EXTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO CARACTERIZAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS DE CEBOLA Gerlane Ataídes da Hora 1 1
Universidade Federal de Goiás/Escola de Agronomia e Engenharia de Alimentos/Bacharelado em Engenharia de Alimentos/
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1. INTRODUÇÃO Os nucleotídeos são compostos por uma base nitrogenada, um grupo fosfato (em azul) e uma ribose ou desoxiribose (em verde - a hidroxila em roxo indica que o nucleotídeo representado é uma ribose). r ibose). Quando na ausência do grupo fosfato, são chamados de nucleosídeos. A base nitrogenada, juntamente com a pentose f ormam compostos heterocíclicos, sendo que a primeira pode ser derivada de compostos de purina ou pirimidina. São tidas como purinas a adenina (A) e a guanina (G), e as pirimidinas são constituídas pela citosina (C), uracila (U) e timina (T). (1) Os nucleotídeos estão presentes em vários processos metabólicos e são tidos como subunidades dos ácidos nucléicos, participam do transporte e na conservação de energia (ATP, por exemplo), são encontrados como componentes de alguns co-fatores enzimáticos e alguns apresentam a função de mensageiros químicos celulares, como é o caso do cAMP, um segundo mensageiro que atua fosforilando diversas outras m oléculas, desencadeando desencadeando uma cascata de reações em um determinado processo, como ocorre na liberação de histaminas quando de uma reação alérgica. (1)
2. MATERIAL Cebola descascada Papel de filtro ou gaze Bastão de vidro; Faca; Funil; Ralador ou picador ou “mixer”;
Proveta graduada; Béquers de 250 mL; Cloreto de sódio (10g - aprox. 2 colheres peq.); Detergente (aprox. 120 mL) Álcool etílico (gelado – à aprox. -10°C);
Água destilada (aprox. 120 mL Banho-maria (a aprox. 60°C); Cuba com gelo;
3. MÉTODOS Os passos de 1 a 6 serão executados pelo professor, em conjunto para todas as equipes.
1. Pique a cebola em pedaços pequenos. 2. Coloque em um béquer o detergente, a água e o cloreto de sódio, mexendo a mistura até que os seus elementos se dissolvam completamente. 3. Adicione a esta solução a cebola picada; 4. Coloque o béquer no banho-maria a 60°C por 15 minutos, mexendo de vez em quando. 5. Findado esse tempo dê um choque térmico na solução colocando o béquer no gelo por 5 minutos. 6. 6.Triture a cebola com a solução por 45 seg. e coloque no gelo por 15 minutos 7. Filtre a mistura em gaze, sem deixar passar a espuma e recolhendo o filtrado em um béquer limpo. 8. Adicione ao filtrado álcool etílico gelado, deixando-o escorrer pela parede do béquer; 9. Verifique a formação de duas fases e o surgimento de fios viscosos de DNA.
10. Mergulhe o bastão de vidro e, com movimento circular em um único sentido, entre as duas fases e enrole os filamentos obtidos.
4. RESULTADOS E DISCUSSÕES De acordo com os procedimentos acima, a cebola foi cortada e macerada para que a membrana do núcleo fosse rompida e o DNA como componente do núcleo, se desnovelou com a temperatura elevada. O gelo fez com que voltasse a hélice, motivo pelo qual é possível ver o filamento. 5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Disponível em: http://www.bioq.unb.br/htm/textos_explic/moleculasintro/nucleot_intro.htm. Acesso em: 14 fev. 2013
