Determinación de Lípidos

 

UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA INGENIERÍA QUÍMICA GESTIÓN PRODUCTIVA 1.2

PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS OBJETIVO Realizar pruebas de identificación de lípidos y grasas, así como de algunas reacciones de las grasas.

INTRODUCCIÓN Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e hidrógeno y generalmente también oxígeno. Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que tienen en común estas características:   Son insolubles en agua

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  Son solubles en disolventes orgánicos (éter, cloroformo, benceno)

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Clasificación de los lípidos Los lípidos se clasifican en dos grupos, atendiendo a que posean en su composición ácidos grasos (saponificables) o no lo posean (insaponificables).   Lípidos saponificables

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Simples: Acilglicéridos, Céridos Complejos: Fosfolípidos, Glucolípidos   Lípidos insaponificables

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Terpenos Esteroides Prostaglandinas

MATERIALES Y REACTIVOS: 6

Materiales Tubos de ensayo

Reactivos Solución de NaOH al 20%

 

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Gradilla

Solución de Sudán III:   Sudán III en polvo.   Alcohol etílico. 

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2 Varillas de agitación 1 Lámpara de alcohol 1 Trípode 1 Rejilla 2 Vasos de precipitación de 50 ml 1 Vaso de precipitación de 100 ml 1 Vaso de precipitación de 500 ml 2 Pipetas de 5 ml 1 Probeta de 100 ml 1 Embudo cónico 1 Termómetro 1 Espátula 3 Pinzas para tubo de ensayo 1 Pera Papel filtro

Tinta china roja Éter o acetona Aceite de oliva

Equipos Balanza analítica Baño María

PROCEDIMIENTO: 1.  PREPARACIÓN DE REACTIVOS: SUDÁN III  1. Mide con la probeta 50 ml de alcohol etílico de 70º y pásalo al vaso de precipitado  pequeño. 2. Con la balanza pesa 0,5 g de Sudán III y añádelo al vaso con el alcohol. al cohol. 3. Caliéntalo al baño María a 50º, sin dejar de agitar, hasta que se disuelva. Para el baño María, pon un poco de agua en el vaso grande, mete dentro el vaso pequeño y un termómetro, colócalo sobre la rejilla y calienta suavemente con el mechero sin dejar de agitar con una varilla de vidrio. ¡Cuidado con las quemaduras! 4. enfriar solución. 5. Deja Recorta un la círculo de papel de filtro, dóblalo en cuatro partes y colócalo sobre el embudo. 6. Pon el embudo en un recipiente y ve añadiendo la solución poco a poco para filtrar las impurezas no disueltas. Cierra herméticamente para evitar que se evapore. 7. Anota en el frasco con un rotulador permanente el nombre del producto y la fecha de  preparación.

2.  SAPONIFICACIÓN: FUNDAMENTO Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en dossodio elementos que las ácidos grasos. Éstos se combinan con los los iones o potasio delintegran: hidróxidoglicerina para dary jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.

 

 

TÉCNICA   Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.   Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.   Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior  clara  clara que

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contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior lipídica de aceite inalterado.

3.  TINCIÓN: FUNDAMENTO Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III. TÉCNICA          

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Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta ti nta roja. Agitar ambos tubos y dejar reposar. Observar los resultados: en el tubo con Sudán III todo el aceite tiene que aparecer teñido, mientras que en el tubo con tinta, ésta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.

4.  SOLUBILIDAD

 

FUNDAMENTO Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en  pequeñísimas gotas gotas formando una una emulsión de aspecto aspecto lechoso, lechoso, que es transitoria, pues pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc.

TÉCNICA        

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Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo. Añadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de éter u otro disolvente orgánico, Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar. Observar los resultados: Se verá cómo el aceite se ha disuelto en el éter y, en cambio no lo hace en el agua y el aceite subirá debido a su menor densidad.

CUESTIONARIO:   ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?

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  Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y

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explica a qué se debe la diferencia entre ambos resultados.   ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de

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reposo? ¿Y con la de benceno y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?

 

 

BIBLIOGRAFÍA Bedolla, P., Puig, N., Torres, M., Mingo, B., Fernández, M., & Boixaderas, N. (2002). Biología 2.  Barcelona: Vicens Vives. Herrera, C., Bolaños, N., & Lutz, G. (2003). ( 2003). Química de alimentos. San José: Universidad de Costa Rica. Voet, D. (2006). Bioquímica (Tercera ed.). Buenos Aires: Médica Panamericana.