CROMATOGRAFIA

INFORME DE LABORATORIO 3

CROMATOGRAFIA PRESENTADO POR:  JOSE DAVID DAVID SERNA MORALES MORALES  JESUS ALEJANDRO GAMBOA MESA PROFESORA: LUZ AMPARO VÉLEZ UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA ESCUELA DE MICROBIOLOGIA ASIGNATURA: QUIMICA Y LABORATORIO MEDELLIN

2016

Objetivo general: -

Separar una mezcla de compuestos orgánicos en solución, mediante cromatografía de capa fina.

Objetivos espec!icos: -

Identificar cada uno de los compuestos separados comparándolos con muestras patrones

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Calcular el factor de retardo para cada una de las especies separadas incluyendo la muestra desconocida.

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Identificar el compuesto en la muestra problema.

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Separar acetaminofén y cafeína de un fármaco por cromatografía de columna.

MAR"O TE#RI"O

La cromatografía en capa fina es una técnica usada para separar moléculas relativamente peue!as, al igual ue otras cromatografías utiliza una fase móvil y una fase estacionaria y su principio es el mismo" la sustancia de interés se ad#iere a la fase estacionaria o se mueve con la fase móvil, la fase estacionaria puede ser  variada" puede ser de papel, celulosa o de un gel de silicato unido a una superficie sólida, una placa de aluminio, vidrio, plástico o papel, el tipo de fase estacionaria depende del tipo de moléculas ue se uiere separar. La fase estacionaria consiste en agua un solvente orgánico o una mezcla de ambos. La cromatografía en capa fina permite, determinar el grado de pureza de unas sustancias, comparar  muestras y realizar el seguimiento de una reacción. Cromatografía de columna, $n este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al e%terior de la columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase móvil. Seguidamente la mezcla orgánica ue nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y así la fase móvil podrá ir atravesando el sistema.

DATO$   4  .  6  e   s   a   F

g

  2  .  8  e   s   a   F

  o   c  i l  á    G   o   d  i  c    A

  o   c  i l  á    G   o   d  i  c    A

 l  o   n  i  c   r   o   s   e    R

 l  o   t   f  a   n  -  B

 l  o   n  i  c   r   o   s   e    R  l  o   t   f  a   n  -  B

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RE$%LTADOO$ Luego de realizar la prueba se puede observar ue la elución situó a los compuestos de la siguiente manera, ()naftol, *esorcinol y ácido gálico, ordenadas por su polaridad, en ambas placas se puede observar ue aparentemente la muestra carece de resorcinol, teniendo porciones de ácido gálico y ()naftol . + partir de la placa .- por su mayor resolución realizaremos los cálculos del factor de retardo.

5,52 cm

4,67 cm

2,28 cm

La distancia recorrida por de este dato se calculara compuestos.

0.03 cm

el solvente fue de ,/ cm a partir   el factor de retardo para los

En &'estra (esconoci(a )*+: en la muestra aparentemente no se encuentra el resorcinol. B-na!tol: R!,

0.01 cm 2 0 ,/

ci(o g.lico: R!, -,3 cm 2 0,4,/ cm En &'estra patr/n: B-na!tol: R!,

0.01 cm 2 0 ,/ cm

Resorcinol: R!,

/,/4 cm 2 0,-5 ,/ cm

ci(o g.lico: R!, -,3cm 2 0,4,/ cm

"ROMATO0RAFIA DE "OL%MNA

ANALI$I$ DE RE$%LTADO

"ro&atogra!a en capa !ina: $l acetato de etilo es un compuesto ue polariza muy fácil, al encontrarse con el ()naftol, un compuesto no polar, #ace ue este se uede en la fase estacionaria, aunue por la presencia de #e%ano este se mueve un poco. $ntre más polar sea el compuesto su *f es mayor. &or lo cual se sit6a el ácido gálico como el compuesto con mayor *f. La muestra 7-4 contiene ()naftol y ácido gálico.

"ro&atogra!a (e col'&na8 Luego de realizar la observación de este tipo de cromatografía podemos decir ue la velocidad de arrastre de cada componente 9azul de metileno y naran:a de metilo;, depende de su grado de absorción en la fase estacionaria y de su afinidad por la fase móvil. &ara la fase móvil se utilizó silica gel, para llevar acabo la separación de etanol. +l realizar el e%perimento el compuesto ue salió primero de la columna fue el naran:a de metileno por ser la sustancia menos polar, el azul de metileno por ser  más polar se liga con la fase móvil, por esta razón sale de ultimo.

"ON"L%$IONE$ -

Se determinó ue la muestra desconocida 7-4 contiene ()naftol y ácido gálico.

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La cromatografía de columna y la de capa fina son técnicas de separación de método fácil de aplicación.

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Se encontró el factor de retardo para cada una de las especies separadas

1RE0%NTA$ 2 Cromatografía de reparto8 la fase estacionaria suele mantenerse fi:a mediante un soporte poroso, papel o celulosa, esta suele ser una mezcla de disolventes medianamente miscibles en el agua, cuanto más soluble en agua sea la sustancia a cromatografíar mas retenida y retrasada uedara en el desarrollo cromatografico. Cromatografía de adsorción8 la fase estacionaria retiene con más o menos poder a la sustancia a cromatografiar por un fenómeno de adsorción en superficie. &ara ello se utiliza al6mina, gel de sílice, la cromatografía de afinidad es un tipo de cromatografía de desorción, en la ue la fase estacionaria tiene afinidad biológica por la sustancia ue se uiere separar" se utilizan así, pare:as antígeno)anticuerpo, enzima)in#ibidor, en la cromatografía de intercambio iónico, la fase estacionaria retiene a la sustancia por su carga iónica, las sustancias ue tengan carga opuesta a la resina uedara en la fase estacionaria y las cargas iguales a la resina serán arrastradas por la fase móvil, las sustancias ue uedan unidas a la resina pueden eluir si se les cambian las condiciones, variación de p? fuerzas iónicas" este tipo de cromatografía se #ace en columna y los soportes utilizados son polímeros como la celulosa, poliestireno carbo%ilado o poliaminados. @e acuerdo al soporte físico donde se #ará la separación, #abla de dos tipos de cromatografías. Cromatografía en capa fina8 la fase estacionaria se e%tiende sobre una placa. Cromatografía en columna8 la fase estacionaria se empaueta en una columna y se #ace pasar solventes a través de ella para separar o identificar sustancias.

4 $s una técnica de separación de compuestos, se utiliza para la identificación y verificación de rendimiento de reacciones uímicas" y la diferencia entre cromatografía y electroforesis es ue la cromatografía separa sustancias sin ning6n uso de energía como lo #ace la electroforesis, ya ue esta separa moléculas seg6n la movilidad de estas en un campo eléctrico a través de una matriz porosa, la cual los separa por tama!o y por  carga eléctrica.

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