Digestion de Grasas

“AÑO DE LA INVERSIÓN PARA EL DESARROLLO RURAL Y LA SEGURIDAD ALIMENTARIA“

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA

ESCUELA DE INGENIERIA AMBIENTAL VI CICLO

BIOQUIMICA EXPERIMENTAL

DIGESTION DE LAS GRASAS:

EMULSIFICACION DE LAS GRASAS Y ACTIVIDAD DE LA LIPASA PANCREÁTICA PRESENTADO POR:

CONTRERAS SANCHEZ, JHANCARLOS CORTIJO ARTEAGA EDINSON ARMANDO CUEVA PAREDES EDINSON JOEL GUIA: DR. MARCO SALAZAR CASRILIO MS. PATRICIA TORRES PLASENCIA

TRUJILLO – PERU 2013

DIGESTION DE LAS GRASAS:

EMULSIFICACION DE LAS GRASAS Y ACTIVIDAD DE LA LIPASA PANCREÁTICA INTRODUCCION La grasa neutra, que representa mayor fracción de las sustancias grasas de la dieta, es formada por glicerol ligago a tres moléculas de ácidos grasos. Los ácidos grasos son liberados del glicerol, en el intestino delgado, sobre todo por la acción digestiva de la lipasa pancreática. Sin embargo, las sales biliares de la bilis son también necesarias para la digestión completa de las grasas. Esas sales ejercen acción detergente sobre los glóbulos de grasas, ayudando en el desdoblamiento de la grasa en partículas muy pequeñas que pueden entonces ser digeridas. Por otro lado, a medida que los ácidos grasos van siendo removidos de las grasas durante el proceso digestivo, ellos se prenden a las sales biliares y son "transportados" bajo esa forma para los intestinos, donde son absorbidos. Al pasar por los intestinos, los ácidos grasos vuelven a combinarse con el glicerol, formando nuevos pequeños glóbulos grasos recubiertos por camada de proteína y llamados quilomicrones. Esos quilomicrones pasan para la linfa, en los intestinos, y son transportados en dirección al canal toraxico, por donde son despejados en la sangre, y por último depositados en las células de grasa diseminadas por todo el cuerpo. Cuando esa grasa almacenada debe ser utilizada para la producción de energía es desdoblada de nuevo en el interior de las células grasas en glicerol y ácidos grasos; y esos ácidos grasos son transportados por la sangre, para que sean usados por las células de los tejidos, en su mayor parte, para producir energía. Gran parte de esa grasa también es usada por el hígado para la formación de otras sustancias en todo el cuerpo.

Conceptos clave Emulsificación de las grasas: Proceso mediante el cual se transforman las grasas en gotas más pequeñas para que las enzimas puedan actuar sobre ellas. Bilis: Es un emulsificante de grasas producido en el Hígado de los seres humanos. Sitio de producción de bilis: Hígado Sitio de degradación de las grasas en el aparato digestivo: En el intestino delgado en el duodeno. Digestión química: Es cuando se transforma las sustancias complejas a más simple para que el organismo las pueda absorber esto ocurre en la boca, en el estomago y en el intestino delgado. OBJETIVOS:  Demostrar el efecto que tiene las sales biliares sobre las grasas.  Demostrar el efecto que tiene las sales biliares sobre la lipasa pancreatica.  Demostrar la accion que tiene la lipasa pancreatica sobre los triacilglioceroles contenidos en la leche de vaca.

MATERIALES: Materiales biológicos:  Leche fresca de vaca diluida al ½  Solucion de extracto pancreatico al 1%  Solucion de bilis al 1% Materiales y Equipos de laboratorio:  Gradillas para tubos.  Tubos de ensayo de 16 x 125 mm 20 x 150mm.  Pipetas de 1mL al 1/100, 2mL, 5 mL y 10 mL.  Baño María a 37° C.

 Pizeta con agua destilada.  Goetro o pipeta de plastico descartable. Reactivos:  Bicarbonato de sodio al 0,45%.  NaOH 0,01N.  Fenoltaleina al 1%. PROCEDIMIENTO. A. SISTEMA DE INCUBACION:  A 3 tubos de ensayo y se añaden los reactivos que se detallan en la Tabla 1. Se agitan suavemente e incuban en baño termostatizado a 37 ºC los tiempos indicados. Tabla 1: Sistema de preparacion de tubos de ensayo y encubacion. COMPONENTES (mL) y PROCESO

I 10 1

TUBOS II 10 1 1

III Solucion de leche al 1/2 10 solucion de bilis 1% solucion Bicarbonato 0.4% 1 solucion Ext. Pancreatico 1% 1 1 MEZCLAR e INCUBAR (con un lapso de 5 minutos entre tubo y tubo) a 37ºC durate 0.15, 30 y 45 minutos.

B. SITEMA DE EVALUACION DE LA ACTIVIDAD DE LIPASA:  A medida que se cumplen los tiempos de cada tubo en el baño maria a 37ºC deacuerdo la tabla 2, se extraen en tubos diferentes muestras de 2mL de cada tubo y se le añade inmediatamente 2 gotas de fenoltaleina y luego se titula con NaOH 0.01N. Anotar el volumen gastado. Tabla 2: Sistema de evaluacion de la actividad de lipasa. TUBOS I II Parte A Parte A Alicuota a los 0 minutos 2 2 Fenoltaleina 1% 2 gotas 2 gotas mezclar y titular con NaOH 0,01N. Anotar el volumen gastado Alicuota a los 15 minutos 2 2 Fenoltaleina 1% 2 gotas 2 gotas mezclar y titular con NaOH 0,01N. Anotar el volumen gastado Alicuota a los 30 minutos 2 2 Fenoltaleina 1% 2 gotas 2 gotas mezclar y titular con NaOH 0,01N. Anotar el volumen gastado Alicuota a los 45 minutos 2 2 Fenoltaleina 1% 2 gotas 2 gotas mezclar y titular con NaOH 0,01N. Anotar el volumen gastado COMPONENTES (mL) y PROCESO

III Parte A 2 2 gotas 2 2 gotas 2 2 gotas 2 2 gotas

RESULTADOS. Los resultados obtenidos en la practica se expresasn en la tabla 3. Tabla 3. Gasto de NaOH 0.01 N en la titulacion de las muestras extraidas a difernetes tiempos de los tubos I, II y III.

TIEMPO DE INCUBACION (minutos)

0,0 15,0 30,0 45,0

TUBOS (Gasto de NaOH 0,01 N) I II III 1,21 0,69 0,92 1,63 0,7 1,24 2,22 0,7 1,66 2,41 0,76 1,96

La actividad de la lipasa pancreatica esta expresada por el gasto de NaOH 0.01 N. como se liberan acido grasos por accion de la enzima, el menor o mayor gasto de alcali necesario para utilizar el medio acido equivaldra, respactivamente, a una menor o mayor actividad de lipasa pancreatica. Comparar los resultados con o sin solucion de bilis, discutir y finalmente interpretar.

mL de NaOH 0,01 N gastados

Actividad de la lipasa pancreatica 3.0 2.5 2.0 TUBO I

1.5

TUBO II

1.0

TUBO III

0.5 0.0 0,0

15,0

30,0

45,0

Tiempo (minutos)

Grafica 1. Actividad de la lipasa según tiempo de incubación En está práctica observamos la acción de la bilis sobre las grasas, esto lo conseguimos utilizando una sustancia con la bilis y otra sin está. En las siguientes imágenes se muestra el resultado. DISCUSIÓN La actividad de la lipasa pancreática está expresada por el gasto de NaOH 0.01N. Como se liberan ácido grasos por acción de la enzima, el menor o mayor gasto de álcali necesario para neutralizar el medio ácido equivaldrá, respectivamente, a una menor o mayor actividad de la lipasa pancreática. Los datos del tubo I de la tabla 3, muestra que la actividad de lipasa pancreática es mayor en comparación a la actividad de la misma enzima en los tubos II y III, esto debido a que en el sistema se encuentran todos los elementos necesarios para que la enzima trabaje en forma optima. La solución de bilis emulsifica a los lípidos presentes en la leche facilitando el trabajo de la enzima. Los datos del tubo II de la tabla 3, la lipasa pancreática no está presente siendo los valores de las titulaciones constantes. Los datos del tubo III de la tabla 3, la actividad de la enzima es menor debido a que solo tiene bicarbonato y la solución de bilis está ausente. Por lo tanto la emulsificación no es la óptima. Se puede observar la actividad de la lipasa pancreática en el grafica 1 en los 3 tubos en los diferentes tiempos, confirmando lo descrito anteriormente. CONCLUSIÓN Las sales biliares emulsifican las grasas. Las sales biliares facilitan la actividad de la lipasa pancreática.

La lipasa pancreática digiere los triacilgliceroles contenidos en la leche de vaca liberando monoacilgliceroles, ácidos grasos y glicerol. REFERENCIAS.  Barcena Ruiz, J.A., Garca Alfonso, C., Padilla Pe~na, C.A., Martnez Galisteo, E., y Dez Dapena, J. Caracterizacion Cinetica de la fosfatasa. Departamento de Bioqumica y Biologia Molecular, Universidad de Cordoba.  Stryer L, Berg JM, Tymoczko JL (2003): “Bioquímica”, 5ª ed. Editorial Reverté (Barcelona, España), pp 577-580.  LIPIDOS O GRASAS. http://www.aula21.net/Nutriweb/grasas.htm  Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación y la Organización Mundial de la Salud. Roma, 19-26 de octubre de 1993. Grasas y aceites en la nutrición humana. Consulta FAO/OMS de expertos. (Estudio FAO Alimentación y Nutrición - 57). Aspectos sobre la digestión y el metabolismo de las grasas. Recuperado de http://www.fao.org/docrep/v4700s/v4700s07.htm.  http://www.fitness.com.mx/medicina185.htm  http://www.saber.ula.ve/bitstream/123456789/32972/7/clase_09.pdf  http://www.fao.org/docrep/v4700s/v4700s07.htm

CUESTIONARIO. 1. ¿Por qué es necesario trabajar con un lapso de 5 minutos entre tubo y tubo en la incubación a 37°C? El lapso de los 5 minutos es para que alcance el tiempo para titular el producto, sin que afecte el tiempo de la actividad enzimática de los diferentes tubos. 2. ¿Sobre qué moléculas de la leche actúa la lipasa pancreática? Actúa sobre los triacilgliceridos que han expuesto su enlaces éster en la micela, liberando ácidos grasos. La Lipasa pancreática actúa sobre la grasa finamente emulsionada, y la bilis corta la grasa. 3. ¿Sobre qué moléculas de la leche actúa la solución de bilis? La bilis, actúan en la grasa butírica de la leche, forman un detergente que emulsiona las grasas y las transforma en gotas microscópicas o quilomicrones y en ese estado pueden ser absorbidos por pinocitosis en la mucosa intestinal facilitando así la actividad de la lipasa pancreática. 4. ¿Qué acción ejercerán la solución de bilis y bicarbonato sobre la leche? La bilis y el bicarbonato de sodio (indicador de pH alcalino) actúan como emulsificante para las grasas que se encuentran en la leche. Es decir dividen las sustancias grasas. 5. ¿A qué se denominan sales biliares? Las sales biliares (los principales constituyentes de la bilis.) se sintetizan en el hígado, se almacenan y concentran en la vesícula biliar y, posteriormente, se liberan al intestino delgado. Las sales biliares se utilizan en el intestino delgado para la emulsificación y absorción de las grasas, colesterol, fosfolípidos y lipoproteínas. El colesterol se hace soluble en la bilis por parte de las sales biliares. El principal pigmento biliar es la bilirrubina se degrada en el intestino y uno de sus productos de la degradación (el urobilinógeno) le da a las heces su color característico. La regulación de la secreción de bilis está determinado por varios factores entre ellos la presencia de grandes cantidades de sales biliares en la sangre también aumenta el índice de producción de bilis. 6. ¿A parte de la leche, qué muestras pueden ser también empleadas en la presente experiencia pancreática? La leche es una solución liquida y fácil de cortar, otras muestras se pueden usar serian por ejemplo: grasa de cerdo, mantequilla o productos como queso u otros.