Cuestionario microbiologia

Cuestionario 1. ¿Para qué pueden ser usados los gallos en inmunología?

Pueden ser utilizados para el desarrollo se vacunas. El desarrollo de la vacuna de fiebre amarilla (17D), fue posible gracias al aislamiento de las cepas Aisibi y Francesa de la fiebre amarilla en 1927, obtenida mediante repetidos pases en ratones y embriones de pollos. Luego de esto siguió la obtención, mediante métodos parecidos, de cepas atenuadas de los virus de la polio, el sarampión, la rubeola y la parotiditis. La disminución de la incidencia de la polio, la rubeola, la parotiditis y el sarampión en el período de tiempo comprendido entre 1950 y 1980 pone de manifiesto el éxito de la vacunas para estas 4 enfermedades.

2. ¿En que vaso se realiza la sangría en las aves?

Se puede efectuar la sangría en cara interna de las alas, cerca de la articulación del carpo con el metacarpo. Se sujeta al animal por el dorso, se extiende el ala que se va a sangrar, se arrancan las plumas que cubren la vena; se hace una ligadura en la parte superior del carpo, se deja el ala por un rato para que llegue la sangre al vaso; se vuelve a coger el ala y se abre el vaso con la lanceta. Cuando ha salido bastante sangre e quita la ligadura y se coge la sangría con uno o dos puntos de sutura.

3. ¿Qué es un esquema de inmunización?

Un esquema de inmunización es un sistema usado universalmente por todos los países en común acuerdo, para la aplicación de las vacunas a los niños, con el fin de evitar diversas enfermedades. El esquema de vacunación usado es:

-La vacuna BCG contra la tuberculosis, se aplica al nacer por medio de una inyección

en

el

brazo

derecho.

- La de Poliomielitis o parálisis infantil, se aplica al nacer y con refuerzos a los 2-4 y 6 meses de edad. Se toman dos gotas de la vacuna en cada aplicación. - La vacuna Triple o DPT contra Difteria, Tos ferina y Tétanos se aplica a los 2, 4 y 6 meses con refuerzos a los 2 y 4 años por medio de una inyección en el glúteo

o

nalga.

- La vacuna Triple Viral, contra Sarampión, Rubeola y Parotiditis o paperas se aplica al año de vida y con un refuerzo a los 6 años por medio de una inyección en

el

brazo

izquierdo.

- La vacuna Td, contra tétanos y difteria, se aplica a los 12 años o al ingresar a 6° de primaria.

4. ¿Cuál

es

el

mecanismo

por

la

cual

una

inyección

subcutánea

o

intraperitoneal desensibiliza un animal que se encuentra en estado de anafilaxia? En el caso de un shock anafiláctico se debe inyectar adrenalina o hidrocortisona por vía subcutánea o intraperitoneal: esto siguiendo los lineamiento globales de ACLS (Advanced Cardiac Life Suport) y ATLS (Advanced Trauma Life Suport): Es decir, buscar en primera intención preservar y reanimar las funciones orgánicas indispensables para la vida siguiendo la metodología A (airway-vías aéreas)B (breathing-respiración) C (circulation).

Cuestionario 1. Defina: a) Inmunidad Celular, b) Opsonización

a) Inmunidad celular: es una forma de respuesta inmunológica adaptativa mediada por células de linfocitos T. Actúa como mecanismo de defensa en contra de los microorganismos intracelulares, tales como virus y algunas bacterias, capaces de sobrevivir y proliferar en el interior de los fagocitos y otras células del huésped, lugar al que no tienen acceso los anticuerpos circulantes. La defensa frente a este tipo de infecciones depende de la inmunidad celular, que induce la destrucción del microorganismo residentes en los fagocitos o de las células infectadas. b) Opsonización: Es el proceso por el que se marca a un patógeno para su ingestión y destrucción por un fagocito. La opsonización implica la unión de una opsonina, en especial, un anticuerpo a un receptor en la membrana celular del patógeno. Tras la unión de la opsonina a la membrana, los fagocitos son atraídos hacia el patógeno.

2. ¿Se realizará fagocitosis si inocula a un ratón con toxina tetánica?

Emil von Behring (1854-1917) y Shibasaburo Kitasato (1852-1931) demostraron que la inyección de dosis crecientes pero no letales de toxina tetánica en conejos y ratones los hacía resistentes a dosis 300 veces mayores que las letales, y que además, el suero de estos animales, en ausencia de células, era capaz de neutralizar la toxina tetánica en vista de que mezclas de ese suero con toxina se podían inyectar en animales susceptibles sin que sufrieran daño alguno. Behring y Kitasato bautizaron a esta propiedad del suero como

antitóxica.

3. ¿Qué papel cumple el complemento en la fagocitosis?

El sistema del complemento es un conjunto de proteínas plasmáticas y de la superficie celular, permanecen naturalmente inactivas y sólo se activan ante la presencia de un antígeno unido a LT o LB en forma de cascada destruyendo al agente invasor. El complemento cumple las funciones de opsonización, citolisis e interviene en la inflamación.

Cuestionario

1. Defina: a) Título, b) Hemólisis

a) Título: es el proceso por el cual se va agregando gota a gota un ácido a una base, o viceversa, para averiguar cual es la cantidad de ácido o base que contiene dicha sustancia de acuerdo a una cantidad de ácis o base conocida. b) Hemólisis: es el fenómeno de la desintegración de los eritrocitos (glóbulos rojos o hematíes). El eritrocito carece de núcleo y orgánulos, por lo que no puede repararse y muere cuando se «desgasta». Este proceso está muy influido por la tonicidad del medio en el que se encuentran los eritrocitos.

2. ¿Qué colorante vital puede ser empleado para tener antígenos para aglutinación y cuales son sus ventajas frente a los colorantes comunes?

La ventaja de los colorantes vitales es que mata a las células lentamente, ya que estas absorben al colorante y continúan con sus funciones vitales por algún tiempo, lo que permite la observación de las partes de cilios, flagelos o estructuras intracelulares.

3. ¿Puede una reacción de aglutinación dar resultados positivos cuando no hay infección aparente?

Sí, debido a que este resultado positivo en algunos casos no confirma la infección y requiere repetir la prueba

a fin de realizar una prueba

comprobatoria.

4. ¿Dónde están localizados los isoantígenos hemáticos?

Loa eritrocitos poseen antígenos (sustancia que provoca la formación de anticuerpos)

determinados

genéticamente

llamados

aglutinógenos

o

isoantígenos (que al entrar en contacto con otros tipos sanguíneos no causan aglutinación), esto hace posible la clasificación de los grupos sanguíneos y el factor Rh, que son independientes uno del otro .

5. ¿Puede cambiar durante su vida el grupo sanguíneo de una persona?

El grupo sanguíneo de una persona no puede cambiar. Sin embargo unos

investigadores de la Universidad de Copenhague (Dinamarca) aseguran haber desarrollado un sistema que convierte los grupos A, B y AB en el tipo O, en el cual convierten la sangre utilizando enzimas recién descubiertas. Así también han ocurrido casos inéditos como el de una chica australiana cambió de grupo sanguíneo después de un trasplante de hígado. Demi-Lee Brennan, actualmente de 15 años, hizo historia en la medicina al pasar espontáneamente al sistema inmunológico de su donante. Se trata de un hecho que nunca antes había sido descripto en el mundo.

6. ¿Qué factores pueden explicar las reacciones falsas positivas o negativas en la clasificación de los grupos sanguíneos?

Estos pueden ocasionarse debido a errores técnicos como: 

Identificación incorrecta de la muestra, registro incorrecto.



Presencia de polvo o particulas en la vidrieria a utilizar



Caducidad de los antigenos puede generar resultados negativos.



Resultados

positivos

inesperados

a

causa

de:

pseudoaglutinación,

autoaglutinacion 

Actividad reducida del reactivo puede ocasionar resultados negativos.

Cuestionario

1. ¿Cuál es la composición química de la cardiolipina?

La cardiolipina es un fosfolípido muy ácido (carga -2), está compuesto por dos moléculas de ácido fosfatídico unidas covalentemente a través de una molécula de glicerol. Dichas moléculas son los componentes estructurales fundamentales de las membranas biológicas, donde se distribuyen en una doble capa con actividad anfipática (o sea, la propiedad física de estas moléculas de poseer un extremo hidrofílico y otro hidrofóbico), lo que permite a la célula mantenerse aislada del medio externo, pero tener movimiento a través de su membrana de distintas

sustancias

como

agua,

iones,

proteínas,

etc.

Se

encuentra

fundamentalmente en la membrana interna de la mitocondria y en las membranas bacterianas.

2. ¿A qué cree Ud. que se debe el que la emulsión final del antígeno sea turbio, mientras que la solución madre es totalmente transparente?

La emulsión final de un antígeno es turbio debido a las partículas coloidales cubiertos con anticuerpos macizos que junto con la presencia del antígeno ocasionan esta turbidez, que tienen gran eficiencia en la exactitud de la medición. La solución madre es totalmente transparente por a solución de fragmentos de la membrana eritrocitaria útil para el antígeno insolubilizado.

3. ¿Puede presentarse en el V.D.R.L. una reacción de zona y como podría ser evitada?

Si puede presentarse ya que es un requisito para poder descartar enfermedades de transmisión sexual, los resultados de VDRL en lámina son comunicados como no reactivos (no hay floculación, débilmente reactivos (ligera floculación, y reactivos floculación definitiva. Todos los sueros reactivos se diluyen seriadamente, a cada dilución se le realiza la prueba de VDRL y se registra el titulo máximo obtenido. Rara vez se tiene un paciente con título elevado en las diluciones y con VDRL no reactivo en la muestra sin diluir (fenómeno de prozona), si ocurriera es más frecuente en la sífilis secundaria1,10.

4. ¿Por qué razón cuando un suero precipitante se diluye pierde rápidamente su título? Pierde rápidamente su titulo porque inhibe la hemoaglutinación.

Cuestionario 1. ¿Qué es la properdina y el complemento?

Properdina: La properdina es una de las proteínas reguladoras de la vía alternativa del sistema del complemento liberada por los monocitos.

Complemento: Globulina presente en el suero sanguíneo reciente; se destruye con una temperatura de 55-56º centígrados mantenida durante una media hora. El complemento está compuesto de 11 fracciones (que constituyen el sistema complementario) numeradas de C'1 a C'9 - estando el C'1 dividido en 3 subfracciones C'lq, C´1r y C'1. La fracción C'3 es la más importante. El complemento es un factor no específico que interviene en las reacciones inmunológicas por las propiedades neutralizadoras o destructoras, solamente cuando un anticuerpo específico, el sensibilizante, se fija sobre el antígeno.

2. ¿Qué factores intervienen en la lisis de un microorganismo por fenómenos inmunológicos?

 Lisis.- Uno de los productos mas importantes de la cascada del complemento es el complejo lítico, que es una combinación de múltiples factores del complemento y se llama C5b6789. tiene un efecto directo de la rotura de las membranas celulares de las bacterias y otros microorganismos invasores.

 La presencia de macrófagos.- Los macrófagos poseen capacidad de lisis de microorganismos produciendo citocinas esenciales para el inicio de la respuesta inmune. Entre ellos destacan ciertas metaloproteínas, lisozima, lactoferritina y otras. Tanto los macrófagos como los neutrófilos, pueden producir y secretar también TNF-alfa de gran capacidad lítica.

3. ¿Puede usarse la sangre nitratada u oxalatada para observar fenómenos de lisis?

No puede utilizarse la sangre oxalatada u nitrada para observar los fenómenos de lisis celular, debido a que a la sangre completa se le ha agregado un éster soluble del ácido oxálico, lo que impide la coagulación de la misma y por tanto no hay lisis.

Cuestionario

1. ¿Qué microorganismos se pueden aislar de una herida supurante? Se pueden aislar los siguientes microorganismos:

Corynebacterium, Staphylococcus aureus, Streptococcus, Pseudomonas aeruginosa, proteus

2. ¿Qué microorganismos se pueden aislar de una quemadura?

Staphylococcus epidermidis, Klebsiella spp., Serratia marcescens, Escherichia coli, Enterobacter spp., Enterococo, Pseudomona aeruginosa, Staphylococcus aureus

3. ¿Qué microorganismos se pueden aislar de un tejido en putrefacción?

La mas importante es Clostridium prefringens, pero también se pueden

presentar

otros

Staphylococcus

microorganismos

aureus,

Proteus

en

la

vulgaris,

putrefacción

Bacillus

como

son:

mesentericus

y

Micrococcus albus

4. ¿Cómo se realiza la Prueba de Catalasa, Coagulasa y de Pigmento? CATALASA: Se utiliza para comprobar la presencia del enzima catalasa que se encuentra el la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo. La principal excepción es Streptococcus. Originariamente, esta prueba era utilizada para diferenciar entre los siguientes géneros: 

Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y/o Staphylococcus (+).



Bacillus (+) de Clostridium (-).



Lysteria monocytogenes (+) y/o Corynebacterium (+, con las excepciones de

C.pyogenes y C.haemolyticum, ambos -) de Erysipelothrix (-)

Una prueba de rutina de la catalasa a temperatura ambiente puede hacerse siguiendo dos técnicas: 1. Método del portaobjetos (recomendado): 

Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia pura de 18-24 horas

y colocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio. 

Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H 2O2 al 30% sobre el

microorganismo sin mezclarlo con el cultivo. 

Observar la formación inmediata de burbujas (resultado positivo).



Desechar el portaobjetos en un recipiente con desinfectante.



Si se invierte el orden del método (extender la colonia sobre el agua

oxigenada) pueden producirse falsos positivos. 1. Método del tubo de ensayo: 

Agregar 1ml de H2O2 al 3% directamente a un cultivo puro de agar en slant

densamente inoculado. 

Observar la formación inmediata de burbujas (resultado positivo).

Precauciones: Si se utilizan para esta prueba cultivos procedentes de agar sangre, se debe tener la precaución de no retirar algo de agar con el asa al retirar la colonia ya que los eritrocitos del medio contienen catalasa y su presencia dará un falso resultado positivo. COAGULASA: La prueba de la coagulasa es usada específicamente para diferenciar las especies del género staphylococccus:

S. aureus

Positiva

S. epidermidis

Negativa

Técnica en portaobjetos

Prepare una suspensión gruesa y bien homogénea de cada microorganismo en una solución salina estéril. Ponga una gota de la suspensión y una gota de plasma humano o de conejo sobre un portaobjetos, mezclar suavemente con el asa y después por rotación. Observe si hay aglutinación microscópica lo que indica una prueba positiva Observe si hay aglutinación microscópica lo que indica una prueba positiva

Interpretacion: Una prueba positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos. La prueba negativa si la aglutinación no ocurre dentro de 3-4 minutos.

Técnica en tubo: En un tubo de 13 x 100 esteril mezclar 0.5 ml de plasma humano o de conejo y una asada grande de la bacteria aprobar. Rotar suavemente el tubo sin sacudir. Incubar a 35 grados C de 4-6 horas, observe cada 30 minutos.

Precaución: cuando este checando no sacude el tubo, inclínelo suavemente para ver el coagulo, si este no es visible al final de las 6 horas, déjelo en la incubadora

por

24

hrs.

Interpretación: Prueba positiva: 

Coagulo completo



Coagulo parcial, el coagulo no abarca completamente la columna del fluido.

Prueba negativa: 

No hay formación de coagulo, la suspensión permanece homogénea

PRUEBA DE PIGMENTO Esta se utiliza mayormente para la identificación de especies de Pseudomonas, su capacidad para producir pigmentos como pioverdina (fluoresceína) y piocianina es

una característica importante Algunas de ellas elaboran sólo fluoresceína (ej. Ps. fluorescens) y otras ambos pigmentos (ej. Ps. aeruginosa). La piocianina solamente es producida por Ps. aeruginosa aunque no todas las cepas de esta especie la producen. Se han diseñado medios de cultivo que potencian la elaboración de uno de los pigmentos e inhiben la formación del otro. PRINCIPIO El medio King A (o Pseudomonas Agar P) potencia la elaboración de piocianina mientras que el King B (o Pseudomonas Agar F) potencia la elaboración de fluoresceína e inhibe parcialmente la de piocianina. Estos pigmentos son solubles en agua y difunden al medio. La piocianina es un pigmento azul-verde mientras que la fluoresceína es amarillo-verdoso y fluoresce cuando es expuesto a la luz UV (l=254 nm). Existen pigmentos amarillo-verdosos producidos por algunas especies de Pseudomonas que no fluorescen. MEDIOS Y REACTIVOS 

King A

King B



Peptona 20 g Proteosa Peptona 20 g



Glicerol 10 g Glicerol 10 g



K2SO4 10 g K2HPO4 1,5 g



MgCl2 1,4 g MgSO4.7H2O 1,5 g



Agar 15 g Agar 15 g



Agua 1 L Agua 1 L

Los medios se reparten en tubos, se esterilizan a 121ºC durante 15 minutos y se dejan solidificar inclinados. PROCEDIMIENTO Inocular los tubos por estrías. Incubar a 35ºC durante 24 hs.

INTERPRETACIÓN Observar al UV, la producción de pigmento azul-verdoso en el medio King A y la de pigmento

amarillo-verdoso,

en

Cuestionario

el

King

B

1. Describa como se realiza una prueba de producción de coagulasa para estafilococos

Permite diferenciar Staphylococcus aureus (coagulasa positivo) del resto de especies de Staphylococcus (coagulasas negativos). La técnica en tubo detecta coagulasa

libre

y

ligada.

Mecanismo de acción de la coagulasa libre: procoagulasa (enzima extracelular bacteriana) reacciona con un factor activador presente en el plasma sanguíneo similar a la protrombina, dando lugar a un complejo análogo a la trombina (coagulasa propiamente dicha) que reacciona con fibrinógeno formando un coágulo

de

fibrina

en

ausencia

de

Ca2+.

La coagulasa ligada o factor de agregación actúa directamente sobre el fibrinógeno y lo convierte en fibrina. No requiere la presencia de activadores plasmáticos.

2. ¿Qué otros microorganismos aparte de los estafilococos pueden desarrollar en el agar manitol hipertónico?

El agar manitol hipertónico sirve además para aislar el cultivo de especies halófilas de Vibrio.

3. ¿En el agar ADN puede desarrollar Staphylococcus epidermidis?

Staphylococcus epidermidis si puede crecer en el agar ADN, y en este se realiza la prueba de la ADNasa, que resulta positiva en el caso de esta bacteria.

4. ¿Cuáles son los pasos para las pruebas de producción de hemolisinas y fibrinolisinas?

Prueba de hemolisinas: esta prueba se realiza en agar sangre y detecta la presencia de hemolisina, enzima que permite la clasificación de los

Streptococcus en alfa (hemólisis parcial, incompleta que torna color verdoso), beta (hemólisis total) y gamma hemolíticos (no existe hemólisis) . Muchas otras bacterias, aparte de los Streptococcus, pueden tener esta enzima como B. megaterium; se usa el cultivo para demostrar el grado de hemólisis (hemólisis beta) en la cual se puede observar claramente por detrás de la siembra.

Cuestionario

1. ¿De una muestra de orina se podría aislar gonococos?

Si es posible aislar gonococos de una muestra de orina, una de las principales pruebas para determinar su presencia es el uso de la tinción de Gram.

2. ¿Cómo están localizados los gonococos en los polimorfonucleares en un proceso agudo y crónico?

Los gonococos se encuentran dentro de los polimorfonucleares, la bacteria más frecuentemente aislada en las infecciones urinarias es la Escherichia coli, encontrándose en un porcentaje de 75 al 95% de los casos según el tipo de paciente. Esta proporción se favorece más en las cisitis y pielonefritis de la edad media de la mujer, que consultan en policlínicos generales.

3. ¿Cómo se realiza la Prueba de Oxidasa?

Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo que es reducido por el oxígeno molecular que produce agua o peróxido de hidrógeno según la especie bacteriana. El oxígeno actúa por tanto como aceptor final de electrones en la cadena transportadora de electrones. Por lo general, el sistema citocromooxidasa sólo se encuentra en los organismos aerobios, algunos anaerobios facultativos y, excepcionalmente, en algún microaerófilo ( Vibrio fetus), pero los anaerobios estrictos carecen de actividad oxidasa. Asímismo, la presencia de oxidasa va ligada a la producción de catalasa, ya que ésta degrada el peróxido de que se produce como consecuencia de la reducción del oxígeno y cuya acumulación es tóxica. La prueba de la oxidasa se usa sobre todo para 

Identificar todas las especies de Neisseria (+)



Diferenciar Pseudomonas de los miembros oxidasa negativos de las

enterobacterias. El reactivo de la oxidasa más recomendado es la solución acuosa al 1% de diclorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina (reactivo de Kovacs). Es menos tóxico y mucho más sensible que el correspondiente compuesto dimetilo (reactivo de Gordon y McLeod), pero es más caro. Este reactivo tiñe las colonias oxidasa positivas de color lavanda que vira gradualmente a púrpuranegruzco intenso. Realización de la prueba: 1. Método en placa directa 

Agregar directamente 2-3 gotas de reactivo a algunas colonias. No inundar

toda la placa y no invertirla. 

Observar los cambios de color. Con el reactivo de Kovacs la reacción se

produce en unos 10-15 segundos, mientras que con el de Gordon y McLeod es dentro de los 10-30 minutos. 1. Método indirecto sobre papel 

Colocar un trozo de papel de filtro de 3x3cm aproximadamente en una placa

de Petri. 

Agregar 2-3 gotas del reactivo de Kovacs en el centro del papel.



Extender con el asa de siembra una colonia sobre el papel impregnado.



La reacción de color positiva se produce a los 5-10 segundos.

Cuestionario

1. ¿En que porcentaje aproximado las enterobacterias producen infecciones urinarias?

Del 90 al 95% de las infecciones urinarias son producidas por las enterobacterias

(Klebsiella,

Proteus,

E.

coli,

aerobacter,

Pseudomona

aeuroginosa y Acitenobacter). El porcentaje aumenta sensiblemente en hombre debido a la uretritis y prostatitis en que también hay este tipo de bacterias. La bacteria más frecuentemente aislada en las infecciones urinarias es la

Escherichia coli, encontrándose en un porcentaje de 75 al 95% de los casos según el tipo de paciente. Esta proporción se favorece más en las cisitis y pielonefritis de la edad media de la mujer, que consultan en policlínicos generales.

2. ¿Hay hongos y virus que causan infecciones en el sistema genitourinario?. Si es así mencione algunos de ellos.

Si pueden causar infecciones genitourinarias, entre los hongos se encuentra

Candida albicans; entre los virus se encuentra el virus herpes simple tipo 2 (VHS-2), citomegalovirus humano (CMVH).