Prim era versión: 6 de julio de 200 2006 6 Versión definit iva: 20 de julio de 2006 Aceptado: Acept ado: 27 de julio de 2006
Araceli Nieto-Rodríguez
D etec eteccci ón, a análi náli si s y r eso esoluc lucii ón de di sc scrr ep epanc ancii as e en n el g r upo sa s a n g u í n eo A B O
RESUM RES UM EN La mayoría de los grupos sanguíneos ABO que se determinan en el banco de sangre cumplen con las leyes establecidas de antígenos y anticuerpos recíprocos para ese sistema, pero hay una población que presenta discrepancias que deben ser resueltas para definir el grupo exacto. Estas diferencias se pueden presentar por detectarse grupos débiles de A: A3, Am, Ax, Ael, Aend y de B: B3, Bx y Bm que se resuelven generalmente con técnicas de adsorción-elusión e investigación de sustancias A, B y H en la saliva de secretores que presentan estas incongruencias. Otro tipo de discrepancias se presentan en personas con anticuerpos naturales irregulares como anti-A1, anti-H, -M, -N, -P1, Lea, Leb; anticuerpos inmunes que se detectan en medio salino como producto de una reacción primaria o en pacientes con anemia hemolítica autoinmune y en sujetos con complejos inmunes relacionados a SIDA o con proteínas anormales como en el mieloma múltiple.
Disc iscrep rep anc ancia ia s en lo s grup os sanguíneos El sistema sistema ABO es el único en el que los antiant icuerpos recíprocos recípro cos están están pr esentes esentes en el suero de las personas normales que no han tenido exposición a eritrocitos humanos.1 La determ determiinación de los grup grupos os ABO ABO difiere difiere de la de otros otr os grupos sanguíneos sanguíneos por que es el el único ún ico en que pueden predec p redecirse irse generalment generalmentee los antígenos presentes en en los lo s eritro citos, si se se conocen los anticuerposs que existen anticuerpo existen en el suero. Rev Med Inst Mex Seguro Soc 2006; 44 (Supl 2): 31-37
Técnica Laboratorista. Banco de Sangre del H ospital ospital Gonzalo Castañeda, Institut Institut o de Seguridad y Servicios Sociales de los Tr abajadores del Es Estado. tado. Comunicac Com unicación ión con: Araceli N ieto-Rodríguez Dirección ele electrónica: ctrónica:
[email protected]
SUMMARY Most of the ABO blood groups dealt with at the blood bank comply with the established laws of reciprocal antigen and antibody for that system, but there is a population that shows some discrepancies that must be sorted out in order to define the exact group. These differences can arise from the detection of weak groups of A (A3, Am, Ax, Ael, Aend) and B (B3, Bx, Bm), that are generally solved with adsorption-elusion techniques and investigation of A, B and H substances in saliva of patients with such incongruencies. Another type of discrepancies takes pl place ace in people with natural irregular antibodies (such as anti-A1, anti-H, -M, -N, -P1, Lea, Leb), immune antibodies that are detected in a saline medium as the result of a primary reaction, or in patients with Autoimmune Hemolytic Anemia and patients with Immune Complexes related to AIDS, or with abnormal proteins, such as Multiple Myeloma.
El método estándar estándar para determinar el g grurupo A BO de una muestra es examinar examinar los hematíes frente a anti-A, anti-B, anti-AB y el suero frent e a hematíes del gru grupo po A A1, 1, A2 y B B.. En la pr áctica, se se incluye el estu estu dio de los hematíes frente frente a suero del grupo O , con el fin de detectar aquellas muestras raras del grupo A que no son ag aglutinadas lutinadas por un ant i-A i-A pr ocedente de un donante del grupo B y para detectar anticuerpos ant icuerpos irreg irr egulares ulares que estén estén caucausando sando discrepancia ent entre re el g gru rupo po dir directo ecto y el inverso.
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Palabr as clave: clave: ! ! !
grupo sanguíneo sistema ABO discrepancias
Key words: ! ! !
blood groups ABO sys system tem discrepancies
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Araceli Niet o Rodríguez. Araceli Discrepancias en el grupo sanguíneo ABO
Los anticuerpo s del sistema si:rop stema odarobale ABO existen exis FDP ten en el individuo desde el el mom ento en que son VC ed AS, cidemihparG capaces capac es de tener una u na respuesta inmun inm unológica ológica y se producen cont ra los antígenos A y B de llos os arap s aant cuales carece carece el el individuo: individuo : aant nt icuerpos icuerpo nt itétiitét iacidémoiB arutaretiL cos que son anticuerpo ant icuerposs :cihpargideM natur nat urales ales regulares, de amplio rango térmico (4 a 37 °C), son una sustraídode-m.e.d.i.g.r.a.p.h.i.c mezcla de IgG, IgM, e IgA. En el cuadro I se observa el agrup agrupamient amient o del sistema sistema ABO ABO de rutina. rut ina. Los genes de tres tr es loci separado separadoss (ABO, Hh y Sese) cont controlan rolan la aparición aparición y la localización localización de los ant antíge ígeno noss H, H , A y B. Tres ale alelos los comunes comun es (A, B y O ) ssee localizan en locus ABO del cromosoma 9. Los glucoesfingolípidos, que portan oligosacáridos A o B, son partes p artes integ int egrales rales de las las membr branas anas de eritro erit rocito citos, s, células células epiteliale epit elialess y células células endotelial endot eliales es y también tamb ién en forma form a solub soluble le del plasma. La saliva saliva contiene cont iene moléculas de glucopr glucoprooteínas que pueden, si la persona posee el gen secretor (Se), portar por tar idént icos oligosac oligosacáridos. áridos.
sustraídode-m.e.d.i.g.r.a.p.h.i.c provenient pr ovenientee de la semilla semilla Ulex europeus, agl aglutin utinaa los eritr ocitosed eritr que tienen antígeno H H.. cihpargidem odabor Los eritrocitos eritr ocitos de rrec ecién ién n nac acidos idos que son ge ge-néticament néticame ntee A1 reacc reaccionan ionan de forma rrelativaelativamente débil con el anti-A1 humano. Los eritrocitos eritr ocitos fe fetales tales A2 se ccomp omport ort an como los Ax adulto s por porque que las transfe transferasa rasass actú actúan an de manera lenta en en los RN . Cuando se comparan las reacciones de los eritr ocito ocitoss de los niñ os y adultos adult os de grupo A con sueros aant ntii-A, A, sólo ssee encuentr an pequeñas dife diferencias rencias een n cuant o la ag aglutin lutin ación ación de los eritro eritrocitos citos suspe suspendido ndidoss een n medio salino, salin o, per pero o las diferen diferencias cias son m más ás evidentes en la pru prueba eba de antiglobu antiglobulina lina indirecta (anti-IgG) y las pruebas de LISS (Low Ionic Strength tr ength Solution).
Variaciones de antígenos d é b i l e s3 Los subgrupos subgrup os más débiles de A2 aparecen de manera inúmeros frecuent e yrecient en general setios ca caracterizan por po r número ninfrecue sntdec decrecie ntes es de si sitio sracteriant antigé igé-nicos A en los eritrocitos y un incremento recíproco en la actividad del del antígeno H . La clasific clasificación ación de lo loss subgrup subgrupos os A d débil ébil se basa en:
Subgrupos2
Los subgrup subgrupos os son fenotipos fenotip os ABO ABO que difiedifieren en la cantidad cantidad de antígeno antígeno present present e en los aglutinac lutinación ión eeritrocitaria ritrocitaria por antieritrocitos y en la saliva de los secretores. Se 1. Grado de ag A y ant i-A1. i-A1. hallan halla n con mayor frecuencia frecuencia y tienen m más ás relereleaglutinac lutinación ión eeritrocitaria ritrocitaria por antivancia clínica los de A, que los de B. B. Al utilizar u tilizar 2. Grado de ag A,B. lectinas se definen los subgrupos: subgru pos: A1 y A2: con aglutinación ión eritroci eritrocitaria taria por el extr extrac acto to de Doli Dolich chos os biflor biflorus us se aglutinan aglutinan los 3. Grado de aglutinac anti-H. eritrocitos A1, pero n o los de A2; y el el anti-H anti-H ,
Cuadr o I Agrupamiento de ABO de rutina Reacción de las células investigadas con anti-A 0 + 0 +
Reacción del suero investigado contra
anti-B anti-AB 0 0 + +
0 + + +
Interpretación
Frecuencia (%) población
cel. A1
cel. A2
cel. B
cel. O
Grupo ABO
D.F.
+ 0 + 0
+ 0 + 0
+ + 0 0
0 0 0 0
O A B AB
72.02 19.75 7.01 1.22
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+ = aglutinación 0 = no aglutinación
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4. Presencia Presencia o ause ausencia ncia de anti-A1 anti-A1 en el ssuero. uero. 5. Presenci Presenciaa de sustanc sustancia iass A y H en la sal saliva iva de secretores. Los eritrocitos eritro citos de los subgrup subgrup os Ax, Ael, Aint o A3 se observa rara vez vez en la práctica pr áctica transfusional. Los grup grupos os prin cipales cipales de A débil son: son: tipo o de A intermedio, int ermedio, su reacA : Células: tip int ción con anti-A y ant ii-A1 A1 es más débil que los eritrocitos eritro citos A1 y más fuerte con anti–H que los eritrocitos A2, producen producen un patrón de campo campo mixto ca característico racterístico de pequeños aglutin aglutin atos entr e much muchas as ccélulas élulas llibr ibres es een n las pruebas con antiant i-A A y an anti-B ti-B.. células tienen un a reacción reacción m uy A x : Las células débil con con anti-A, o no la present present an. Buena Buena reacción acc ión con anti-A,B an ti-A,B.. En el suero, el anti-A no existe exis te o es muy débil y habitualmen h abitualmente te contiene cont iene anti-A1. En saliva, cuando cuando es secretor secretor,, sólo se detecta detec ta el antíge ant ígeno no H . La adsorción-elus adsorción-elusión ión con anti-A es positiva. A m : C élulas élulas:: reacción reacción nega negativa tiva o débil con anti-A y anti A,B A ,B.. En suero, no se detecta detecta antiA o anti-A1; en saliva de secretor se encuentr tran an antígenos antígenos A y H . Aparece por lo general general
como del grupo grup o O , las célula célulass ads adsorb orben en ant antii-A A como se demuestr demuestraa por su elusión elusión p posterior osterior.. A end : A débil debido en aparien apariencia cia a un alelo de ABO, pero p ero que no n o se ccataloga ataloga como A Ax, x, ni Am. La saliva saliva contiene H, pero no A. A el: N o son aglutin aglutinados ados por ant i-A i-A ni por anti-A,B de ningún origen, o rigen, Ael es aún más débil que Aend; Aen d; al antígeno A se puede de demosmostrar tr ar sólo con absorción-elusi absorción-elusión. ón. La ssaliva aliva de los sec secretores retores contiene H pero no A. Los grup grupos os débile débiless de A ccomo omo Ax, Am y Ael no pueden p ueden ser ser identific ident ificados ados een n forma for ma confiable sólo sobre sobr e la base base de las pruebas pr uebas tipificación de sangre. Los estu estudios dios de la saliva, saliva, de aabsor bsorción ción-elusión, transferas t ransferasas as y los estudios estud ios familiares sson on confirmatorias. El cuadro II muestr a las características se se-rológica ro lógicass de los subgru subgru pos de A y B. Los subgrupos de B4 son aún menos comun es que los subgru subgrupos pos de A. Las células células reaccionan débilmente o nada con anti-B y antiant i-A,B. A,B. S See pueden dividir en:
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1. Ant i-B i-B en sue suero; ro; B en saliva. saliva. De ca carácter rácter dominante, domin ante, encontr encon trado ado en familias familias ingle inglesa sas, s, el antiant i-B B reaccion reaccionaa con todas to das las ccélulas élulas B probadas pro badas exce except pto o las propias.
Cuadr o II Cara cterísticas serológicas de subgrup os de A y B Fenotipo eritrocitario
A1 Aint A2 A3 Am Ax Ael B B3 Bm BX Bel
Reacción de células con antisuero contra
Reacción de suero contra eritrocitos
Saliva de secretores
A
B
A, B
H
A1
A1
A2
B
O
4+ 4+ 4+ 4+ 2+cm 0/± 0/± 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0 0 4+ 1+cm 0 0/± 0
4+ 4+ 4+ 2+cm 0/± 1+/2+ 0 4+ 2+cm 0/± 0/2+ 0
0 3+ 2+ 3+ 4+ 4+ 4+ 0 4+ 4+ 4+ 3+
4+ 2+ 0 0 0 0 0
0 0 ** ** 0 2+/0 2+/0 4+ 4+ 4+ 4+ 1+
0 0 0 0 0 0/1+ 0 4+ 4+ 4+ 4+ 1+
4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
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A&H A&H A&H A&H A&H H H B&H B&H B&H H H
1+ a 4+ aglutinación de intensidad creciente; ± aglutinación débil; cm aglutinación de campo mixto, 0 no hay aglutinación. ++ la aparición de anti-A1 es variable en estos fenotipos. Las personas A2 con frecuencia tienen anti A1; las personas A2 suelen no tenerlo, per pero o se han hallado algunos individuos A3 con anti A1 en el suero.
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MG
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2. N o antianti-B B en el el ssuero uero (o (o muy débil anti-B anti-B frío); B en la saliva, saliva, un carácter domin do minant ante, e, llamado Bw, Bw, encontr encon trado ado en raza r aza negra, negra, y en japoneses llamado Bm. 3. N o anti-B anti-B en el sue suero; ro; H pe pero ro no (o dudoso) B en la saliva. saliva. Un ca carácter rácter dom inante inant e llamado B3, encontrado en familias indias, francesas.
Antíge ntígeno no B adq uirido por l os individuos A1 5 El “B adquirido adquirido”” podr ía deberse a la la acción acción de la desac desacetilas etilasaa bacteriana, que convierte conviert e la N acetilgalactosamina en !-gala galacto ctosamina, samina, la cual es muy similar a la galactosa, galactosa, el prin cipal determinant min antee de B. B. Las células B adquirid adqui ridas as se se hacen Dolic ichu hussbif biflolomás reactivas reactivas frente frent e al extr extracto acto de Dol ru russ. También pueden p ueden present presentar ar activaci activación ón T o Tk, Tk , estando mediadasto todas das esas esas alteraciones alteraciones por enzimas bacterianas en en p pacie acient ntes es que cur cursa san n con una infecc infección ión important impor tantee ccomo omo la de colon. Otr O tro o mecanismo de producción produ cción de g gru rupo po B adquiriadquir ido secundario secundar io a la absorción de sustancias bacbacterianas semejante al grupo B se observa en Prot oteeusvulg vulga ariso Escheripersonas infectadas infectadas por Pr chia coli. Tamb También ién se ha desc descrit rito o un grupo B adquirido quir ido qu quee se se detecta sólo en células del grupo A de expresión débil.
Debilitamiento de antígenos A, B y H6 El debilitamiento debilitamient o de la expresión de antígenos AB puede obse ob servarse rvarse en las personas person as de eda edad d avanzada (aparent (aparentan an ser ser grupo grup o O); O ); los anticuerpos antiant iAB también pueden sufrir cambios en estos sujeto suje tos. s. En pacientes que estén estén r eci ecibiendo biendo quimioterapia inmunodepres inmun odepresora ora la concent concentraci ración ón de anticuerpos disminuye significativamente. En ocasiones ocas iones la sangre parece ccont ont ener una u na mezc m ezcla la de células células de los grupos A y O o de A1 y A débil; en otros ot ros casos, casos, los erit eritro rocitos citos reaccionan reaccionan débilmente con el anti-A y se compo comportan rtan de manera parecida al A3 o al Am. Am .
ind ividuoss son individuo son secreto secretores res y se segrega gregan n la sustancia H , independientement independientementee de su g grup rupo o ABO; así así la saliva saliva de ssecretores ecretores de grupo O cont contiene iene H y la de ssec ecreto retores res de g grup rupo o A con tiene A y H . Vei Veinte nte po porr ciento ciento de los iindividuos ndividuos que no segreg segregan an sustancia H (no secretores) tampoco segregan seg regan A ni B.
Agluti nación nación d e cam cam po m ixto Térm ino qu e trata de de desc scribir ribir la pres presencia encia de eritrocitos aglutin aglutin ados y no ag aglutinados lutinados en suspensiones tratadas con con una un a ag aglut lutinin inina. a. Esto quiere indicar que existen dos poblaciones fenotípicamente distintas, como sucede en pacie pacient nt es tr ansfundido s, een n mu jeres que contienen en circulación eritr ocitos fetales, o cuando alguno de los eerit rit ro citos de un sujeto sujeto h a ssufrido ufrido transformac transformación ión T o T n. Puede verse un a morfolo gía similar en mezclas clas de ssuspensiones uspensiones eritr eritrocitarias ocitarias de un ún ico fenot fenot ipo, cuando los eritro citos tienen pocos lugares antigénicos (por (por ejemplo ejemplo , variantes rian tes débiles de A), o cuando la ag aglut lut inin a es de títu lo bajo.
Disc iscrep rep anc ancia ia s entr e p rueb as ccon on 7 eritrocitos y suero Los resultados de las las pruebas con eritrocito erit rocitoss y con suero pueden ser discrepantes debido a los prob lemas intrínsecos int rínsecos de los eritrocito s o del suero, debido a pro problemas blemas rela relacionados cionados con la prueba, o a errores técnicos, ya sea que se han obten o btenido ido resultados nega negativos tivos cuando se esperaban esperaban positivo positivoss o vice viceversa versa..
Negativos falsos Pueden tener t ener lugar debido a la omisión de: 1. Agrega Agregarr reac reactivo tivo o sue suero ro de prueba a un tubo. 2. Ident Identif ific icar ar la he hemólis mólisis is ccomo omo un a rea reacc cción ión positiva. 3. Uso de una rela relaci ción ón apropia apropiada da eentre ntre sue suero ro
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Secretores y no secretores Los genes s,ecretores contro lan% la de sec secrereSe y se cont ción de H secreto A y Bres . Alrededor de drolan e 80 los
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(reactivo) ctivo) ar y eritr eritrocitos. ocitos. 4. (rea Centrifugar Centrifug suf sufic icie ientemente ntemente las prueba pruebas. s. Rev Med Inst Mex Seguro Soc 2006; 44 (Supl 2): 31-37
5. Incubar Incubar las pruebas a temperaturas temperaturas de 20 20-o 24 °C o menores. menores. 6. Interpretar Interpretar o regis registrar trar correctame correctamente nte los resultados de las pruebas. pr uebas.
Positivos falsos Los resultados puede pueden n ocurr ir por: por : 1. Sobrece obrecentr ntrif ifuga ugaci ción ón de los tubos. 2. Uso de reactivos, reactivos, eritrocitos o solución solución sasalina contaminados cont aminados.. 3. Uso de materia materiall de vidrio vidrio ssuci ucio. o. 4. Autoaglutina Autoaglutinaci ción ón de los eritrocitos eritrocitos del del paciente y realización realización sólo del grupo directo d irecto sin autotes autot estigo. tigo. 5. Interpretación Interpretación o regis registro tross incorrectos incorrectos de los resultados de las pruebas. pr uebas.
Resolución de discrepancias ABO El primer paso debe ser la repetición de las pruebas en la misma muestra. Si las pruebas inicialess fueron ef iniciale efectuadas ectuadas con con eritrocitos eritr ocitos suspendidoss een pendido n suero o plasma, se debe repetir la prueba, pru eba, usando usando una suspensión salina de cé célululas lavadas. lavadas. S Sii persiste per siste la discrepancia se pr proceocede a lo siguiente: 1. O btener btener una nuev nuevaa mues muestra (dona (donante nte o receptor) y someter ésta a prueba; esto resuelve las discrepancias debidas a un rot ulado equivocado equivocado o contaminación cont aminación de muestra. 2. Lavar Lavar los erit eritrocito rocito s varias veces veces para elieli-
3. 4.
5.
6.
min ar componentes minar compon entes séricos séricos o químicos que puedan es estar tar causando causando reacciones reacciones positivas po sitivas.. Someter a prueba los los eritrocitos eritrocitos ccon on antiA, B, anti-A1 o anti-H, según según corr espon esponda. da. Si se sospec sospecha ha anti-A1, anti-A1, examinar examinar el suero suero contr a varios ejemplos ejemplos de erit erit rocitos del grupo A2. Revis Revisar ar los resultados resultados de la prueba de de investigac ves tigación ión de anticuerpos anticuerpo s contra cont ra eritrocieritr ocitos del grupo O para detectar efectos de int interfe erferencia rencia por aloanticuerpos fríos inespecíficos. Incubar Incubar las las pruebas durante 30 30 minut minut os a temperatura temperat ura ambient e para facilitar facilitar la detección tecc ión de antígenos o anticuerpos débiles. débiles.
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Resolución de discrepancias debidas a la ausencia de antígenos esperados
Araceli Arac eli Nieto Rodríguez. Discrepancias en el grupo sanguíneo ABO
La causa causa de una discrepancia discrepan cia puede se serr in ferida a veces veces de la fuerza de las reac r eacciones ciones ob tenidas en las pruebas de agrupación con eritrocitos o suero. Se pueden usar los siguient siguient es procedimien pr ocedimien-to toss para intensif inten sificar icar la detección de antígenos débilmentee expresados: débilment expresados: 1. Incubar Incubar eritrocitos lav lavados ados con aanti-A nti-A y anti-A, B durante dur ante 30 minu minuto toss a temperat temperatuura ambiente ambient e para incrementar asociación asociación de anticuerpo ant icuerposs ccon on esc escasa asa cantidad de ant ígeígeno. Incubar In cubar a 4 °C puede intensificar intensificar aún más la fijación fijación del anticuerpo ant icuerpo,, pero deben ser ser contro cont rolada ladass ccon on erit rocito rocitoss de grupo O y autólo aut ólogos gos para as asegurar egurar qu quee las reacciones son debidas a anti-A y anti-B y no a ot otras ras aglut aglutinin ininas as frías. frías. 2. Tratar los eritrocitos eritrocitos de dell paci paciente ente ccon on una enzima proteolít pro teolítica ica,, como ficina, papaína, o bromelina. br omelina. El tratamie tr atamient nto o enzimático incrementa la reacción antígeno-anticuerpo con anti-A o anti-B. Paralelamente se deben incluir eritrocitos del del grupo grupo O tratados con enzim as como como cont control rol de la eespec specific ificiidad de la reacci reacción ón ABO ABO.. 3. Realiza Realizarr adsorciónadsorción-elus elusión ión con anti-A o antiant i-B B hu humano manoss para adsorber el anticuerpo a los cor cor respon dient es ant íge ígeno no s eritrocitarios. No se debe usar anti-A1 o reactivos mono mo noclonales clonales y debe hacerse hacerse en paralelo con eritro citos de grupo O para paralelo control. 4. Buscar uscar en la sali saliva va la pres presencia encia de sus sustantancias H , A o B.
Resolución de discrepancias debidas a reacciones inesperadas con anti-A y anti-B
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Las pruebas de agrupación agrupación de erit rocito s dan reacciones inesperadas, pueden ser responsables alelos alelos varian variantes tes en el locus ABO o problepr oblemas no relac r elacionados ionados con los genes genes AB ABO O. Para confirmar que los eritrocitos eritr ocitosB del grurupo A1 A 1 port an la estru estructura ctura adquirida B: : g MG
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Araceli Niet o Rodríguez. Araceli Discrepancias en el grupo sanguíneo ABO
1. Verifi Verifica carr el diag diagnóstico nóstico del pacie paciente. nte. Los antígenos adquiridos adquir idos B suelen suelen relacionar relacionarse se con afec afecciones ciones hísticas hísticas que permiten perm iten ingresar a las bacterias bacter ias del colo colon n a la circulación. circulación . 2. Someter a prueba eell suero suero del pacie paciente nte contra tr a eritrocitos eritro citos autólogos. El anti-B del individuo no ag aglutina lutina sus propios eritrocitos eritro citos que portan por tan el B adquirido. 3. Someter ometer a prueba los eritrocitos eritrocitos con con suero anti-B humano que ha sido acidificado a pH 6.0. 6.0. El ant i-B i-B humano ac acidific idificado ado no reacciona reacc iona con el antígeno B adquirido adquirido.. 4. Si el el paciente paciente es es secretor, secretor, comprobar compro bar la presencia de A y B en la saliva. Los secreto secretores res cuyos eritrocito s portan estructur estru cturas as B adquir idas tienen tien en sustancias A, pero per o no B en su saliva.
Eritrocitos revestidos por anticuerpo Los eritr eritrocitos ocitos de la lactantes ctantes con con EHRN EH RN , o adul-
1. Los pacientes pacientes inmuno inmunodef defic icientes ientes puede pueden n no producir pro ducir n nivele iveless detec detectable table de anti-A y antiB; estos ant anticuerp icuerpos os están ausent ausentes es del suero de recié recién n n acidos, acidos, o ser mu muy y débiles en personas person as seniles no norm rmales ales.. 2. Concentraci Concentraciones ones aanorm norm ales ales altas altas de antianti-A A y ant i-B i-B han causa causado do r eacc eacciones iones pr prozon ozon a que dieron lugar a resultados nega negativos tivos falsos; en en esto estoss ca casos, sos, el g gru rupo po ABO se puede inferir mediante pruebas en eritro eritrocitos citos por dilución del suero media m ediant ntee el uso de sue suero ro tratado con con EDT A. 3. El aantinti-A A en eell suero suero de indiv individuos iduos A2, A2B u otr otros os subg subgrupo ruposs ag aglutin lutinaa eritrocitos ttes estigos tigos A1. 4. La Lass autoaglutin autoaglutininas inas frías como antianti-II y antiIH IH,, pueden aglutin aglutinar ar los eeritr ritrocitos ocitos de todo todoss los adultos, adult os, in incluidas cluidas las células autó autólogas logas y eritrocitos testigos, cuando esta reactividad interfiere en la interpretación int erpretación de las pru pruebas ebas:: a) Cale Calentar ntar el sue suero ro y los eritrocitos testig testigos os a 37 ° C an antes tes de mezcla mezclarlo rloss y realizar las pruebas en en suero a 37 °C y convertir convertirlas las a
tos to s que padecen padecen de afec afecciones ciones autoin munes mu nes o la fase fase ant antiglobulin iglobulinaa si es nece necesario. sario. aloinmunes, pueden estar estar t an intensa int ensamente mente rer eb) Elimina Eliminarr la aautoagl utoaglutinina utinina fría del sue suero ro vestidos ves tidos de d e moléculas de ant anticuerpos icuerpos IgG como com o mediante un método métod o de aauto utoads adsorción orción para aglutin aglutin arse en en forma for ma espon espon tánea en prepr efría, el suero suero adsorbido puede ser somese sencia ncia de diluyentes diluyent es de reactivos reactivos que cont entido contr con traa erit eritrocito rocitoss tes testigos tigos A1 y B B.. ga gan n altas concent concentraciones raciones de prot eínas. eínas. c) Tratar eell suero suero ccon on DT T y usar usar el sue sue-Se puede usar un a elusión suave a 45 45 °C o ro tr atado para pru pruebas ebas de ag agrup rupac ación ión con glicina glicina a pH ác ácido, ido, para eliminar gran parp arinversa. te de este este ant anticuerpo icuerpo de los erit eritro rocitos citos de modo 5. Aloanticue Aloanticuerpos rpos ines inesperados perados que re reac acci cionan onan que se pueda someter a prueba en form a cona temperatura ambiente como anti-P o antifiable con con ant antii-A A y ant antii-B B. M, pueden aglutinar los eritr ocitos usados Los eritr eritrocitos ocitos de una muestra que contenga en las pruebas con suero si portan el coautoaglutininas autoaglutin inas IgM IgM reactivas con el frío puerrespondientee antíge rrespondient antígeno, no, para ve verr el tipo coden aglutin aglutinar ar en forma espontánea espont ánea en en pr uebas rrec rr ecto to de ABO de un suero qu e cont cont enga de solución solución salina. Por lo común, comú n, los anticuerotr os aloa aloant nticuerpos icuerpos fríos real realizar: izar: pos puede pu eden n ser ser eli eliminados minados incubando la suspensuspena) Ele Elevar var la la te temperatura mperatura a 3030-37 °C antes de mezclar el suero y las células, si la sión celular a 37 °C y luego lavando varias veces veces temperatur a del aloa aloant nticue icuerpo rpo es inf infeecon solución solu ción salina salin a calent calentada ada a 37 °C. °C . S Sii la agluaglurior a la cual reac reaccionan cionan an anti-A ti-A y an anti-B ti-B,, tinac tin ación ión relacion relacionada ada con con IgM no es eliminada eliminada esto esto puede rres esolver olver la discrepancia. por esta esta técnica, los eritrocitos eritr ocitos pueden ser tratatr atados con con sulfhidrilo ditiotreitol ditiotr eitol ((DT DTT). T).
Resolución de discrepancias debidas a reacciones séricas inesperadas8
Referencias
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Algunos acontecimientos acontecimient os pueden ocasion ocasionar ar re-
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