Coci Gram Pozitiv II

COCI GRAM POZITIVI

Genul Staphylococcus

Genul Staphylococcus

Caractere generale • familia Micrococcaceae • staphilos (gr.)= ciorchine • aerobi (anaerobi facultativi) • cl cloru orura ra de sod sodiu iu 7,5 7,5% % (hal (haloto otoler leranţ anţi) i) • catalazo catalazo –   –  pozitivi  pozitivi • imobili • in vivo majoritatea produc capsula

Reprezentati  - purtatori  purtatori sanatosi: cavitatea nazala, • S. aureus faringe, tegumente, intestin -30% dintre persoanele sanatoase - 80-90% personalul din mediul spitalicesc - responsabil de majorit majoritatea atea infectiilor umane stafilococice

 - microbiocenoza  microbiocenoza nazala, cutanata • S. epidermidis => infectii oportuniste la pacienti imunodeprimati: cistite, septicemii, endocardite, meningite - in infe fect ctii ii no noso soco com mia iale le

• S. saprophyticus  –  oportunist - infectii de tract urinar

Factorii de patogenitate ai S. aureus • numerosi factori de patogenitate => diversitatea infectiilor stafilococice. • determinism plasmidic sau fagic => variatiile in virulenta observate la stafilococi.

I Antigene de suprafata II Enximele extracelulare III Toxine

Factorii de patogenitate ai S. aureus I Antigene de suprafata (atasarea stafilococilor in tesuturi):

- acizii teichoici - peptidoglicanul - capsula (prezenta la stafilococii tineri) - proteina A

Factorii de patogenitate ai S. aureus II. Enzimele extracelulare contribuie la formarea leziunilor tisulare si diseminarea bacteriilor

 = cel mai important factor de 1. Coagulaza   patogenitate • transformarea fibrinogenului in fibrina a) libera coagularea plasmei, formarea de coaguli mici endovenosi, incarcati cu stafilococ  diseminare  b) legata  manta de fibrina in jurul stafilococilor => rol antifagocitar

Factorii de patogenitate ai S. aureus II. Enzimele extracelulare 2. Fibrinolizina (stafilokinaza):  plasmingenul  plasmina;

diseminarea bacteriilor.

3. Hialuronidaza 4. DNA-aza 5. Fospfolipaze si esterazele (metabolizeaza lipide cutanate, favorizand colonizarea cu stafilococ a zonelor sebacee)

6. -lactamaze (penicilinaze): - usor de transmis de la o tulpina la alta, - det.rezistenta stafilococilor la peniciline si alte lactamine.

Factorii de patogenitate ai S. aureus III. Exotoxine

1. Exotoxine citolitice 2. Enterotoxinele 3. Toxina exfoliativa 4. TSST-1 (sindromul şocului toxic) 5. Exotoxine piretogenice

Factorii de patogenitate ai S. aureus III. Exotoxine

1. Exotoxine citolitice - Leucocidinele - Hemolizinele (  ,    ,  ,  ) - Hemolizina alfa - efect hemolitic, dermonecrotic, letal la iepure. - Hemolizina  : hemoliza de tip“ cald-rece”. - Hemolizina   :citotoxic asupra limfoblastelor. - Hemolizina   :citotoxic pentru neutrofile, macrofage, limfocite, plachete.

Factorii de patogenitate ai S. aureus III. Exotoxine

2. Enterotoxinele - 6 tipuri antigenice de enterotoxine:A,B,C,D,E si F, - rezistă 30 min. la fierbere - toxiinfectii alimentare stafilococice - enterite postantibiotice.

Factorii de patogenitate ai S. aureus III. Exotoxine

3. Toxina exfoliativa -

boli cutanate cu exfoliere (mai ales la copii)

-

determinism plasmidic.

Infectiile stafilococice I.

Infectii superficiale, ale pielii

II.

Infectii profunde

III. Infectii determinate de toxinele stafilococice Majoritatea infectiilor au un caracter supurativ, stafilococul fiind prototipul de bacterie piogena.

Infectiile stafilococice I.

Infectii superficiale, ale pielii

Foliculite Impetigo Abcese Furuncule Carbuncule Infectii ale plagilor postchirurgicale Hidrosadenita Panaritiu

Infectiile stafilococice II. Infectii profunde Bronhopneumonie (dupa infectii virale, varstnici, nosocomiale) Bacteriemii, septicemii

 abcese

metastatice

Endocardite (! Proteze valvulare) Mastite Infectii de tract urinar Infectii uterine (post-partum, post-abortum) Osteomielita, artrita Meningita, peritonita

Infectiile stafilococice III. Infectii determinate de toxinele stafilococice 1.

Sindromul de piele oparita (n.n, copii ≤ 5 ani)

2.

Toxinfectii alimentare (enterotoxina stafilococica)

3.

Enterocolita postantibiotice

4.

Sindromul de soc toxic

INFECTII PRODUSE

INFECTII PRODUSE

Caractere microscopice - coci

Gram pozitivi - asezati in gramezi

GENUS STAPHYLOCOCCUS pure culture

pathological product

Staphylococcus spp.

Caractere de cultura

Geloza simpla (bacterie nepretentioasa nutritiv) Pigment galben auriu (S. aureus)

Caractere de cultura –  pigment  pigment  pigment galben auriu- S. aureus pigment alb-S.epidermidis

Caractere de cultura- geloza sange (hemoliza) hemoliza completa=hemoliza α

Caractere de cultura-hemoliza

hemoliza cald-rece =hemoliza β

Mediul Chapman Mediu selectiv şi diferential (evidentiaza o proprietate biochimica a tulpinii)

Componente: geloza simpla + NaCl 7,5% + manitol + rosu fenol Utilizare: selectiv pentru stafilococ

S.aureus pe mediu

 pe mediu S. saprophyticus 

solid hiperclorurat

solid hiperclorurat cu manitol

cu manitol

Mediul Chapman

TESTE DE PATOGENITATE IN VITRO Coagulaza libera Test negativ

Test pozitiv

TESTE DE PATOGENITATE IN VITRO Coagulaza legata

TESTE DE PATOGENITATE IN VIVO

Test Dolman- enterotoxina

ANTIBIOGRAMA β- lactamine !!!! (Oxacilina, Meticilina) Aminoglicozide Macrolide Vancomicina

METODA DIFUZIMETRICA

Genul Streptococcus

Genul Streptoccocus

• grup heterogen • numar mare de specii de streptococi:  – saprofite ale plantelor  –  prezente in lapte si branzeturi (Streptococcus lactis),  – Comensale • microbiocenoze normale: cavitatea nazala, orofaringe, intestin, tegument.

 – Patogene: Streptococcus pyogens, cel mai frecvent  patogen izolat din infectiile umane.

Caractere generale

• Coci Gram pozitiv • dispusi in lanturi de dimensiuni variabile • capsula:  – acid hialuronic : Streptococii -hemolitici grup A  –  polizaharide: Streptococcus pneumoniae • catalazo - negativi • aerob-anaerob facultativi; • Streptococii anaerobi - genul Peptostreptococcus (5 specii)

Clasificare –  hemoliza pe geloza sange • hemoliza β: clara, hematiile sunt lizate total = streptococi β -hemolitici

• hemoliza

- incompleta,

verzuie

• hemoliza alfa’ -intermediara, intre hemoliza şi β.

• streptococi γ nehemolitici, - nepatogeni (Streptococcus lactic)

Clasificare Rebecca Lancefield  •

Polizaharidul (carbohidratul) “C” (din structura  peretelui celular)

•

Pe baza specificitatii antigenice a polizaharidului C,

•

grupe de streptococi (Lancefield) A-T, alcatuite din una sau mai multe specii.

•

grupul A - cel mai important in patologia umana

•

grupul D, B, C si G

Clasificare Pe baza proprietatilor antigenice ale peretelui (Lancefield): pe baza  polizaharidului C: • Grup A- β hemolitici » Majoritatea infectiilor umane • Grup B- infectii neo-natale, otite, traheobronsite, infectii urinare, genitale, meningite • Grup D- implicat in afectiuni ale ap. uro-genital • Grup C si D- afectiuni cutanate, ap respirator superior, tract genital

Streptococi -hemolitici

• hemoliza incompleta, de culoare verde • Streptococcus viridans: - comensali  –  endocardita  –  Streptococcus mutans, salivarius - placa dentara

• Streptococcus pneumoniae (pneumococ) - pneumonia bacteriana, •  Enterococcus (faecalis, faecium) - infectii intraspitalicesti, in special infectii urinare.

Hemoliza α  (partiala)

Streptococi -hemolitici

• hemoliza completa, clara pe geloza sange • Streptococcus pyogenes - streptococ  hemolitic grup A Lancefield ,  – responsabil pentru majoritatea bolilor streptococcice

• Streptococcus agalactiae - streptococ  hemolitic grup B Lancefield ,  –  patogen pentru nou nascuti

CLASIFICAREA STREPTOCOCILOR

Streptococcus pyogenes Factori de patogenitate

Determinanti de suprafata:

• Capsula hialuronica • Proteina F • Proteina M – factorul de iniţiere a infecţiei (aderare  pe mucoasa faringianặ) •  80 serotipuri (Rebeca Lancefield 1928), •  peste 100 serotipuri M in prezent  –  principalul factor de virulenta

Factori extracelulari

• Hemolizine:  –  Str eptolizina S   –  Str eptolizina O  • puternic imunogena, • evidentierea anticorpilor antistreptolizina O (ASLO)

Enzime:Factori extracelulari netoxici • invazie tisulara  – Fibrinolizina: streptokinaza  – Hialuronidaza  – Streptodonaza  – Proteinaze: necroza miocardica  – anti-C5a peptidaza

Exotoxine

• Toxina eritrogenă (Dick)  –  produsa de tulpinile lizogenizate (bacteriofag lizogen); - responsabila de manifestarile caracteristice din scarlatina  – 3 tipuri antigenice: A, B, C • Exotoxi na A:  este un superantigen  – determina manifestari sistemice

Streptococcus pyogenes

• infectii piogene (supurative): • Respiratorii  – Faringita: cea mai frecventa infectie streptococica,  – Otita medie, sinuzita, mastoidita,  – pneumonia (mai puţin uzuală)

• Cutanate - Piodermite •  Infectii generalizate  – Scarlatina  – Bacteriemie  – Febra puerperala

 ANGINA

SCARLATINA

Infectiile cutanate streptococice

• Piodermite  – Impetigo,  – Erizipel,  – Celulita,  – Fasceita necrozanta

• Er item nodos • = hipersensibilizare fata de peptidoglicanul din peretele celular bacterian • noduli mici, eritematosi

ERIZIPEL

ERIZIPEL

Boli poststreptococice

1. Reumatismul poliarticular acut 2. Glomerulonefrita acuta poststreptococica • •

Pot aparea la 2-6 saptamani dupa o infectie cu streptococ de grup A. diferente:  –  o infectie faringiana poate fi urmata de oricare dintre aceste 2 boli  –  o infectie cutanata poate fi urmata numai de glomerulonefrita.

GENUL STREPTOCOCCUS- Caractere microscopice Frotiu din cultura pura de streptococ

Frotiu din produs patologic

Streptococcu

Hemoliza β (totala)

Identificarea streptococilor • Catalaza –  negativ

 –  Bacitracina –  diferentiaza strept. Grup A de alti streptococi

 –  Latex aglutinarea (Ag capsular)

Antibiograma • !!!!  – Streptococul beta-hemolitic de grup A (Streptococcus pyogenes) este sensibil la Penicilina  – Eritromicina/efectuarea antibiogramei pt.  pacientii alergici la P  – Antibiograma pe Muller-Hinton cu sange

Streptococcus pneumoniae Proprietati generale

• coci ovalari Gram pozitivi, • aspect de varf de lance sau flacara de lumanare, •  dispusi in diplo (diplococi), • Pe geloza sange - hemoliza de tip alpha, incompleta

• la nivelul tractulului respirator superior •  purtatori sanatosi: 5-10% din populatia adulta, 2040% dintre copii.

Boli produse

• Pneumonie franca lobara • sinuzite, otite, mastoidite • meningita • osteomielita •  endocardita, pericardita • artrita supurata

Factori de patogenitate • Capsula polizaharidica  –  90 tipuri capsulare • Antigenul protector (PspA) • Complex proteina A-colina (CbpA) • Pneumolizina (Ply) • Autolizina (LytA) • Peroxidul de hidrogen •  Neuraminidaza • Hialuronidaza • Proteaze IgA: proteazặ IgA1, distruge IgA secretorii

Str eptococcus pneumoniae STRUCTURA

FROTIU DIN PRODUS PATOLOGIC

Streptococcus pneumoniae

Geloza chocolat- mediu complex ptr. bacterii  pretentioase nutritiv (pneumococ, Haemophilus)

Geloza sange - mediu complex pentru bacterii pretentioase nutritiv

TESTUL LA OPTOCHIN IDENTIFICARE S.PNEUMONIAE NEGATIV

POZITIV

Identificarea pneumococilor

• Sensibilitatea la Optochin –  diferentiaza S.  pneumoniae (S) de S. viridans (R)

Identificarea pneumococilor • Bile solubility - differentiates S. pneumoniae (soluble = colony disappears) from viridans streptococci (colony stays)

PROPRIETATI DE CULTURA

ATMOSFERA DE CO2 5-10%

Tratament - Antibiograma • Penicilina G de electie, dar a aparut rezistenta=>

AB grama • Cefalosporine de generaţia III –  Ceftriaxona • Quinolone • Linezolid • Vancomicina • Quinupristin / Dalfopristin (Synercid)

• Aminoglicozide • Meningita: Vancomicina + Rifampicina

Strepococi Viridans

• frecvent comensali: in faringe, cavitatea bucala, • Implicati in etiologia abceselor dentare, S. mutans intervine in producerea cariei dentare • S. mutans, S. sanguis, S. mitis • endocardite subacute streptococice  –  patrunderea streptococilor viridans in circulatie (ex. dupa extractii dentare)  bacteriemie

Str eptococcus agalacti ae

• Streptococcus Grup B • flora normala genito-intestinala si a tractului genital feminin,  – 5-35% dintre femeile gravide colonizate (vagin/rect)  – cauza majora de boala (pneumonii, meningite, septicemii) la n.n.  – infectii post partum la femei

GROUP B STREPTOCOCCUS

Identificarea streptococilor

 – CAMP –  diferentiaza strept. Grup B de alti streptococi • Marirea hemolizei cu S. aureus = Grup B

 – Latex aglutinarea (Ag capsular)

Streptococii Grup C şi G

• izolati de la pacienti cu faringita (si purtatori)  – flora normala a tractului digestiv , vagin, orofaringe, tegumente • Infectii  –  Bacteremie,  –  meningite,  – infecţii cutanate si ale tesuturilor moi  –  artrite septice

Grup D  –  Streptococcus bovis  –  Streptococcus suis

• S. bovis  –  Bacteremie  –  Endocardita (pacienti cu leziuni ale colonului) Caracteristici: - Testul bila-esculina + - Au antigen de grup D in peretele celular

Genul Enterococcus • au antigen de grup D in peretele celular (au apartinut grupului D pana in 1984- genomic DNA analysis ) •  Enterococcus faecalis •  Enterococcus facium • flora normala din tractul gastro-intestinal, biliar, vagin, uretra • a 2-a cauza de infectii nosocomiale in U.S.A.

Enterococcus  –  boli produse   – Infectii de tract urinar  – Bacteriemie  – endocardite

 – Diverticulite  – Meningita  – infectii abdominale/pelviene

Enterococcus   – Antibiograma !!!  – Au rezistenta naturala la Cefalosporine  – Tulpinile sensibile: Ampicilina, Vancomicina, Aminoglicozide  – Standard al calitatii apei

Identificarea streptococilor

• Testul la bila-esculina  –  diferentiaza streptococii de Grup D / Enterococcus (+) de alti streptococi (-)

Identificarea streptococilor

Cresterea pe medii cu sare –  diferentiaza  Enterococcus (+) de streptococii de Grup D (-)

Identificarea streptococilor

• Pyrrolidonyl arylamidase (PYR) –  diferentiaza streptococii de Grup A/ Enterococcus (+) de alti streptococi (-)