Colesterol

 

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UNIVERSIDAD NACIONAL NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ORGÁNICA CURSO DE BIOQUÍMICA PRÁCTICA EXTRACCION DE COLESTEROL DEL CEREBRO Profesor: Mg. Juan Carlos Woolcott Hurtado Horario: Sábado 8-12pm Alumnos: Alvarez Ninahuanca Sally Estefania

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Flores Salsavilca B.

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Puma Ticona Rhony Ulises

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Rojas Barreto Jazmín

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Fecha de realización de la práctica: 27 de otubre del 2018 Fecha de entrega de la práctica: 30 de octubre del 2018

Lima  –  Perú  Perú 2018  –  II  II

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Contenido RESUMEN ................... .......................................... ............................................. ............................................ ............................................ ................................. ........... 3  INTRODUCCION............................................................ ................................................................................... .............................................. ........................... 4  PRINCIPIOS TEORICOS ............... ..................................... ............................................ ............................................. ..................................... .............. 5  DETALLES EXPERIMENTALE EXPERIMENTALES S ...................................... ............................................................ ............................................ ...................... 7  PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL .......................... ................................................. .............................................. ........................... 8  REACCIONES .................... ........................................... .............................................. ............................................. ............................................. ........................... 9  ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS ................ ...................................... .......................................... .................... 10  CONCLUSIONES............................................................ ................................................................................... .............................................. ....................... 11  RECOMENDACIONES ..................... ........................................... ............................................ ............................................ ............................... ......... 12  BIBLIOGRAFIA ............................................ .................................................................. ............................................ .......................................... .................... 13 

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RESUMEN

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INTRODUCCION

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PRINCIPIOS TEORICOS Metabolismo de los lípidos

Son un grupo de moléculas orgánicas en cuya composición química intervienen principalmente los elementos C, H y O y, en menor proporción S y P. La característica común de todos ellos es que son sustancias poco o nada solubles en agua, pero solubles en disolventes orgánicos(cloroformo, éter, benceno, xilol, etc.) Es un grupo muy heterogéneo, ya que no tienen en común ni la estructura de sus moléculas ni la gran variedad de funciones que desempeñan. Tanto en las plantas como los animales, los lípidos se almacenan en grandes cantidades como triacil gliceroles neutros altamente insolubles. Los lípidos funcionan como aislantes importantes de órganos internos delicados. Así mismo, el tejido nervioso, la membrana plasmática y todas las membranas de las partículas subcelulares como mitocondrias, retículo endoplasmático y núcleo tiene lípidos complejos como componentes esenciales. Ellos pueden ser degradados rápidamente para satisfacer las demandas energéticas de la célula. Funciones de los lípidos. 1.  Función energética: son carburantes metabólicos y forman depósitos de reserva energética. 2.  Función estructural: son constituyentes estructurales de las membranas biológicas. 3.  Función vitamínica: vitaminas liposolubles A, D, E y K. 4.  Función hormonal: hormonas esteroideas. Clasificación de los lípidos según su estructura molecular: 1.  Lípidos saponificables: son capaces de formar jabones al reaccionar con bases alcalinas (NaOH y KOH). Agrupa a losácidos grasos y a sus derivados,ya sea mediante la formación de enlaces éster con otras sustancias (triacilglicéridos,lípidos de membrana y ceras), o mediante otras modificaciones(eicosanoides). 2.  Lípidos insaponificables:carecen de enlace éster, por loque no forman jabones tras la hidrólisis alcalina. Derivan desucesivas condensaciones deunidades de isopreno (una molécula de cinco átomos decarbono), por lo que también reciben el nombre de isoprenoides y agrupa a los terpenos y a los esteroides

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DETALLES EXPERIMENTALES Materiales   Cerebro de animal de laboratorio.   Aceite vegetal.

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Reactivos            

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Cloroformo. Sulfato de calcio (yeso) en polvo. Ácido sulfúrico concentrado. Anhídrido acético. Estufa, mortero con pilón, lamina de vidrio. Tubos de ensayo embudo de vidrio papel filtro.

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL Moler cuidadosamente en un mortero de 3g de cerebro con una cantidad de doble yeso. El homogenizado espeso se distribuyó de manera uniforme, con una espátula sobre la  placa de vidrio vidrio y luego secado cuidadosamen cuidadosamente te a 60°C en la estufa. estufa. La La masa masa seca seca las raspa raspa de la lámina sobre un mortero seco, se procede a moler bien y luego se pasó a un tubo de ensayo seco. Se agregó al tubo de ensayo una cantidad de cloroformo y se agito durante 10 minutos. Se filtró el extracto clorofórmico obtenido en un tubo de ensayo ensayo seco a través de un papel filtro. El extracto se conservó para el los análisis correspondientes. Reacción de Guppert-salkowski En un tubo de ensayo se tomó una pequeña cantidad de extracto clorofórmico del cerebro y cuidadosamente por las paredes del tubo se agregó una pequeña cantidad de ácido sulfúrico concentrado. El tubo se agita débilmente y se observa un anillo color rojo-pardo luego el líquido paso a un color naranja y rojo-violeta. Se hizo el mismo procedimiento para el análisis del aceite y la mantequilla. Se observó  para el caso de la mantequilla un mayor cambio en la intensidad de coloración así como la formación del anillo rojo-pardo. Material

Componente investigado

Cerebro

Colesterol

Aceite

Colesterol

Mantequilla

Colesterol

Reacción

Coloración

Resultado

+ H2SO4  concentrado + H2SO4  concentrado

Anillo  pardo Anillo  pardo

+ H2SO4  concentrado

Anillo  pardo

Contiene colesterol Contiene colesterol Contiene colesterol en mayor proporción

Reacción de Lieberman-Buch Lieberman-Buchard ard En un tubo de ensayo seco se agregó 1 mL de extracto clorofórmico y se añadió 10 gotas de anhídrido acético y 2 gotas de ácido sulfúrico concentrado. Se observa que al inicio se torna de color rojo pero en un breve tiempo este pasa a color verde. Se hizo el mismo procedimiento para el análisis del aceite y la mantequilla. Se observó  para el caso de la mantequilla un m mayor ayor cambio eenn la intensidad de coloración. Material

Componente investigado

Cerebro

Colesterol

Aceite

Colesterol

Mantequilla

Colesterol

Reacción

C4H6O3 + H2SO4  concentrado C4H6O3 + H2SO4  concentrado C4H6O3 + H2SO4  concentrado

Coloración

Verde Verde Verde

Resultado

Contiene colesterol Contiene colesterol Contiene colesterol en mayor proporción 8

 

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REACCIONES Reacción de Guppert-salkowski

Reacción de Lieberman-Buch Lieberman-Buchard ard

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ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS Reacción de Guppert-salkowski El colesterol por acción de agentes deshidratantes como el ácido sulfúrico se transforma en colestireleno, compuesto de dobles enlaces conjugados que presentan coloración rojovioleta. La capa superior quedeconsta cloroformo se vuelve deeluncual rojocon azulado a rojo cereza, mientras que la capa ácido de sulfúrico se vuelve amarilla fluorescencia tiende a color verde. Reacción de Lieberman-Buch Lieberman-Buchard ard Es un reactivo utilizado en un ensayo colorimétrico para detectar el colesterol, lo que da un color verde intento. Se basa en la deshidratación y oxidación del colesterol por ácido sulfúrico. Como resultado de esto, dos moléculas de colesterol, después dos moléculas de agua se unen entre sí en el tercer átomo de carbono formando sustancias que corresponde a las formulas generales de C54H86 y C54H88. Este color comienza como un color rosa violáceo y progresa de un verde claro y luego de color verdecon muy color es debido al grupo hidroxilo (-OH) deencolesterol reaccionar los oscuro. reactivosEly el aumento de la conjugación de la instauración el anillo fusionado adyacente.

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CONCLUSIONES  

Se identificó el colesterol mediante las reacciones de Guppert-salkowski y Lieberman-Buchard, Lieberman-Buch ard, los cuales son método colorimétrico por que dan un cambio de coloración en presencia del colesterol, los colores observados fueron rojo-violeta y verde respectivamente.   Se encontró mayor cantidad de colesterol en la mantequilla respecto al análisis del

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cerebro y el aceite, esto debido a la intensidad de color verde observado.

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RECOMENDACIONES

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BIBLIOGRAFIA

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ANEXOS

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