Cucumis dipsaceus

Extracción de saponina saponina en Cucumis dipsaceus Ehrenberg ex Spach y evaluación evaluación de su actividad cicatrizante

RESUMEN O

Se ha realizado el estudio del Cucumis dipsaceus, planta originario de la región del Merriteraneo y Oceanía; debido al uso común que brinda a los pobladores de la Costa, Sierra y Selva, quienes usan el fruto como detergente para el lavado de cabello, ropa; como también actividad farmacologica. Esta es materia de investigación el estudio farmacológico de la planta, obteniendo las saponinas a las que se debe el efecto cicatrizante y antiinflamatorio.

RESUMEN O

Se ha realizado el estudio del Cucumis dipsaceus, planta originario de la región del Merriteraneo y Oceanía; debido al uso común que brinda a los pobladores de la Costa, Sierra y Selva, quienes usan el fruto como detergente para el lavado de cabello, ropa; como también actividad farmacologica. Esta es materia de investigación el estudio farmacológico de la planta, obteniendo las saponinas a las que se debe el efecto cicatrizante y antiinflamatorio.

O

El uso popular que se le dio al boliche al “Jaboncillo de campo”,  vuelve a tomar relevancia en Cucumis dipsaceus, del que a través de la técnica de extracción etanolica, desengrasado y dispegmentada con éter de petróleo, de la extracción butanolica y de la deshidratación con sulfato de sodio anhidro, se obtuvo un sólido y mediante la técnica de coloración, formación de espuma se demostró la presencia de saponinas, además con el reactivo de salkowski y el reactivo de Lieberman burchard he podido demostrar que tipo de saponinas triterpenicas o de tipo esteroides se encuentra en muestra , luego realice cromatografía de capa fina, capa preparativa columna (CC), lo cual va a purificar la muestra y obtener el principio activo que nos interesa como es la saponina para su posterior lectura por el espectrofotometro Infrarrojo y UV-visible para poder confirmar la presencia de saponina, presente en el fruto de Cucumis dipsaceus .

OBJETIVOS Objetivo general O  Aislar e identificar cualitativamente saponina en la de la especie vegetal Cucumis dipsaceus Ehrenberg ex Spach. Objetivo especifico O Determinar la factibilidad de la actividad cicatrizante del extracto del fruto del Cucumis dipsaceus Ehrenberg ex Spach en la industria farmacéutica. O Evaluar la actividad cicatrizante en el extracto del fruto del Cucumis dipsaceus  Ehrenberg ex Spach.

HIPOTESIS O

Las saponinas presentes en el fruto de Cucumis dipsaceus Ehrenberg ex Spach presentan efectos cicatrizantes.

CLASIFICACION BOTANICA Reino

Plantae

División

Magnoliophyta

Clase

Equisetopsida

Orden

Cucurbitales

Familia

Cucurbitaceae

Género

Cucumis

Especie

dipsaceus

Nombre científico

Cucumis dipsaceus

O

El jaboncillo de campo (C. dipsaceus) es una cucurbitácea que desde hace mucho tiempo se ha venido utilizando como  jabón para lavar cabello y ropa, es un detergente natural y ecológico, en el norte del Perú, aunque su origen es africano. También tiene importancia como frotación muscular,laxante,actividad analgésica y antiinflamatoria.

HABITAT Estas plantas habitan en cumbreras, cunetas y baldíos. Florecen en los meses a partir de abril a octubre, aunque no es extraño encontrarlas en flor fuera de esta época. O Su distribución es muy común en toda la Región Mediterránea y Oceania, aunque en la actualmente es cosmo polita, en el Perú se encuentra en el departamento de  Amazonas, Ancash, Junín y Lima. O

SAPONINAS O

El nombre de saponina deriva del término en latín ¨sapo¨  qué significa jabón. Este se debe a que las saponinas son capaces de formar espuma al ser agitadas en soluciones acuosas.

SAPONINAS O

Las saponinas son una clase de compuestos estructurales diversos, que se encuentran ampliamente distribuidos en el reino vegetal. Se trata de glicosidos formados por una o más residuos oligosacáridos unidos covalente mente a una aglicona. La naturaleza química del aglicona se suele clasificar en dos grupos, como saponina esteroidal o triterpenoide.

SAPONINAS O

Existen dos tipos de saponinas: Esteroides: son neutras. Se encuentran principalmente en las monocotiledóneas. Estas pueden ser utilizadas para la elaboración de hormonas sexuales y corticoides. Las geninas esteroídicas derivan de un esqueleto hexacíclico de 27 átomos de carbono, que es el núcleo “espirostano”.

SAPONINAS

SAPONINAS Triterpénicas son ácidas. Se encuentran

principalmente en las dicotiledóneas. Las saponinas triterpenoides se emplean en la fabricación de ladrillo acústico, placas, películas y papeles fotográficos, cerámica, extinguidores de incendios del tipo de espuma y pastas dentríficas; también sirve para producir espuma en bebidas (refrescos y cervezas), en champúes, jabones líquidos y preparados cosméticos y en emulsificación de aceites para pulverizar en árboles frutales.

SAPONINAS

EXTRACCION O

PREPARACION DE LA MUESTRA   Recolección Para el presente investigación, las nuestras del fruto de Cucumis dipsaceus “Jaboncillo” se recolectaron durante el mes de se Agosto del 2015 en la Provincia de Barranca departamento de Lima. Los frutos (800 gramos), se lavaron manualmente para separar toda partícula de tierra que pudiera estar adherida al fruto ya que se desarrolla al ras del suelo

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Estabilización Se efectuo el secado del fruto al medio ambiente (bajo techo), durante cinco dias sobre papel kraffs, con la final de deshidratarlo,

luego se agrego vapores de etanol al 96° y aire caliente para inactivar posibles enzimas que pudieran descomponer al fruto.

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Luego se prosegio al secado en estufa a una temperatura entre 40°C y 45°C, durante cinco dias.

Molienda

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La molienda se realizo en un molino de cuchillas whiley Mill,luego se prosiguió con el secado por 48 horas, obteniéndose polvo seco de la muestra, guardándose luego en frascos limpios y secos

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EXTRACCIÓN ETANOLICA Teniendo en cuenta que las saponinas agua, solución hidroalcoholicas, entre otros, realizamos la extracción con etanol de 80°C, dejamos en maceración por 72 horas con la finalidad de ablandar los tejidos celulares. Posteriormente se decanta y el residuo se exprime obteniendo una solución de aspecto grasoso.

DESENGRASADO Y DESPIGMENTACION  Al extracto etanolito se le adiciona alcohol al 40° y se transvasa a una pera de decantación, agitándose la muestra obteniéndose dos fases una fase hidro-alcoholica, la parte útil y la fase lipídica, que se desecha. La solución Hidro-alcoholica es sometida a una extracción con benceno con la finalidad de eliminar pigmentos y residuos grasos, obteniéndose fracción etanolica útil.

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DESENGRASADO Y DESPIGMENTACION

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EXTRACCION BUTANOLICA En el extracto etanolica previamente desengrasado se extraen las saponinas con n-Butanol aprovechado que dicho solvente posee mayor capacidad de disolución, esta operación se realizó en un embudo de separación.  Al extracto butanolico se le adiciono SO4Na2 anhidro con la finalidad de secar la fase orgánica, luego se decantó. Este extracto butanolico se concentró por calentamiento hasta obtener un residuo sólido.

ENSAYO DE RECONOCIMIENTO 

Ensayo de la Espuma Las saponinas son solubles en agua y pueden disminuir la tensión superficial del agua, formando abundante espuma. Se agregó en un tubo de ensayo 0.1 gramos de muestra y también se agrega agua destilada a una altura de un dedo, por último se agita por 30 segundos.

ENSAYO DE RECONOCIMIENTO 

Ensayo de Salkowsky Una pequeña muestra se pone en un tubo de ensayo y se agrega un ml de ácido sulfúrico y anhídrido acético. Se va observar una coloración rojo o amarillo.

ENSAYO DE RECONOCIMEINTO

 ANALISIS CROMATOGRAFICO Las técnicas cromatografías utilizadas en esta investigación para la separación y aislamiento son: Cromatografía de capa fina y cromatografía de capa preparativa.

 ANALISIS CROMATOGRAFICO 

Cromatografía de Capa Fina Preparamos una capa sobre una placa de 10cmx5cm, un absorbente de silica gel sobre la placa de vidrio. Luego buscamos un eluyente adecuado por ese motivo requerí probar con varios disolventes de diferente polaridad o con mezclas. En donde el que medio mejor resultado como la fase móvil fue el de Cloroformo : Metanol ( 95 : 5)

Cloroformo : Metanol ( 95 : 5)

Metanol : Agua ( 70 : 30)

Cloroformo: Metanol: Agua (87: 12 : 1)

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Cromatografía de Capa Preparativa La cromatografía preparativa se llevó a cabo en placas de gel de sílice sobre un soporte de vidrio de 15x15cm. Hemos utilizado esta técnica para la separación y aislamiento del componente interesado. Con una pipeta Pasteur trazamos una línea continua con la muestra disuelta y después se introduce la placa en posición vertical en la cubeta y se tapa, para evitar la evaporación del disolvente

 ANALISIS INSTRUMENTAL 

Espectrómetro de ultravioleta visible

La solución enfriada se lleva para su posterior lectura en el espectrofotómetro con solvente etanol destilado. Luego la solución con etanol se coloca en la celda y se lleva al UV-VIS, el espectro aparece en esta imagen.

 ANALISIS INSTRUMENTAL Absorbancia Compuesta a

Longitud de Onda

0.829

270.065

 ANALISIS INSTRUMENTAL Absorbancia Compuesta b

Longitud de Onda

0.729

270.009

DISCUSIONES DE RESULTADOS

CONCLUSIONES