diametro de ovocitos

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA FACULTAD DE PESQUERIA REPRODUCCIÓN Y GENETICA DE ORGANISMOS ACUATICOS

CUARTA PRÁCTICA Estimado de la fecundidad y medida del diámetro de los óvulos ó vulos I. INTRODUCCIÓN Wydosky y Cooper (1966) definen a la fecundidad como el número de óvulos producidos por una hembra antes del desove. De ahí que se considera fecundidad absoluta como el número de ovocitos maduros producidos en una estación de desove o en un año, y a la fecundidad parcial como el número de óvulos producidos por un reproductor parcial en cada desove, en tanto la fecundidad relativa es el número de óvulos producidos por  unidad de peso somático en una estación de desove. El número de óvulos que produce una especie íctica varía ampliamente desde unos pocos miles, como en el pejerrey, hasta varios millones, como en el bonito. En general las altas fecundidades se observan en peces que desovan huevos pelágicos, como en el caso de la caballa, un número intermedio (100 a 10 mil óvulos) en especies que dejan caer sus huevos al fondo o en la vegetación, como en la carpa común, mientras que un bajo número de óvulos se da en especies que cuidan su prole como la tilapia. La fecundidad puede ser estimada por diferentes métodos que pueden ser agrupados en métodos directos e indirectos. Los directos se utilizan en especies con pocos óvulos y se realiza un conteo total. Los indirectos se utilizan para especies con alta fecundidad, y se estima el numero de ovocitos a partir de submuestras. Se puede medir el diámetro de los ovocitos de gónadas en fresco disociadas en agua de mar filtrada o agua dulce (de acuerdo con la especie) o en una solución fisiológica, Es un método rápido para la confirmación del estadio de madurez, asimismo el tamaño medio característico de cada estadio ya deben ser conocidos a través de estudios sistemáticos realizados anteriormente. Para tales estudios se disocian los ovarios mediante la solución de Gilson Modificada. Los ovar ovario ioss son son reti retira rado doss de la cavi cavida dad d abdo abdomi mina nal,l, sus sus memb membra rana nass secc seccio iona nada dass longitudinalmente en toda su extensión y son colocados en la solución Gilson (proporción 1:3). Después de 15 minutos se agita fuertemente el frasco para que ocurra un primer  fraccionam fraccionamiento iento de la masa de óvulos. óvulos. Se dejan los ovarios en Gilson por un periodo de tiempo suficiente para que, por agitaciones fuertes y sucesivas del frasco, ocurra la completa separación de los ovocitos. No se dee permitir una completa disociación de las membranas., o se tendrá dificultad en la limpieza del material. Poster Posterior iormen mente te los ovario ovarioss disoci disociado adoss son transf transferi eridos dos a una placa placa petri petri donde donde son retiradas las membranas (con auxilio de una pinza y un pincel). Toda la masa de ovocitos disociados es transferida a un envase con alcohol al 70%. Se efectuan varios lavados con alcohol y se eliminan los residuos. Los ovocitos pueden ser mantenidos en alcohol al 70%.

Ing. Beatriz E. Angeles E.

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Para obtener la distribución de frecuencias del diámetro de los ovocitos se colecta una muestra de la masa total de ovocitos disociados en una suspención en alcohol al 70%, con una pipeta Stempel teniendo cuidado de homogenizar muy bien la suspensión en el momento de realizar la colecta de la mestra. Esto tiene la ventaja de permitir obtener una muestra representativa del total de ovocitos existentes en los ovarios. En un estereoscopio con el auxilio de un ocular micrométrico se realiza la medición y conteo de los ovocitos. Luego se calcula la frecuencia relativa (%) de ovocitos por clase de diámetro (en micras), y se ubican los resultados en gráficos (abcisa: clases de diámetro, ordenada: frecuencia relativa por clase) Se debe efectuar tal procedimiento para cada par de ovarios, o sea, para cada individuo. El análisis de tales gráficos nos ofrece información sobre el grado de desarrollo de los ovarios (la moda más avanzada corresponde al grupo de ovocitos más desarrollados), y sobre el tipo de desove de esta especie (el número de modas indica los lotes de ovocitos que están en desarrollo, en distintas fases). Si la especie es un desovador total tendremos un lote en stock y otro en estado de maduración (A). Si es un desovador parcial tendremos un stock y dos o más grupos de ovocitos en maduración. (B)

S

B

S

%

M

Diámetro de los ovocitos

M1

M2

Diámetro de los ovocitos

II. OBJETIVOS -

Comparar el diámetro de los ovocitos en gónadas en diferentes estadios de desarrollo Determinar el estadio de madurez o tipo de desove a través de la medición del diámetro de los ovocitos

III. MATERIALES Y METODOS Microscopios Estereoscopios Equipo de disección Porta y cubre objetos Placas petri Pincel Agua o solución fisiológica Ing. Beatriz E. Angeles E.

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Balanza Papel platina Papel milimetrado

3.1. Procedimiento: -

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Pesar y medir las gónadas Identificar la zona anterior, media y posterior de las gónadas. Cortar tres trozos (uno de cada parte) con un peso similar, ponerlo en papel platina y pesarlos. Ubicar cada trozo en una placa petri e ir separándolos con un pincel y una pipeta Medir los ovocitos de cada muestra (grandes, medianos y pequeños) con el microscopio

IV. RESULTADOS a) Definir macroscopicamente si es una gonada inmadura, en maduración, madura o en desove. b) Ingresar los datos de cada una de las muestras tomadas de las gonadas, en una hoja de excel c) Con los datos obtenidos determinar la frecuencia (%) de cada talla (grandes, medianos y pequeños). La Frecuencia es el número de ovocitos de cada talla entre el total de ovocitos por 100 c) Graficar en el eje de la X el diámetro de los ovocitos y en el de la Y la Frecuencia (%) d) Indicar si la especie es un desovador total o parcial, y si existe una relación entre el diámetro de los ovocitos y el estadio de madurez.

V. BIBLIOGRAFÍA Tresierra, A. Culquichicón, Z, y Veneros, B. 2002. Biología Reproductiva en Peces. CONCYTEC. 286 pág. Vazzoler, A.E.A. de M. 1982. Manual de metods para estudos biológicos de populacoes de peixes. Reproducao e crescimento.CNPq. Programa Nacional de Zoología. Coordenacao Editorial. 108 pág.

Ing. Beatriz E. Angeles E.