Enz Taller 2

 

TALLER 2- MODULO ENZIMOLOGÍA 1.   Aplique la ecuación de Michaelis-Menten (ec. 1) para demostrar: a.  La independencia de vo con respecto a [S], cuando [S]>>Km (entiéndase la expresión “>>” como mucho mayor que). b.  La igualdad de [S] = Km cuando vo es la mitad de Vmax.

2.  Realice las gráficas de Michealis-Menten y Lineweaver-Burk para una enzima con un inhibidor competitivo, uno no competitivo puro, uno no competitivo mixto y uno acompetitivo. 3.  En la naturaleza, algunos virus tienen como función biológica la codificación de proteasas. Esta acción es esencial para el ensamblaje y maduración del virus. El virus T codifica una proteasa “R”  (Mr= 21500g/mol) la cual realiza la hidrólisis de cierto sustrato [S] con una Kcat = 1000 s-1 y una Km = 0.0175M. a.  Calcule la Vmax para la hidrólisis del sustrato cuando esté presente la proteasa del virus T a 0.2mg/mL. b.  La evolución gradual de los virus, como en todos los sistemas biológicos, “R” del virus T present  se presenta mediante La no proteasa cierta mutación lo quemutaciones. hace que esta pueda escindir el derivado queó resulta (hacer el proceso de HIDROLISIS) y actúa, inmediatamente, como inhibidor. Bajo las mismas condiciones planteadas anteriormente y en presencia de 2.5µM de inhibidor, la Vmax es 9.3x10 -3M s-1. ¿Qué tipo de inhibición sucede? ¿Por qué?

4.  Una glutaminasa de hepatocito hidroliza distintas concentraciones de glutamina, en presencia o ausencia de dos inhibidores diferentes, obteniéndose los siguientes resultados [S] (mM)  V (mmol * min-1) 

0,2

0,4

0,8

1,6

3,2

[I]=0  [Ia]= 1,5 mM 

1,65

2,81

4,41

6,12

7,59

0,61

1,16

2,09

3,46

5,14 5,14

[Ib]= 1,5 mM 

0,81

1,41

2,20

3,06

3,79

Calcular: a) en cada caso el tipo de inhibición existente, existente, b) el valor de los correspondientes correspondientes parámetros cinéticos (Km, Vmáx).