá el sillón, otros quizás escojan la mecedora. En este caso, la proteína y la grasa irán al fondo, que es la capa acuosa, donde se sienten más confortables, mientras que el ADN prefiere la capa superior, el alcohol. El ADN es una larga y pegajosa molécula a la que le gusta formar grumos.

iFelicitaciones! iAcabas de completar una extracción de ADN! Ahora que has extraído exitosamente ADN de una fuente, estás listo para experimentar un poco más allá. Intenta trabajar con estas o con algunas de tus propias ideas: 

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Experimenta con otras fuentes de ADN. ¿Qué fuentes producen más ADN?, ¿Cómo puedes compararlas entre si? Experimenta con distintos tipos de jabones y detergentes. ¿El jabón en polvo funciona tan bien como el detergente líquido? ¿y que hay del shampoo y el  jabón líquido para el cuerpo? Trata de saltarte alguno de los pasos o simplemente cámbialos. Te hemos dicho que necesitas realizar cada paso, pero ¿es cierto? Averígualo por ti

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mismo. Intenta cambiar la cantidad de alguno de los ingredientes utilizados. ¿Solamente las cosas vivas contienen ADN? Intenta extraer ADN de cosas que pienses que no deberían de tener ADN.