Determinacion de Vitamina C

 

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

TEMA: DETERMINACION DE VITAMINA C



  CURSO:

ANÁLISIS INSTRUMENTAL I NSTRUMENTAL 

  ALUMNO:

GLEYSER BURGOS AGREDA 

  DOCENTE:

ING. Moisés toro



  GRUPO: “B” 

Noviembre  – 2017 Nuevo Chimbote - Perú

 

1

Universidad Nacional del Santa

DETERMINACIÓN DE VITAMINA “C” POR

ESPECTROFOTOMETRÍA

INTRODUCCIÓN   INTRODUCCIÓN La vitamina C, o ácido ascórbico, es un compuesto hidrosoluble de 6 átomos de carbono relacionado con la glucosa. Su papel biológico principal parece ser el de actuar como cofactor en diversas reacciones enzimáticas que tienen lugar en el organismo. El ácido ascórbico actúa como coenzima de las hidroxilasas de prolina y lisina, encargadas de hidroxilar la lisina y prolina en el protocolágeno, modificación necesaria para que éste pueda formar los enlaces cruzados para formar las fibrillas de colágeno. Por ejemplo, ayuda a la absorción del hierro al reducirlo a su estado ferroso en el estómago; protege la vitamina A, vitamina E y algunas vitaminas B de la oxidación; también favorece la utilización del ácido fólico ayudando a la conversión del folato en tetrahidrofolato o mediante la formación de derivados poliglutamato del tetrahidrofolato. Finalmente, la vitamina C es un antioxidante biológico que protege al organismo del estrés oxidativo provocado por las especies oxigeno reactivas. La vitamina C se encuentra principalmente en alimentos de origen vegetal y puede presentarse en dos formas químicas interconvertibles: ácido ascórbico (forma reducida) y ácido dehidroascórbico (forma oxidada), siendo ambas formas funcionales biológicamente y manteniéndose en equilibrio fisiológico. Si el ácido dehidroascórbico es hidratado se transforma en ácido dicetogulónico, no activo biológicamente, siendo esta transformación irreversible. Esta hidratación ocurre espontáneamente en disolución neutra o alcalina.

 

2

Universidad Nacional del Santa

OH

O C OH 4   5

HO

OH O 1 3

HO

O

HO

5

2  

O 1 O

4 3

OH

O

2 O

Ácido dehidroascórbico

O

C

O

C

H

C

OH

HO

C 

H

CH2

OH

Ácido dicetogulónico

OBJETIVO  

Determinar el efecto de la longitud de onda dominante en el análisis cuantitativo cuantitativ o por espectrofotometría. espectrofotometría.

FUNDAMENTO Cada determinación de análisis cuantitativo por espectrofotometría debe realizarse en una longitud de onda específica a fin de que los datos a obtenerse sean precisos y exactos. La determinación del contenido de ácido ascórbico en frutas y vegetales puede realizarse por diversos métodos. Basa en la reducción del colorante 2  – 6 Diclorofenol por efecto de la solución estándar de colorante; esta capacidad es determinada espectrofotométricamente.

 

3

Universidad Nacional del Santa

EQUIPOS  

Espectrofotómetro Espectrofotómetr o Spectromon 401

 

4

Universidad Nacional del Santa

MATERIALES Y METODOS  

Materiales : Cubetas del Espectrofotómetro Espectrofotómetro Filtros del Espectrofotometro 480, 520 y 540 nm. Papel Tissue Pipetas 1, 2, 3, 4, 5 y 10 ml Fiolas de 100 y 1000 ml. Tubos de Prueba.

 

5

Universidad Nacional del Santa

 

MUESTRAS

CUBETAS DEL ESPECTROFOTROMETRO

FIOLAS

FILTROS DEL ESPECTROFOTOMETRO

PIPETAS

 

6

Universidad Nacional del Santa

Reactivos a) Preparar una solución de ácido oxálico al 0.4 % pesar 4gr. De este ácido y llevar a volumen de 1000 ml. Con agua destilada. b) Soluciones estándar (madre) de ácido ascórbico: Preparar una solución de 0.1 % de ácido ascórbico en una solución ácida de 0.4 % de ácido oxálico. Pesar 100 mg. de ácido ascórbico y llevar a volumen de 100 ml. con una solución de ácido Oxálico al 0.4 %. c) Estándares de trabajo (ET): Tomar 1, 2, 3, 4 y 5 ml. de la solución madre de ácido ascórbico y llevar a volumen de 100 ml. con una solución de ácido oxálico al 0.4 %. Esta solución numeradas del 1 al 5 contendrán 1, 2, 3, 4 y 5 mg. de ácido ascórbico por 100 ml. respectivamente. d) Solución coloreada coloreada (Colorantes): pesar 12 mg. de 2  – 6 DFIF , disolver y llevar a 1000 ml. de volumen con agua destilada. Utilizar agua destilada hirviente. Almacenar en botella de color oscura y en refrigeración. 2.  Preparación de la Curva Estándar. a) Tomar 4 tubos de prueba y enumerarlas de I al IV y agregar lo siguiente:

b) c) d) e)

I 1 10ml. ml.de deácido aguaoxálico destilada II al 0.4% 0.4% III 1 ml. de estándar de trabajo (ET) Nº 1 + 9 ml. de agua IV 1 ml. del estándar de trabajo (ET) Nº 1 Ajustar a cero la Absorbancia usando I y el filtro seleccionado. Al tubo II añadir 9 ml. del colorante y exactamente exactamente después de 15 segundos, leer la absorbancia. Ajustar a cero la absorbancia con la la solución del tubo III Al tubo IV añadir 9 ml. del colorante y exactamente después de 15 segundos, leer la absorbancia (L2).

3. Método: Preparación de la Muestra. a) Marcar 50 gr. De muestra fresca con 350 ml. de una solución de ácido ácid o oxálico al 0.4 % en una licuadora por 3 min. y luego filtrar. b) Determinar L1 como se describió anteriormente (paso 3) c) En el tubo III colocar 1 ml. de filtrado (muestra) mas 9 ml de agua ajustar al cero la absorbancia. d) Luego en el tubo IV colocar 1 ml. de filtrado (muestra) mas 9 ml de colorante y registrar la absorbancia L 2 después de 15 segundos. e) Calcular (L1 - L2) y obtener la concentración de ácido ascórbico ascó rbico a partir de la curva estándar.

RESULTADO Y DISCUSIÓN Presentar curva Estándar. Estándar.

 

7

Universidad Nacional del Santa

Presentar curva Experimental. Experimental. Calcular la concentración concentración de ácido ascórbico presente en la muestra a 480, 520 y 540 nm. Discuta de acuerdo a sus datos datos encontrados cuá cuáll de las longitudes longitudes de onda es la más recomendable para el análisis cuantita cuantitativo tivo de vitamina C.

[ ] mg/ml

L1

L2

L1- L2

2

0.0638

0.0190

0.0448

4

0.0724

0.0133

0.0591

6

0.0704

0.0121

0.0583

8

0.0544

-0.0061

0.0605

10

0.0645

-0.0023

0.0668

Para obtener una grafica con una regresión optima de 0.09767 se modificara los datos e iliminazmos la concentración en 4mg/100ml ya que por una manipulación inadecuada del alumno en la soluciones pues existio una variación negativa para la grafica.

[ ] mg/ml 

L1

L2

L1-L2

Naranja

0.0735

0.0647

0.0088

piña

0.0759

0.0649

0.011

limon

0.0726

0.0586

0.014

 

8

Universidad Nacional del Santa

Absorbancia 0.08 0.07

y = 0.0027x + 0.0402 R² = 0.9767

0.06       A       I 0.05       C       N       A       B 0.04       R       O       S       B 0.03       A

0.02 0.01 0 0

2

4

6

8

10

12

GRAFICA.1

DISCUSION Según  el ICBF el contenido de Vitamina C que debe tener el limón según la información nutricional (Tabla 2. Contenido de Vitamina C en Limón) es de 38.7 mg

de vitamina C por 100ml de éste. Entonces los 5 ml que usamos tendrían que tener la misma concentración.  Al hacer la solució solución n de 5ml de zumo y 35 ml de agua destilada tendríamos tendríamos una solución de 40 ml en total Cuando se usa la formula c1v1=c2v2 da q la solución tendría que tener alrededor de 4.8 mg de vitamina, éste resultado si da en nuestra curva de absorbancia, entonces lo que sólo está mal es la lectura L2 que operando nos da 0.8818 de absorbancia, pero debe ser aproximadamente 0.0256, entonces hicimos estos cálculos modificando el L2 según la gráfica N.1.

CONCLUSIONES:

 

9

Universidad Nacional del Santa

  En primer lugar se puede observar que el zumo de limón es el que



contiene mayor cantidad de ácido ascórbico. Además, como era de esperar, al realizar la valoración recién exprimido el contenido resultante es mayor que cuando se realiza con las otras dos condiciones.   Se determinó la cantidad de vitamina vitamina c en una una muestra de zumo zumo de



limón, esta prueba permitió conocer la cantidad la cual fue de 34,5 mg. este resultado está dentro de los rangos permitidos.

I. 

REFERENCIAS REFERENCI AS BIBLOGRÁFI BIBLOGRÁFICAS: CAS: 1. Badui, S. 1996. Química de alimentos. Editorial Editorial Alambra, México, pp. 54-72. 2. Hart, L.; Fisher, H. 1991. Análisis Moderno de los Alimentos. 2da reimpresión. Editorial Acribia. Zaragoza, España, pp- 80-92 3. Nielsen, S. 2003. Análisis de los alimentos. Manual de laboratorio. Editorial Acribia Zaragoza. Tercera edición. España, pp- 60-76 4. VAN DER LAAT, J.1954.Estudio comparativo de ácido cítrico y vitamina c en el jugo de algunas variedades de Citrus de uso popular. Rev. Biología Tropical .Vol. 2.ppt 45-58 5. Zago, K.; Garcia, M.; Di Bernardo, M. 2010. Determinación del contenido de vitamina C en miel de abejas venezolanas por volumetría de óxidoreducción.