CUESTIONARIOS 10, 11 Y 12

CUESTIONARIO No. 10 MULTIPLICACIÓN BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICOQUÍMICOS) 1. ¿Cuáles son los requerimientos físicos para el crecimiento microbiano? Temperatura, pH, dióxido de carbono, tensión de oxígeno, presión osmótica y humedad 2. ¿Cuáles son los requerimientos químicos para el crecimiento microbiano? Nutrimentos: Carbono, Nitrógeno, Oxígeno, Fósforo, Azufre y Elementos traza Factores de crecimiento orgánico: Aminoácidos, Purinas, Pirimidinas, Ácidos grasos y Vitaminas 3. Describa las fases de la curva de crecimiento bacteriano e indique la velocidad de crecimiento en cada una de las etapas

1) Fase de latencia o de adaptación al medio: también se le conoce como fase logarítmica. Puede durar de minutos a varias horas, periodo en el cual aumenta la actividad metabólica de la síntesis de proteínas (RNA). Velocidad de crecimiento: cero 2) Fase de crecimiento exponencial: el crecimiento o proliferación bacteriana se lleva a cabo en esta fase, aumenta el metabolismo, el requerimiento de nutrientes, la presencia de oxígeno o dióxido de carbono, se incrementa la sensibilidad bacteriana a los antibióticos y a otros antisépticos. Velocidad de crecimiento: constante 3) Fase estacionaria: o estacionamiento equilibrado bacteriano, se inicia en forma gradual al disminuir el crecimiento, multiplicación y tamaño bacteriano, esta fase se puede prolongar tanto como los nutrientes estén presentes en el medio de cultivo e iniciarse el uso de los uso de los sustratos por la lisis bacteriana. Velocidad de crecimiento: Cero 4) Fase de muerte o lisis bacteriana. La falta de nutrientes y la presencia de productos tóxicos del metabolismo bacteriano, ocasionan que estas mueran

con rapidez; pudiendo llevar horas o días la desintegración total de las bacterias. 4. Indique como podría modificar cada una de las fases de la curva de crecimiento bacteriano 5. Mencione que sustancias son usadas como buffer en los medios de cultivo Carbonatos a base de fosfato unibásicos y bibásicos, carbonatos insolubles, citratos y aminoácidos como la glicicina. 6. Mencione que microorganismos pueden desarrollarse mejor en condiciones de acidez Las bacterias acidófilas (amantes del ácido) que viven en un ambiente extremadamente ácido, algunas crecen en valores de pH = 1,0. Un ejemplo de bacterias acidófilas son las del genero Thinbacillus sp, las cuales se pueden encontrar en el estómago. 7. ¿Qué características tiene el agar bacteriológico que permite que sea usado para el crecimiento de bacterias termofilicas? 8. ¿Qué es la plasmolisis y que utilidad tiene? 9. Indique el rango en que un microorganismo se considera un halofilo extremo o halofilo facultativo Halofilo extremo: los que sólo crecen cuando la concentración de NaCl se acerca a la saturación (15-30% NaCl) Halofilo facultativo: crecen en una solución de NaCl pero no la necesitan (1-6% NaCl) Halofilo obligado: necesita NaCl para su crecimiento (7.5% NaCl) 10. ¿Qué sustancias son consideradas elementos traza en los medios de cultivo y que utilidad tienen? Determinados elementos inorgánicos que son esenciales para la vida, pero que se requieren en pequeñas cantidades, algunos actúan como cofactores. Potasio (K+) mantienen la presión de turgencia; cofactor de ciertas enzimas Calcio (Ca+2) cofactor de ciertas enzimas Hierro (Fe+2/Fe+3) cofactor en citocromos y ciertas enzimas Magnesio (Mn+2) cofactor de algunas enzimas Molibdeno (Mo+2) presente en la coenzima de varias enzimas Cobalto (Co+2) presente en la vitamina B12 y coenzimas relacionadas Cobre (Cu+2) presente en varias enzimas Zinc (Zn+2) presente en varias enzimas

CUESTIONARIO No. 11 CONTROL MICROBIOLÓGICO I (EFECTO DE LOS FACTORES FÍSICOS) 1. ¿Qué factores influyen en la determinación del periodo térmico mortal y del punto térmico mortal? Periodo térmico mortal: es el mínimo tiempo requerido para destruir una suspensión de bacterias con una temperatura predeterminada en un medio especifico y esta relacionada con el número de microorganismos en suspensión. Punto térmico mortal: es aquella temperatura a un tiempo variable en la cual una suspensión de bacterias es destruida en un medio especifico. 2. ¿Cuál es la importancia de determinar el periodo térmico mortal y el punto térmico mortal en las bacterias? 3. ¿Por qué las esporas bacterianas son resistentes a las temperaturas y que relevancia tiene esto? Las esporas son altamente resistentes a condiciones físicas extremas y permiten que incremente su valor de supervivencia. Las esporas son resistentes por las múltiples capas que protegen el genoma son permeables semejantes a una esponja y lo que le confiere esta resistencia es la formación de un gel insoluble. 4. Completar el siguiente cuadro, respecto al uso de diversos factores físicos como control microbiológico 5. ¿Cómo se clasifican las bacterias de acuerdo a su temperatura óptima de crecimiento y cuales son sus rangos de temperatura? Psicrófilos o criófilos: Crecen mejor en temperaturas bajas. Temperatura: 0° a 15°C; la óptima es de 10°C Mesófilos: Crecen a temperaturas medias. Temperatura: 15° a 40°C, la óptima 37°C Termófilas: Crecen a temperaturas relativamente altas. Temperatura: 40° a 70°C; la óptima es de 60°C Hipertermófilas: Crecen en temperaturas altas. Temperatura: 70° a 120°C; la óptima es de 110° 6. Esquematice el proceso de exploración bacteriana -

Es necesario conocer su forma (observarla al microscopio con diferentes métodos) Realizar tinciones, así conoceremos si es Gram (± ), BAAR positivo, si se tiñen con plata o con algún otro método especial. Para conocer sus características metabólicas se hacen cultivos en diferentes condiciones. Se realizan estudios de serotipificación y fagotipícación

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Se clasifica a la bacteria de acuerdo a sus características

7. Mencione el mecanismo de acción del congelamiento, como control microbiano En el congelamiento de las bacterias, la formación de cristales de hielo fuera de la célula causan la salida del agua desde el interior dando como resultado un aumento de la concentración intercelular de electrolitos y una desnaturalización de proteínas, se lesiona la membrana celular y se produce una filtración de compuestos orgánicos intercelulares. 8. ¿Cuáles son los valores del periodo térmico mortal y punto térmico mortal reportados en la literatura de las bacterias usadas en la práctica? Punto térmico mortal Escherichia coli 5´ 70°C Bacillus subtilis 15´ 120°C

Punto térmico mortal E. coli 60°C B. subtilis 120°C

9. Mencione brevemente el control de calidad para la realización del periodo térmico y el punto térmico mortal 10. Explique el mecanismo de acción de las radiaciones UV como control microbiológico y que factores le afectan Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies. Llevan cargas de energía de entre 3 y 100 e V, suficiente para arrancar electrones de las orbitas de los átomos de las moléculas, causando que estas se inocen positivamente, desarticulando las moléculas, principalmente los ácidos nucleares; causando mutaciones a veces letales dependiendo de la magnitud del daño.

CUESTIONARIO No. 12 CONTROL MICROBIOLÓGICO II (EFECTO DE LOS FACTORES QUÍMICOS) 1. Defina el coeficiente fenólico, su utilidad y como se determina Utilidad: Es un parámetro para medir si un producto es más o menos eficiente para destruir microorganismos (fenol al 5%) Determinación: consiste en poner dos series de tubos de ensaye diluciones del desinfectante, del que va a probarse su capacidad antimicrobiana. Se ponen cantidades medidas de un cultivo bacteriano de Staphylococcus aureus (u otra bacteria de importancia medica) en las dos series de tubos. Se obtienen muestras de cada tubu a los 2, 10 y 15 segundos. Se determina entre la más alta dilución que inhibe el crecimiento bacteriano. Si al final inhibe a la bacteria a una dilución de 1:100 y el producto a probar lo inhibe a 1:200 quiere decir que es doble de fuerte que el fenol: mayor a uno son más activos, menor a uno son más débiles que el fenol. Un buen desinfectante debe tener índice fenólico superior a uno. 2. ¿Qué diferencias existen entre los jabones y detergentes, y cuál es el más efectivo como desinfectante? Detergente: son humectantes y emulsivos, disminuyendo la tensión de dos líquidos no miscibles para formar una emulsión. Los detergentes aniónicos son bactericidas, pero los catiónicos son excelentes bactericidas (entre los cuales están los cuaternarios de amonio). Los jabones son poco germicidas, disueltos en agua reducen la tensión superficial, emulsionan y dispersan la grasa, su poder más importante es la limpieza por frote. Por lo tanto los detergentes son mejores desinfectantes. 3. Mencione dos formas farmacéuticas cuyo principio activo sea un ion metálico 4. ¿De qué factores físicos y químicos depende la acción desinfectante de las diversas sustancias químicas? Concentración, pH, tiempo de exposición, temperatura. 5. Explique porqué es más efectivo como desinfectante una solución de etanol al 75% que el etanol absoluto? 6. Mencione las diferencias entre antiséptico y desinfectante Antiséptico: sustancias químicas que pueden ser aplicadas para que su acción ejerza sobre los microorganismos sin dañar los tejidos. Es una sustancia que puede matar la vida de una bacteria o virus puede aplicar en superficies vivas.

Desinfectante: es la destrucción o eliminación de microorganismos peligrosos mediante agentes químicos. Es un agente que destruye o elimina microorganismos en superficies inanimadas. 7. Explique en que consiste el efecto ya se bactericida o bacteriostático de un agente químico Bactericida: agentes químicos que al actuar sobre las bacterias las destruyen, sus acciones son irreversibles. Ejemplos. Óxido de etileno y β -propiolactona agente químico para esporas. Bacteriostático: no matan a las bacterias pero inhiben impidiendo su multiplicación, su acciones son reversibles. 8. ¿Qué factores condicionan el fenómeno de desinfección? 9. ¿Por qué las esporas bacterianas son difíciles de eliminar con agentes químicos? 10. Describa el mecanismo de acción de cada uno de los principales grupos de agentes químicos mencionados en la introducción de la práctica