Colorimetria

DGEST

ITM

SEP

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MORELIA “José María Morelos y Pavón”

COLORIMETRÍA Química analítica II Eliel Rafael Romero Gracia INGENIERÍA BIOQUÍMICA 5st SEMESTRE MARÍA CRISTINA VIEYRA BRAVO No control: 09120036 Miércoles 04 de Mayo del 2011

~-1- ~

Contenido INTRODUCCIÓN....................................................................................................................................................... - 3 HISTORIA ................................................................................................................................................................... - 6 COLOR.......................................................................................................................................................................... - 7 ¿Qué es el color? ................................................................................................................................................. - 7 Propiedades del color....................................................................................................................................... - 7 Tonos coloreados y no coloreados.............................................................................................................. - 7 El círculo cromático .......................................................................................................................................... - 8 CIRCULO CROMÁTICO .......................................................................................................................................... - 9 Procedimiento de la medida del color..................................................................................................... - 10 LEY DE LAMBERT-BEER .................................................................................................................................... - 11 Leyes de la absorción de energía radiante ............................................................................................ - 11 Transmitancia.................................................................................................................................................... - 13 Absorción ............................................................................................................................................................ - 13 Cromatografía y la ley de Lambert y Beer ............................................................................................. - 14 Medición de la extinción ............................................................................................................................... - 17 APLICACIÓN DE LA COLORIMETRÍA ............................................................................................................ - 20 Industria de la impresión ............................................................................................................................. - 20 Determinación colorimétrica de fosfato inorgánico.......................................................................... - 21 CONCLUSIÓN .......................................................................................................................................................... - 22 REFERENCIAS ........................................................................................................................................................ - 22 -

~-2- ~

INTRODUCCIÓN La luz es un tipo de radiación electromagnética. Esta radiación puede presentar diferentes longitudes de onda. La luz visible puede ser separada en los colores del arco iris o del espectro con ayuda de un prisma (del violeta al rojo). El ojo humano no puede apreciar los colores ultravioletas ni los infrarrojos.

La colorimetría es una de las técnicas empleadas con mayor asiduidad en los laboratorios de Bioquímica. Esta técnica suministra información cualitativa y cuantitativa sobre sustancias en disolución. El colorímetro es un instrumento diseñado para dirigir un haz de luz paralela monocromática a través de una muestra líquida y medir la intensidad del haz luminoso emergente. Las técnicas colorimétricas se basan en la medida de la absorción de radiación en la zona visible por sustancias coloreadas. En algunas ocasiones, la muestra que deseamos determinar no posee color por sí misma; en tal caso, es preciso llevar a cabo un desarrollo de color empleando reactivos que den lugar a sustancias coloreadas con la muestra que interesa estudiar. La colorimetría es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla métodos para la cuantificación del color, es decir la obtención de valores numéricos del color. Se denomina equipos de colorímetro a aquellos aparatos en los que la longitud de onda con la que vamos a trabajar se selecciona por medio de filtros ópticos. En principio, todos los sistemas que cuantifican el color a partir de tres variables poseen aspectos colorimétricos.

~-3- ~

Un color queda definido por 3 parámetros: 

Luminancia: medición luminosa de la intensidad de la radiación. Subjetivamente se habla de luminosidad, y se dice que un color tiene mucho brillo (claro) o poco brillo (oscuro). Se le puede simbolizar con L y su unidad de medida es [Cd/m2].



Longitud de onda predominante: es la longitud de la radiación monocromática correspondiente. Subjetivamente se habla de matiz o tono y se dice que un color es amarillo, verde, azul, etc. Se le puede simbolizar con λd y su unidad es [nm] o [mm] o también el Angstrom (un Angstrom ≈10-10m).



Pureza: magnitud de la dilución de un color en blanco. Se representa por un índice variable entre 0 y 1. Subjetivamente se habla de saturación. Y se dice por ejemplo que un color rosa (mezcla de rojo con blanco) está poco saturado en contraposición de un rojo que sí lo está. Se lo puede simbolizar con ρ.

La fracción de luz incidente absorbida por una solución a una longitud de onda está relacionada con el paso óptico y con la concentración de la especie absorbente. Estas dos relaciones están combinadas en la ley de Lambert-Beer: En óptica, la ley de Beer-Lambert, también conocida como ley de Beer o ley de Beer-LambertBouguer es una relación empírica que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material atravesado. La ley de Beer-Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la intensidad saliente después de que en dicho medio se produzca absorción. La relación entre ambas intensidades puede expresarse a través de la siguiente relación:

y

Son las intensidades saliente y entrante respectivamente. Es la absorbancia, que puede calcularse también como: Es la longitud atravesada por la luz en el medio, Es la concentración del absorbente en el medio. Es el coeficiente de absorción: Es la longitud de onda de la luz absorbida. Es el coeficiente de extinción.

~-4- ~

La aplicación obvia de la ley de Lambert-Beer es el uso del colorímetro para determinar la concentración de una gran variedad de moléculas que absorben luz (p. ej. Carotenos, clorofila, hemoglobina, etc.). La técnica se extiende a sustancias no coloreadas como azúcares o aminoácidos después de alguna reacción capaz de convertir sustancias incoloras en derivados coloreados

Justamente mediante el empleo de las técnicas para la realización de un análisis colorimétrico se pondrá arriba a un método químico de los materiales superficiales que son el objeto de los distintos análisis y cuyo ejemplo radical es el análisis de la respuesta espectral. En cuanto al origen de la colorimetría, cabe aclararse que Hermann Grassmann, un matemático de Alemania, fue el autor de una serie de leyes que mencionaban las vicisitudes de las mezclas aditivas de los colores. Es decir, Grassmann enunció a través de esas leyes que todos los colores pueden efectivamente ser expresados como si se tratara de una suma de los tres colores primarios, o sea, de los colores que no pueden ser de ninguna manera obtenidos mediante la mezcla de colores x. Cuando se aplica la Ley de Grassmann, lo que se obtiene es una ecuación unitaria del color que, cuando se la representa, da como resultado una forma más que similar a la de un triángulo. De esta forma, la colorimetría desarrolla continuamente una serie de métodos, con el objetivo de realizar una cuantificación de los colores, siempre teniendo en la meta a la obtención de todos los valores numéricos con los que cuentan los colores. La colorimetría se basa en el empleo de un instrumento, que se encuentra constituido por una serie de elementos: tal es el caso de la fuente de radiación (se trata de una luz blanca); de un sistema dispersivo como lo son las rendijas de entrada y salida, junto con la red de difracción; del detector que es una especie de fototubo encargado de transformar la señal luminosa en una señal eléctrica; y, por el último, del sistema que se ocupa de las medidas de la absorción, una vez que la misma haya sido previamente amplificada, es decir, se trata de un conversor analógico o digital.

~-5- ~

HISTORIA La colorimetría ha tenido una gran expansión debido a la industria cosmética por el estudio de sombras, tintas, polvos y colores para el cabello. En la actualidad, otra importante expansión se ha debido a los problemas de gráficos por ordenador y a la reproducción de colores, así como por el análisis y la documentación de superficies antiguas, como cuadros y policromados. Utilizando técnicas para el análisis colorimétrico es posible llegar a un análisis químico del material superficial que se está analizando, como el análisis de la respuesta espectral. Cuando la percepción del color fue reconocida hace mucho tiempo, se estableció la correlación entre la física y la fisiología. En 1704, el físico Isaac Newton ya había hecho una contribución clave a la espectrofotometría y a la colorimetría con sus tentativas de dividir la luz blanca en colores espectrales, pero en realidad el efecto sobre el ojo humano se definió 100 años más tarde por el médico Thomas Young. Él fue, según se informa, el primero en describir cómo el color es percibido con los tres receptores del ojo para los colores primarios: rojo, verde y azul. Ahora se sabe que cada impresión en color puede ser totalmente descrita por tres valores. Antecedentes de la colorimetría: 

Isaac Newton. Carta a Henry Oldenburg, 1671.

Si estos principios son tales que a partir de ellos un matemático puede determinar todos los fenómenos de los colores que puedan ser causados por la refracción, supongo que la ciencia de los colores se admitirá matemáticamente. 

Isaac Newton.

Si nos preguntásemos que significan las palabras "rojo", "azul", "negro", "blanco"... podremos señalar de forma inmediata y con certeza cosas que tienen esos colores, pero nuestra capacidad de explicar el significado de estas palabras no va más allá. 

Ludwig Wittgenstein, Observaciones sobre los colores, 1950.

El objeto de la colorimetría es expresar los colores y sus atributos perceptuales mediante números. Para conseguirlo, es necesario establecer una correlación entre los distintos atributos perceptuales del color y las magnitudes de la radiación visible.En este sentido, la colorimetría es una parte de la psicofísica, la disciplina que estudia las relaciones entre las magnitudes físicas y las respectivas magnitudes percibidas.

~-6- ~

COLOR ¿Qué es el color? El color es un atributo que percibimos de los objetos cuando hay luz. La luz es constituida por ondas electromagnéticas que se propagan a unos 300.000 kilómetros por segundo. Esto significa que nuestros ojos reaccionan a la incidencia de la energía y no a la materia en sí. Las ondas forman, según su longitud de onda, distintos tipos de luz, como infrarroja, visible, ultravioleta o blanca. Las ondas visibles son aquellas cuya longitud de onda está comprendida entre los 380 y 770 nanómetros. Los objetos devuelven la luz que no absorben hacia su entorno. Nuestro campo visual interpreta estas radiaciones electromagnéticas que el entorno emite o refleja, como la palabra "Color". Propiedades del color Las definimos como el tono, saturación, brillo. 

Tono, matiz o croma es el atributo que diferencia el color y por la cual designamos los colores: verde, violeta, anaranjado.



Saturación: es la intensidad cromática o pureza de un color Valor (value) es la claridad u oscuridad de un color, está determinado por la cantidad de luz que un color tiene. Valor y luminosidad expresan lo mismo.



Brillo: es la cantidad de luz emitida por una fuente lumínica o reflejada por una superficie. / Luminosidad, es la cantidad de luz reflejada por una superficie en comparación con la reflejada por una superficie blanca en iguales condiciones de iluminación.

Tonos coloreados y no coloreados. Los tonos que contienen una mezcla negra y blanca se denominan no coloreados. Todos los demás tonos se denominan coloreados. La mezcla de tonos coloreados y no coloreados se expresa con el concepto de saturación (Pureza). Una tonalidad coloreada –por ejemplo, rojo – se denomina saturada, cuando no contiene mezcla de blanco o negro. Para la evaluación de una tonalidad se emplean tres criterios: color, brillo y saturación/pureza.

~-7- ~

Dependencia entre y colores coloreados y no coloreados

Mezcla de colores. En la teoría cromática se distinguen dos tipos de mezclas de colores. Por un lado, la mezcla aditiva, en la que se basa por ejemplo el principio de funcionamiento de la televisión color. Este tipo de mezcla consiste en reunir (sumar) luz de diferentes longitudes de onda. Luz roja y luz verde producen conjuntamente luz amarilla. El otro procedimiento es la mezcla sustractiva, que forma la base de nuestro método de mezcla de colores en el taller. 

Colores primarios (los tres básicos): El método de mezcla sustractiva permite obtener cualquier tonalidad partiendo de los colores ROJO, AZUL y AMARILLO. Por esta razón, el rojo, el azul y el amarillo se denominan primarios.



Colores secundarios: Se llaman colores secundarios a los tres colores VERDE, VIOLETA y NARANJA resultante de la mezcla de los tres colores primarios.

El círculo cromático El círculo cromático de Ostwald. Existen diferentes teorías para la clasificación de los colores. L a m á s importante para nosotros fue formulada por Wilhelm Ostwald, que dispuso los colores del espectro en forma de círculo. Esta forma de representación se denomina “Círculo cromático de Ostwald”, en honor a su inventor. Este círculo es de gran importancia para el matizado de colores

~-8- ~

Colores compuestos. Se denominan complementarios a los colores que se encuentran opuestos diametralmente en el círculo cromático. Estos colores no son muy recomendables mezclarlos para ajustar un color, ya que son mutuamente refrigerantes, y producen mezclas “sucias”. En otras palabras: conducen a colores acromáticos. Colorea afines Se denominan colores afines a los yuxtapuestos en el círculo cromático. Mezclando dos colores afines se obtienen tonalidades puras. Por esta razón, son recomendables para el ajuste de colores.

CIRCULO CROMÁTICO

El círculo cromático es una distribución de los colores primarios, secundarios y terciarios alrededor de un círculo. Los colores en un círculo cromático son: amarillo, anaranjado, rojo, violeta, azul y verde. La mezcla los colores primarios produce los colores secundarios. Rojo y amarillo producen anaranjado, amarillo y azul producen verde, etc.

~-9- ~

Estos colores a su vez pueden ser representados en un círculo de 12 colores, haciendo una mezcla de un color con el siguiente y así sucesivamente se puede crear un círculo cromático con millones de colores. El círculo cromático: Nos sirve para observar la organización básica y la interrelación de los colores. También lo podemos emplear como forma para hacer la selección de c olor que nos parezca adecuada a nuestro diseño. Podemos encontrar diversos círculos de color, pero el que aquí vemos está compuesto de 12 colores básicos.

Procedimiento de la medida del color Existe una necesidad de estandarizar el color para poderlo clasificar y reproducir. El procedimiento utilizado en la medida del color consiste sustancialmente en sumar la respuesta de estímulos de colores y su normalización a la curva espectral de respuesta del foto receptor sensible al color. Como referencia, se utiliza la curva espectral codificada de la Comisión Internacional de Iluminación, la llamada función colorimétrica. Debe notarse que el color es una característica subjetiva, pues solo existe en el ojo y en el cerebro del observador humano, no siendo una característica propia de un objeto. Los fotorreceptores del ojo humano son los conos de la retina, de los que existen diferentes tipos, con sensibilidades diferentes a las distintas partes del espectro luminoso. El matemático alemán Hermann Grassmann enunció unas leyes sobre la mezcla aditiva del color. Estas muestran que cualquier color puede expresarse como suma de tres colores primarios, es decir, de tres colores, cada uno de los cuales no puede obtenerse por la mezcla de los otros dos. Aplicando sus leyes, se obtiene la denominada ecuación unitaria del color, que representada, da una forma parecida a un triángulo, el triángulo internacional de color. El área dentro de las tres curvas que se obtienen al fin del procedimiento dan origen a tres valores: las coordinadas triestímulo X, Y y Z ligadas a las coordinadas de cromaticidad x e y por relaciones lineales. El paso de un espacio de colores a otro son datos de relaciones de transformación de coordenadas.

~ - 10 - ~

LEY DE LAMBERT-BEER Dentro de un fotómetro de óptica, se utiliza un haz de luz enfocado de manera precisa para penetrar el elemento del procesado. Una célula fotoeléctrica de silicio mide la intensidad resultante de luz. La alteración de la intensidad de la luz, causada por la absorción y/o difusión está explicada en la Ley Lambert-Beer. La Ley Lambert Beer es un medio matemático de expresar cómo la materia absorbe la luz. Esta ley afirma que la cantidad de luz que sale de una muestra es disminuida por tres fenómenos físicos:



La cantidad de material de absorción en su trayectoria (concentración)



La distancia que la luz debe atravesar a través de la muestra (distancia de la trayectoria óptica)



La probabilidad de que el fotón de esa amplitud particular de onda sea absorbido por el material (absorbencia o coeficiente de extinción)

Leyes de la absorción de energía radiante Se refieren a las relaciones existentes entre la cantidad de absorbente y el grado con el que es absorbida la energía radiante. En términos generales, puede decirse que hay dos variables capaces de afectar al grado de absorción: la concentración del absorbente y la longitud del trayecto que el rayo luminoso recorre a través de la solución. La relación entre ambas se expresa con la fórmula denominada Ley de Beer: P =P0 10-abc P = potencia radiante transmitida Po = potencia radiante incidente una cantidad proporcional a la misma, medida colocando en la cubeta el solvente puro

~ - 11 - ~

a = absortividad, constante característica del absorbente y de la longitud de onda de la radiación incidente. b = longitud del paso de la luz a través de la solución del absorbente, expresada generalmente en cm. c = concentración del absorbente

Algunos autores prefieren utilizar términos de Io e I, expresando entonces intensidad en lugar de potencia. En la práctica lo que tiene importancia es la proporción P / P0 denominada transmitancia (T) o cuando se multiplica por 100, porcentaje de transmitancia (%T). La ley de Beer también puede escribirse de la siguiente forma log (P0 / P) = abc El término log (P0 / P) se define como la Absorbancia. Cuando las medidas se efectúan utilizando siempre la misma cubeta (o bien un grupo de cubetas estandarizadas que posean un paso de luz constante) y los efectos ópticos debidos a la cubeta son reproducibles, el término b de la expresión de la absorbancia se hace constante. Dado que a es también constante para un determinado absorbente y una concreta longitud de onda, resulta entonces que la absorbancia es directamente proporcional a la concentración: A = kc (k = ab). La ventaja fundamental que ofrece el empleo de la Absorbancia en lugar de la Transmitancia es que la relación existente entre la concentración y la absorbancia es lineal, cosa que no sucede con el %T.

Dado que la Absorbancia es proporcional a la concentración, tendremos que: A1 / A2 = C1/ C2 donde, A1 = Absorbancia del problema A2 = Absorbancia de un estándar de concentración conocida C1 = Concentración del problema C2 = Concentración del estándar Concentración (problema) = A1 (problema) / A2 (estándar)* Concentración estándar

~ - 12 - ~

Transmitancia A medida que un haz de luz atraviesa un medio absorbente, la cantidad de luz absorbida en cualquier volumen es proporcional a la intensidad de luz incidente multiplicado por el coeficiente de absorción. Consecuentemente, la intensidad de un haz incidente decae exponencialmente a medida que pasa a través del absorbente. Esta relación cuando se expresa como Ley de Lambert es: Donde T= ε= c= d=

Transmitancia Coeficiente molar de extinción Concentración molar del absorbente Distancia en cm

T = 10-εcd o T = 10-A En un enfoque simplificado, la transmitancia puede ser expresada como la intensidad de la radiación incidente, I0, que divide a la luz emergente de la muestra, I. Se refiere a la relación I/I0 como transmitancia o sencillamente T Absorción La transmitancia puede ser trazada en relación a la concentración, pero la relación no es lineal. El logaritmo negativo en base 10 de la transmitancia sí es, sin embargo, lineal con la concentración. De esta manera, la absorción es medida como: A = -log10 (I/Io) or A = -log10 (T)

~ - 13 - ~

Cromatografía y la ley de Lambert y Beer Cuando se pasa un rayo de luz monocromática de intensidad inicial I0 a través de una solución en un recipiente transparente, parte de la luz es absorbida de manera que la intensidad de la luz transmitida I es menor que I0. Ocurre alguna disminución en la intensidad de la luz por dispersión de las partículas reflexión en las interfaces, pero principalmente por absorción de la solución. La relación entre I e I0 depende de la longitud del medio absorbente, l, y de la concentración de la solución absorberte, c, estos factores se hallan relacionados en la ley de Lambert y Beer.

Por qué son coloreadas las soluciones

Ley de Lambert. Cuando un rayo de luz monocromática pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la longitud del medio absorbente aumenta.

Ley de Beer. Cuando un rayo de luz monocromática pasa a traés de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la concentración del medio absorbente aumenta.

~ - 14 - ~

Estas dos leyes se combinan en la ley de Beer-Lambert:

Absorción de la luz por una solución

El cociente de las intensidades se conoce como la transmitancia y se expresa como un porcentaje:

Sacando logaritmos:

La expresión

se conoce como la extinción E, o absorbancia. La esta se designa

algunas veces como densidad óptica, pero este nombre no se recomienda actualmente, por lo tanto:

Si se sigue la Ley de Beer-Lambert y l se mantiene constante, un grafico de la extinción en función de la concentración da una línea recta que pasa por el origen; en tanto que un grafico del porcentaje de transmitancia en función de la concentración de una curva negativa exponencial.

~ - 15 - ~

Relación entre la absorbancia de la luz y la concentración de una solución de una solución absorbente

Algunos colorímetros tienen dos escalas, en lineal de porcentaje de transmitancia y ltra logarítmica de extinción. Esta última escala es que esta linealmente relacionada con la concentración y se usa en las curvas patrones de concentración.

Relación entre el porcentaje de transmitancia y la extinción

Con la ayuda de tales curvas se puede determinar fácilmente la concentración de una muestra conociendo su extinción.

~ - 16 - ~

Coeficiente molar de extinción. Si l es 1 cm y c es 1 mol/l, la absorbancia será igual al coeficiente molar de extinción k, el cual se característico para un compuesto dado. El coeficiente molar de extinción k, es por lo tanto, la extinción producida por 1 mol/l en un recorrido de luz de 1 cm y generalmente se escribe

; y se expresa

.

Coeficiente de extensión especifica. No se puede conocer fácilmente el peso molecular de algunos compuestos tales como proteínas y ácidos nucleícos presentes en una mezcla y en este caso se usa el coeficiente de extinción específica. Este se define como la extinción de 10 g/l (antes conocido como 1% p/v) del compuesto en un recorrido de luz de 1 cm

.

Limitaciones de la Ley de Beer-Lambert. Algunas veces no son lineales los graficos de la extinción en función de la concentración y esto probablemente se deba a que no se cumple alguna de las siguientes condiciones: 1. La luz debe ser perfectamente monocromática o la longitud de onda debe estar entre límites muy estrechos. 2. La longitud de onda de la luz empleada debe coincidir con el máximo de absorción de la solución. Esto permite también conseguir la sensibilidad óptima. 3. No debe haber ionización, asociación, disociación o solvatación del soluto con respecto a la concentración o al tiempo. 4. La solución es muy concentrada, originado un color muy intenso. La ley solo se cumple hasta cierto límite máximo de concentración, característica para cada sustancia.

Medición de la extinción Los primeros colorímetros se calibran “a ojo” comparando el color de una solución con los de una serie de discos colorados. Los resultados obtenidos eran muy subjetivos y no muy exactos. Los colorímetros visuales solo tienen ahora un interés histórico. La célula fotoeléctrica tiene la ventaja sobre el ojo humano de poder determinar el grado de absorción de un color y de ser mucho más objetiva.

El colorímetro fotoeléctrico. En esta figura se presenta un diagrama de las partes básicas de un colorímetro típico. La luz blanca de una lámpara de tungsteno pasa a través de una rendija,

~ - 17 - ~

luego a través de un lente condensador, hasta obtener un rayo paralelo que incide sobre la solución que se investiga, la cual se ha colocado en una celda de absorción o cubeta. La cubeta es generalmente de vidrio y las paredes a través de las cuales para el haz fe luz son parelas. En muchos casos, las cubetas tiene una base de 1 cm2 y pueden contener fácilmente 3 ml de líquido. Después de la cubeta se encuentra el filtro, el cual se selecciona para permitir la trasmisión máxima del color no absorbido. Si se quiere examinar una solución azul, entonces se absorbe el rojo y por lo tanto se selecciona un filtro rojo. El color del filtro es, pues, complementario a la solución que se estudia. Relación entre el color de la solución estudiada y el filtro escogido para el análisis colorimétrico. Color de la solución

Filtro

Rojo-naranja

Azul-azul verdoso

Azul

Rojo

Verde

Rojo

Púrpura

Verde

amarillo

Violeta

~ - 18 - ~

En algunos instrumentos el filtro se encuentra antes de la cubeta. El filtro produce bandas angostas de transmisión y, por lo tanto, da luz aproximadamente monocromática. Los filtros Ilford son los más comunes y algunas de las propiedades se presentan a continuación. Transmisión máxima para filtros Ilford Numero del filtro Ilford

Color

Transmisión máxima (nm)

600

Violeta intenso

420

601

Violeta

430

602

Azul

470

603

Azul verdoso

490

604

Verde

520

605

Amarillo verdoso

550

606

Amarillo

580

607

Naranja

600

608

Rojo

680

609

Rojo fuerte

700

~ - 19 - ~

APLICACIÓN DE LA COLORIMETRÍA Industria de la impresión Las normas de color se han empleado en la industria de la impresión durante mucho tiempo y para ello diversos aparatos de medir se han usado con el fin de supervisar el cumplimiento de esas normas. Los dos tipos de aparatos de medida utilizados habitualmente son: 

Densitómetros con o sin conexión a la máquina de imprimir.



Espectrofotómetros con o sin conexión a la máquina de imprimir.

El inconveniente de los aparatos fuera de línea es que el impresor tiene que confiar en los valores medidos mostrados para evaluar y ajustar la apertura de la zona de tinta, proceso que requiere extremo cuidado. La ventaja principal del control colorimétrico es la capacidad que ofrece para mantener el resultado de impresión tan cerca como sea posible a la impresión óptica del color deseado del original, y el alertar al impresor cuanto antes si las desviaciones se hacen demasiado grandes. La evaluación colorimétrica ofrece la misma percepción que el ojo humano con la ventaja de estar libre de influencias externas subjetivas y variables; en cambio, provee resultados objetivos. Los datos de medición pueden ser almacenados, registrados y también se pueden usar como un certificado de calidad. Además, los resultados de medición pueden ser automáticamente evaluados con el software de Monitor de Calidad de Heidelberg, un componente integrado en el Profile Toolbox de productos Prinect y en el Calibration Toolbox.

-

Bernd Utter y el Dr. Werner Huber del Centro de Investigación y Desarrollo de Heidelberger Druckmaschinen AG (Heidelberg) nos proporcionan una introducción a la colorimetría, a la espectrofotometría y a sus usos en las áreas de “control del color” y en la de “gestión del color”. En este artículo, además de un poco de historia, se hace un repaso a la colorimetría básica y a su aplicación en los sistemas de medición en el color de Heidelberg.

~ - 20 - ~

Determinación colorimétrica de fosfato inorgánico La mayoría de los compuestos bioquímicos no tiene coloración y pueden ser analizados colorimétricamente pero solo después de someterlos a la acción de un reactivo químico especifico que origine un producto coloreado. Este aspecto puede ilustrarse midiendo fosforo inorgánico, que es, probablemente, una de las determinaciones más usuales en los laboratorios de bioquímica. El fosfato inorgánico reacciona con molibdato de amonio en solución acida para formar acido fosfomolíbdico. La adición de una agente reductor reduce el molibdeno presente en el fosfomolibdato produciendo un color azul, sin afectar el acido molíbdico libre. En este método el agente reductor es el sulfato de p-metilaminofenol. La presencia de cobre en la solución amortiguadora aumenta la velocidad de aparición del color.

~ - 21 - ~

CONCLUSIÓN Los métodos fotométricos son técnicas analíticas basadas en la medición de la radiación electromagnética absorbida, reflejada o emitida por una sustancia dispersantes en una solución. Para efectos cuantitativos, todas ellas se basan en la aplicación de la ley de Lamber Beer, ley que establece básicamente una proporción lineal entre la magnitud de la absorción y la concentración de las sustancias absorbente. A través de estos métodos fotométricos, es posible medir con gran presicion muchas substancias coloreadas por fotometría visual o colorimetría. la colorimetría consiste en la comparación visual del color de las soluciones de la substancias problema con una serie de patrones, hasta conseguir la coincidencia. Esta técnica entonces nos perite la identificación de muestras a través de la comparación de sustancias patrón, y una vez que se consigue la igualar visualmente intensidad de los colores de las soluciones, se miden las longitudes de solución, aplicando la ley de Beer se calcula la concentración y la identificación de nuestra sustancia. La colorimetría a avanzado en diferentes aéreas industriales y su campo de uso está creciendo a la par con los a veces técnicos e industriales.

REFERENCIAS 

Florkin, M. y Stotz, E., Comprehensive Bichemistry, Vol 3, Methods for the Study of Molecules, Amsterdam, Elservier, 1963.



Van Holde, K. E., Physical Biochemistry, Englewood Cilffs; N. J., Preentice Hall, 1971.



L. Hernández, C. González, Introducción al Análisis Instrumental. Editorial: Ariel Ciencia (2002)



R. Matissek, F.M. Schnepel, G. Steiner, Análisis de los Alimentos. Editorial Acribia. S.A



McPherson RA, Pincus MR, eds. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 21st ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2006.



http://webs2002.uab.es/ipividori/qca%20analii/T7.pdf



~ - 22 - ~