EXTRACCION DE LA CASEINA Y DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO.docx

EXTRACCION DE LA CASEINA Y DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO

EXTRACTION AND DETERMINATION CASEIN ISOELECTRIC POINT Ardila Greilly (0524209!

Corporación tecnológica de Bogotá, Tecnología en Química Industrial   Bogotá, Colombia Colombia 12/11/2015

RESUMEN

Se llevó a cabo el procedimi imiento de extracción  !eparación de la ca!e"na de #na m#e!tra de lec$e com%n& La ca!e"na e! #na  prote"na con'#(ada de la lec$e del tipo )o!)oprote"na *#e !e !epara de la lec$e por  acidi) acidi)ica icació ción n  )orma )orma #na ma!a ma!a blanca blanca++ Se reali, reali,ó ó la determ determina inació ción n experim experiment ental al del  p#nto i!oel-ctrico de la prote"na !eparada ./&01 $aciendo preparación de !ol#cione! a di)e di)ere rent nte! e! conc concen entr trac acio ione ne!!  medi medida da !# ab!orbancia en el e!pectro)otómetro+ Palabra! clave2 Prote"na& ca!e"na& extracción& P#nto i!oel-ctrico+ A"STRACT

Carrie Carried d o#t t$e proce! proce!!! o) extrac extractio tion n and !eparation o) ca!ein )rom a !ample o) re(#lar  mil3& Ca!ein i! a mil3 protein con'#(ate o)  t$e tpe p$o!p$oprotein 4$ic$ i! !eparated )rom mil3 b acidi)ication and )orm! a 4$ite ma!!+ ma!!+ Experim Experiment ental al determ determina inatio tion n o) t$e t$e i!oele i!oelectr ctric ic point point o) t$e !epara !eparated ted protei protein n ./+0 1 4a! per)ormed b preparin( !ol#tion! at di))erent concentration! and t$e ab!orbance mea!#red in a !pectrop$otometer +

INTRODUCCION

5na caract caracter" er"!ti !tica ca de la! prote" prote"na na!!  otro! otro!  biopol"mero! e! *#e la car(a total *#e ad*#ieren depende del p6 del medio+ De la mi!ma manera la! prote"na! tienen #na car(a neta dependiendo del p6 del medio en el *#e !e enc#entren  de lo! amino7cido! *#e la comp compon onen en++ La ca!e ca!e"n "naa e! #na #na prot prote" e"na na con'#(ada de la lec$e del tipo )o!)oprote"na *#e !e !epara de la lec$e por acidi)icación  )orma #na ma!a blanca+ La! )o!)oprot )o!)oproteina! eina! !on #n (r# (r#po de prote rote"n "na! a! *#e e!t7n !t7n *#"mi *#"micam cament entee #nida! #nida! a #na !#!tan !#!tancia cia *#e contie contiene ne 7cido 7cido )o!)ór )o!)órico ico++ En la ca!e"n ca!e"naa la maor"a de lo! (r#po! )o!)ato e!t7n #nido!  por lo! (r#po! $idroxilo de lo! amino7cido! !erina  treonina+ La ca!e"na en la lec$e !e enc#entra en )orma de !al c7lcica .ca!einato c7lcico1+ La ca!e"na repr repre! e!en enta ta cerc cercaa del del 889 889 al :09 :09 de la! la!  prote"na! pre!ente! en la lec$e  el 0&89 en compo!ición de la lec$e l"*#ida+ MATERIALES Y METODOS  Extracción de la caseína:

A #na #na me,c me,cla la de a(#a a(#a de!t de!til ilad adaa  lec$ lec$ee caliente !e le a(re(ó ; mL de 7cido ac-tico ;M $a!ta )ormar #n precipitado& !e )iltró  !e a(re(ó etanol para volver a )iltrar+  Determinación del punto isoeléctrico: isoeléctrico:

A /< m( de ca!e ca!e"n "naa !e le adic adicio ionó nó a(#a de!tilada& 6idróxido de pota!io  !e preparó #na !ol# !ol#ci ción ón de ;< mL& lo! c#al c#ale! e! !e di!trib#eron lo! ;< t#bo! de en!ao .; mL en cada #no1& a lo! c#ale! !e le! a(re(ó lo! vol%mene! corre!pondiente! a la tabla No+ ;&  !e midió la ab!orbancia de cada #no de

ello! a =>< nm para reali,ar la po!terior  (r7)ica .?r7)ica No+ ;1 de ab!orbancia @! p6

7cido ac-tic o



/ = 8

B > =

8 = >

>+0 >+/ /

T#bo RESULTADOS TESULTADOS

Y

ANALISIS

DE

 Extracción de la caseína:

Al adicionar el 7cido ac-tico a la lec$e !e ob!erva #n cambio en !# compo!ición& evidenci7ndo!e #na precipitación completa& a *#e la )a!e l"*#ida e! tra!l%cida  la )a!e !ólida completamente blanca+ Se p#ede explicar a *#e de ac#erdo al cambio de p6 experimentado por la lec$e& inicialmente entre =&/  =&8& all" la prote"na .ca!e"na1 !e enc#entra car(ada ne(ativamente !ol#bili,ada con !al c7lcica& al acidi)icar!e el p6 !e acerca al p#nto i!oel-ctrico de la prote"na& al lle(ar a  p6 aproximado a >&0  >&8 !e ne#trali,a la ca!e"na .lo! (r#po! )o!)ato! !e protonan1& a!" !e precipita debido a *#e $a meno! rep#l!ione! intermolec#lare!& evidenci7ndo!e la !eparación de e!to! comp#e!to! por medio de den!idad a *#e la den!idad del a(#a e! ; (ml *#edando arriba por tener den!idad m7!  ba'a *#e la ca!e"na *#e e! de ;+B(ml& e!ta !eparación !e da debido a *#e c#ando la!  prote"na! en e!te ca!o la ca!e"na !e enc#entra a p6 de p#nto i!oel-ctrico !on meno! !ol#ble! en a(#a  !e da la !eparación de la  prote"na  el a(#a+ Ca0  Ca!einato  C6BCOO6 CaCOO6

Ca!e"na 

De!p#-! de precipitada la ca!e"na& !e procede a lavado para eliminar el !#ero  (ra!a! )or,ando a la parte !ol#ble de la ca!e"na con la lacto!a a cri!tali,ar+

 Determinación del punto isoeléctrico:

Con la preparación previa de la! !i(#iente! !ol#cione! !e prepararon la !ol#ción para medir !# corre!pondiente ab!orbancia2

7cido ac-tic o