Catalogo de Medios de Cultivo

 

CATALOGO DE MEDIOS DE CULTIVO Ingeniería en Biotecnología  

Alumnos: Ávila Cordero Lizett Guzmán Mozo Erik Grupo: 3BA Modulo: Fundamentos de Microbiología Docente: Claudia Montalvo Paquini Fecha: 05/07/2021

 

CATÁLOGO DE MEDIOS DE CULTIVO: Contenido CATÁLOGO DE MEDIOS DE CULTIVO:  

1 

1. Agar Baird Parker

2 

2. Agar Biggy

5 

3. Agar Bilis y Rojo Violeta

8 

4. Agar Bilis-Esculina

11 

5. Agar Czapek-Dox

14 

6. Agar Dextrosa Sabouraud

17 

7. Agar Eosina y Azul de metileno

20 

8. Agar Infusión Cerebro- Corazón

23 

9. Agar Mac Conkey:

26 

10. Agar MRS

29 

11. Agar Mueller Hinton

32 

12. Agar Nutritivo

35 

13. Agar Papa Dextrosa

38 

14. Agar Sal y Manitol 15. Agar Salmonella-Sh Salmonella-Shigella igella

40  44 

16. Agar Sangre

48 

17. Agar Soya-Triptica Soya-Tripticasa sa

50 

18. Agar Verde-Brillan Verde-Brillante te

53 

TABLA RESUMEN 

56 

 

1. Agar Baird Parker a) Objetivo del medio:

Es un medio moderadamente moderadamente sel selectivo ectivo y de diferencia diferenciación ción para el aisla aislamiento miento y recuento en alimentos, muestras ambientales y clínicas clínicas.utiliza .utiliza la capacidad de los estafilococos de reducir el telurito a telurio y detectar la lecitinasa a partir de la lecitina del huevo. El agar Baird-Parker se utiliza ampliamente y se incluye en numerosos procedimientos estándar para el análisis de alimentos, cosméticos o agua de piscinas con el fin de detectar la presencia de estafilococos. estafilococos.aureus aureus b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Función Funci ón especial

Triptona

10.0

Nitró Nitrógeno geno y carbono

Aporta nutrientes

Extracto de carne

5.0

Nitrógeno, vitaminas y Aporta nutrientes carbohidratos

Cloruro de litio

1.0

Agente selectivo

Glicina

5.0

Agente selectivo

Piruvato sódico

12.0

Fuente de carbono

Aporta nutrientes

Telurito potásico

10.0

Minerales

Agente selectivo

Agar

20.0

Agente gelificante para dar solidez

Emulsión de yema

50.0

minerales,vi taminas minerales,vitaminas

de huevo pH del medio:

Determinar producción de lecitinasa y lipasa

6,8 ± 0,3 *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

 

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Es un medio selectivo puesto que solo permite el crecimiento de estafilococos así mismo inhibe el crecimiento de otros ajenos a los estafilococos.. Además, posee componentes como la glicina, el cloruro de litio y el telurito potásico que actúan como agentes selectivos. d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

● Incubar

las placas en atmósfera aerobia

durante 20 – 48 h a 35 ± 2 °C ● se

debe inocular al menos una placa en atmósfera aerobia a 35 – 37 °C durante 42  – 48

h y efectuar la lectura después de 18 – 

24 h y 42 – 48 h.

e) Fundamento Fundamento bioq uímico Staphylococcus aureus se desarrolla rápidamente en todos los medios, fermentan lentamente en carbohidratos mediante glucólisis, pero no produce gas. La actividad proteolítica varía mucho de una cepa a otra. S. aureus produce pigmentos que varían desde un color blanco hasta un amarillo intenso.Staphylococcus aureus tiene un metabolismo anaerobio facultativo, con excepción de las subespecies Staphylococcus aureus anaerobius y Staphylococcus aureus saccharolyticus que crecen de forma anaerobia y a menudo son catalasa-negativas.

 

 

F) Eje Ejemplo mplo de microrg anismos qu e puede pueden n cr ece ecer: r:  

al ser un medio selectivo únicamente pueden crecer estafilococo estafilococoss , S. aerus pues el medio de cultivo inhibe inhibe el crecimiento de otros microorga microorganismos nismos ajenos.

 

2. Agar Biggy a) Objetivo del medio

El Agar Biggy es la abreviatura de Agar Bismuto Glucosa Glicina Levadura. Levadura. Se usa para aislar y diferenciar Candida albicans  y Candida tropicalis, y para diferenciar especies de acuerdo con el método de Nickerson. Nickerson descubrió descubrió que Candida albicans puede diferenciarse de otras Candida spp. en este medio basándose en la morfología de la colonia. b) Tabla de compon entes Compon entes

Glicina

(g/L)

10

Glucosa

10

Citrato de amonio

5

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

Nutrientes

Inhiben

adicionales

bacteriano

crecimiento

el

crecimiento

el

crecimiento

Carbono Inhiben

y bismuto Sulfito de sodio

el

bacteriano 3

Inhiben bacteriano

Extracto de

1

levadura Agar bacteriológico pH del medio:

Vitaminas,

en

especial vitamina B 16

Agente solidificante solidifican te

6,8±0,2 *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

 

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Es un medio de cultivo sólido, selectivo y diferencial, se considera selectivo pues cuenta con inhibidores de crecimiento bacteriano como los son el citrato de amonio y bismuto y el sulfito de amonio, además con este medio puede diferenciarse Candida spp. basándose en la morfología y color de la colonia. d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

Incubar a 25 + 2°C de 24 a 72 horas (3 a 5 días en caso de ser necesario)

 

e) Fundamento Fundamento bioq uímico El metabolismo de muchas especies de Candida los carbohidratos son fermentados, en este medio se presenta la fermentación de la fuente de carbono que es la glucosa  Además las especies de Candida reducen la sal de bismuto a

bismuto y el sulfito a sulfuro, mediante un proceso de reducción de sustrato. El bismuto y el sulfuro se combinan en un precipitado de color amarronado a negro que tiñe las colonias y puede difundirse en el medio.  

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr C. albicans, C. tropicalis, C. krusei  y C. kefyr, pero también crecen otras especies

como Candida glabrata, C. parapsilosis, C. guilliermondii, Trichosporun sp, Geotrichum candidum y Saccharomyces cerevisiae.

 

3. Agar Bilis y Rojo Violeta a) Objetivo del medio

Es un medio selectivo s electivo utilizado en la identificación y cuenta de coliformes presentes en el agua, leche y otros materiales de importancia sanitaria.Este medio es utilizado para la detección, enumeración e identificación presuntiva de microorganismos coliformes.En este medio las colonias de coliformes presentan una morfología típica que permite su identificación presuntiva y que debe ser confirmada mediante reacciones bioquímicas b) Tabla de compon entes Compon entes

Extractoo levadura Extract

(g/L)

3.0

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

Vitaminas complejo B Aporta nutrientes

mezcla de sales 1.5 biliares

inhibidor de crecimiento

cloruro de sodio

5.0

inhibidor de crecimiento

cristal violeta

0.002

inhibidor de crecimiento

peptona gelatina

7.0

Carbono y nitrógeno

lactosa

10.0

carbohidra carbohidratos tos carbono

aporta nutrientes y agente

fermentador

y

nutrimental

rojo neutro

0.03

Indicador de pH

agar

15.0

agente gelificante para dar

bacteriológico pH del medio: Vire Indicador:

solidez 7.4 ± 0.2 a 25°C

 

el vire del indicador se da por la fermentación que hacen las bacterias con respecto a la lactosa de esta manera el medio se acidifica cambiando a color rojo intenso con colonias púrpuras rodeadas de una zona rojiza de bilis precipitada c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

es un medio de cultivo selectivo ya que favorece el crecimiento de Los coliformes e inhibe el crecimiento de microorganismos ajenos a los coliformes, asimismo el medio en su formulación contiene ingredientes propios de un medio selectivo como lo es el colorant colorantee cristal violeta y la mezcla de que sales biliares de las cuales las coliformes resisten la presencia de bilis en el medio de cultivo favoreciendo que se desarrollen en este medio, el ácido producido por la fermentación de lactosa, ocasiona el vire del indicador rojo neutro y la precipitación de las sales biliares, por lo que las colonias son color rojo oscuro y generalmente están rodeadas de un halo de sales biliares además en este medio las colonias de coliformes presentan una morfología típica que permite su identificación presuntiva. d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condic iones de incub ación.

condiciones de incubación : ●

 Permitir el medio y adicionar 4 mL del medio que enfriado a unasolidifique temperatura de 45-50°C. ● Permitir que el medio solidifique e incubar a 35 ± 2°C durante 18 a 24 horas. Se recomienda la incubación a 32°C para muestras de productos lácteos. ●  Examinar las colonias de color rojo a púrpura, de 0.5 mm de diámetro (o más grande) rodeadas por un halo con precipitado de ácidos biliares

 

  e) Fundamento Fundamento bioq uímico:

El grupo de los coliformes incluye bacterias en forma de bacilo, gram negativos, con las siguientes propiedades bioquímicas: oxidasa negativo y capacidad de fermentar lactosa, con producción de gas en 48 horas a una temperatura de 37°C.La fermentación láctica, también conocida como fermentación ácido-láctica, es el proceso de síntesis de ATP en ausencia de oxígeno que realizan algunos microorganismos microorgan ismos como bacilos gram negativos , el cual termina con la excreción de ácido láctico.hace referencia a la obtención de energía (en forma de ATP) en ausencia de oxígeno, es decir, en anaerobiosis, y la fermentación láctica se refiere a la síntesis de ATP y a la excreción de ácido láctico en anaerob anaerobiosis, iosis, como productos del metabolismo de la glucosa.

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecer: r:

El grupo de bacterias coliformes incluye bacilos Gram negativos aerobios y anaerobios anaerobi os facultativos no esporulado esporuladoss de los géneros Escherichia,Kle Escherichia,Klebsiella bsiella y Enterobacter.

 

4. Agar Bilis-Esculina a) Objetivo del medio

Bile Esculin Agar (agar bilis esculina) es un medio para la identificación presuntiva de la especie Enterococcus,  los estreptococos del grupo Streptococcus bovis y estudios de fermentación de esculina por Yersinia b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Bilis de buey

40

Peptona de carne

5

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

Inhibidor de Gram positivos Fuente de carbono, nitrógeno y vitaminas del grupo B

Extractoo de carne Extract

3

Complemento vitamínico

Esculinaa Esculin

1

Componente diferencial

Citrato férrico

0.5

Componente diferencial

Agar

15

Agente solidificante solidific ante

pH del medio:

6.6 ± 0.2

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial, diferenci al, se considera un medio selectivo pues contiene bilis de buey que actúa como inhibidor, inhibido r, además la esculina y el citrato ayudan a diferenciar distintas especies.

 

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en e ell medio y condicio nes de incub ación

Suspender 64,5 gramos de medio litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver completamente. Dispensar en recipientes adecuados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Un sobrecalentamiento sobrecalentamien to puede causar un oscurecimiento del medio. Si se usan tubos, enfriarlos en posición inclinada. Condiciones de incubación: (35±2 ºC /18-24 h).

 

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

Las peptonas son polipéptidos formados durante la degradación enzimática de proteínas. Contienen aminoácidos libres y cadenas cortas de péptidos. Debido a que la fuente de carbono son peptonas, entonces ocurre una descarboxilación de aminoácidos para la obtención de carbono. La descarboxilación de los aminoácidos se hace por acción de una descarboxilasa específica para cada aminoácido dando origen a la respectiva amina y liberando CO2 .

Los estreptococos del grupo D y también para los generos de Aerococcus y Listeria, crecen rápidamente en el agar bilis esculinaya que todos estos microorganismos pueden tolerar la concentración de bilis presente en el medio de cultivo e hidrolizar la esculina, que en presencia de iones hierro forman un compuesto de color verde oliva hasta negro.

Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis, pueden desarrollar en este medio de cultivo, originando colonias muy pequeñas (menores a 1mm), de color grisáceo, debido a que no hidrolizan la esculina f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Enterococcus

faecalis,

Enterococcus

faecium,

Staphylococcus

Staphylococcus epidermidis, Yersinia enterocolitica, Enterococcus faecalis

aureus,

 

5. Agar Czapek-Dox a) Objetivo del medio:

Czapek Dox Agar es un medio para el cultivo de hongos y bacterias capaces de asimilar nitrógeno inorgánico.Czapek Dox Agar está recomendado por la APHA para el aislamiento de Aspergillus, A spergillus, Penicillium, Paecilomyces y otros hongos similares que presentan el característico micelio y conidias. Las únicas bacterias capaces de crecer en este medio son las no exigentes presentes en el suelo. b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

Sacarosa

30.0

Carbono

aporta nutrientes

nitrato sódico

2.0

nitrógeno

aporta nutrientes

dipotasio fosfato

1.0

fósforo y potasio

agente tampón

sulfato magnesio

0.5

magnesio y azufre

aporta iones esenciales

cloruro potásico

0.5

potasio

aporta iones esenciales

sulfato ferroso

0.01

hierro y azufre

aporta iones esenciales

Agar

15.0

pH del medio:

agente gelificante

7.3 ± 0.2 a 25°C

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación clasifica ción :

es un medio de cultivo definido puesto que componentes como sulfato de magnesio y el sulfato ferroso que aportan minerales y iones esenciales que son óptimos para el crecimiento de hongos además el pH del medio favorece el crecimiento crecimien to de hongos ya que Su pH es de alrededor de 7.3 lo que impide el crecimiento de muchas bacterias.

 

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

condiciones de incubación: Sembrar en superficie 0,1 ml de muestra y su serie de diluciones decimales. Incubar Incubar 1-2 semanas a 15-25 ºC aproximadamente. A demás que la acidez del medio puede aumentar hasta pH 3.5 ± 0.2 por el cultivo de organismos acidófilos, como las levaduras, añadiendo 10 ml de ácido láctico al 10% por litro.

e) Fundamento Fundamento bioq uímico:

Los microorganismos en este medio siguen la glucólisis que es la ruta metabólica encargada de oxidar la glucosa que se encuentra en la sacarosa que posee el medio de cultivo con la finalidad de obtener energía para la célula. Durant Durantee la glucólisis se obtiene un rendimiento neto de dos moléculas de ATP; el ATP puede ser usado como fuente de energía para realizar trabajo metabólico.

 

 

Ejemplo Eje mplo de microrg anismos que pueden crece crecer: r:

Aspergillus, Penicillium, Penicillium, Paecilomyces y otros hongos similares que presentan el característico micelio y conidias.

 

6. Agar Dextrosa Sabouraud

 

a) Objetivo del medio

Se puede utilizar para cultivar levaduras, mohos (como hongos patógenos, particularmente aquellos asociados con infecciones de la piel) y microorganismos acidúricos. Este medio también se usa para determinar el contenido microbiano y fúngico de los cosméticos y para la evaluación micológica de los alimentos. b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Mezcla de digerido 10 péptico de tejido animal y pancreático de

Fuente de nitrógeno,

caseína (1:1)

esenciales

Dextrosa

40

Agar

15

pH del medio:

Funci Función ón especial

vitaminas, minerales y aminoácidos

Fuente de carbono Agente solidificante solidifican te

5,6 ± 0,2

Vire Indicador:

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación Enriquecido , esto se puede observar ya que no cuenta con inhibidores de

crecimiento y sus componentes favorecen el crecimiento de hongos, Un bajo pH (de 5,6 aproximadamente) favorece el crecimiento de hongos, en especial los dermatofitos, La selectividad del medio se debe exclusivamente al pH ácido (5,6), que inhibe parcialmente el crecimiento de bacterias.

 

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condici ones de incub ación

» Para diagnóstico clínico, el tipo de muestras son todos los tipos de muestras (cabello, piel, uñas, etc...). Si las muestras están formadas por raspados de piel, cabello o uñas, colocar el material en el centro de la superficie del medio. - Incubar en condiciones aeróbicas a 30±2 °C durante 18-48 horas y hasta 7 días si fuera necesario

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

La dextrosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía (Dextrosa es un nombre alternativo para denominar a la D-glucosa. Un monosacárido con forma química C6H12O6), por lo que su vía metabólica en la glucolisis

 

 

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Candida albicans, Epidermophyton floccosum, Trichophyton schoenleinii, T. violaceum, Microsporum audounii, Microsporum canis var distortum, Microsporum gypseum, Microsporum gallinae, Zymonema farciminosum, Sporothrix schenkii e Histoplasma capsulatum

 

7. Agar Eosina y Azul de metileno  a) Objetivo del medio:

es un medio diferencial, utilizado para el aislamiento de Enterobacterias.El uso de eosina y azul de metileno permite la diferenciación entre organismos fermentadores de lactosa y no fermentadores. Es ampliamente utilizado en bacteriología bacteriolo gía médica, en técnicas recomend recomendadas adas por APHA y para la detección y enumeración de coliformes, contaminantes de alimentos y agua potable. b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

agar

10.0

agente gelificante

fosfato dipotásico

2.0

agente tampón

lactosa

5.0

carbohidrato

agente diferenciador

Sacarosa

5.0

carbohidrato carbohidratoss

agente fermentador

peptona

10.0

nitrógeno,vi nitrógeno,vitaminas, taminas,

aporta nutrientes

minerales. eosina

4.0

agente inhibidor

azul de metileno

0.065

indicador de pH

pH del medio:

7,2±0,2 a 25C°

Vire Indicador:

La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo,está dada por el azul de metileno;Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro oscu ro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. También, pueden crecer especies de Candida y se observan como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en

 

profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp.crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes,mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas Clasifi Cla sifi cación del medio y por qu é se le atribuye e esta sta clasific ación

es un medio diferencial debido a que posee sacarosa y lactosa ya que La sacarosa se agrega a la lactosa como un carbohidrato fermentable para detectar M.O que fermentan la sacarosa más fácilmente que la lactosa.haciendo de este un medio diferencial además los colorantes eosin Y y el azul de metileno actúan como inhibidores de crecimiento c) Imá Imágene genes s de crecimiento de los mic roorg anismo s en el medio y condicio nes de incub ación

condiciones de incubación: - Inocular una placa Agar EMB y hacer estrías permitiendo el desarrollo de colonias aisladas. - Incubar a 35±2 °Cdurante 48 horas observar a las 24 horas y de nuevo a las 48 horas.

d) Fundamento Fundamento bioqu ímico:

La sacarosa se agrega a la lactosa como un carbohidrato fermentable para microorganismos que fermentan la sacarosa más fácilmente que la lactosa.siguiendo la ruta de la fermentación láctica que ocurre en la matriz citoplásmica de la célula, en la cual se fermenta la glucosa (se oxida

 

parcialmente), para obtener energía metabólica y un producto de desecho que principalmente principalme nte es el ácido láctico . Además de otros ácidos. Se trata de un proceso biológico en el que los azúcares presentes en el medio (generalmente monosacáridos monosacári dos como son la glucosa), se transforman en ácido láctico.

e) Ejemplo de microrg anismos que puede pueden n crecer:

Bacilos entéricos Gram negativos,Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter aerogenes , Escherichia Escherichi a coli

 

8. Agar Infusión Cerebro- Corazón a) Objetivo del medio

Agar Infusión Cerebro Corazón (Agar ICC/BHI) es un medio sólido rico en nutrientes, adecuado para el cultivo de varias variedades exigentes de bacterias, hongos y levaduras. Se utiliza para el cultivo de una gran variedad de microorganismos microorgan ismos exigentes como estreptococos, meningococos y neumococos b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Infusión de cerebro de ternera

7.5

Fuente de carbono, azufre, y vitaminas

Infusión de corazón de vaca

10

Fuente de carbono, aminoácidos y vitaminas

Mezcla de peptona

10

Fuentes de nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos

Cloruro sódico

5

Funci Función ón especial

Mantiene

el

equilibrio

osmótico Glucosa

2

Fuente de carbono

Fosfato disódico

2.5

Se utiliza como tampón

Agar

15

Agente solidificante solidific ante

pH del medio:

pH 7,4 ± 0,2 *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

 

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Medio de cultivo enriquecido, mejora la calidad nutritiva pues tiene componentes como infusiones de tejido u órganos. Utilizados para microorganismos exigentes d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los microo rganismos en e ell medio y condicio nes de incub ación

Condiciones de incubación: (35±2 °C, 5-10% CO2 / 24-72 h).

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

Los microorganismos en este medio siguen la glucólisis como ruta metabólica oxidando la glucosa que posee el medio de cultivo con la finalidad de obtener energía. Al degradar la glucosa se obtienen dos moléculas de piruvato, energía en forma de ATP y de NADH

 

  f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Neisseria

meningitidis,

Aspergillus

brasiliensis,

Streptococcus pneumoniae, Saccharomyces cerevisiae

Streptococcus

pyogenes,

 

9. Agar Mac Conkey: a) Objetivo del medio

,Agar Macconkey se utiliza para el aislamiento selectivo y la identificación de Enterobacteriaceae de las heces, la orina, aguas residuales y alimentos.También es un medio selectivo y diferencial para el aislamiento de bacterias Gram-negativa Gram-negativass entéricas b) Tabla de compo componentes nentes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

agar bacteriano

15

agente gelificante

cristal violeta

0.01

agente selectivo

lactosa

10

Carbono

aporta nutrientes

mezcla de

3

nitrógeno,fósforo,

aporta nutrientes

minerales

peptona sales biliares

1.5

peptona gelatina

17

agente selectivo aminoácidos

aporta nutrientes

vitaminas rojo neutro

0.03

cloruro sódico

5

pH del medio:

indicador de pH electrolitos esenciales agente selectivo y aporta nutrientes

pH 7,1 ± 0,2 * Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimien

 

Vire Indicador:

El rojo neutro es el ind icador d e pH. pH. cuando se fermenta la lactosa, el el p H del del medio dism inuye, cambiando cambiando el colo r de rojo neutro a amarill amarill o.

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

se considera un medio selectivo puesto que en e n su formulación conti contiene ene colorantes como cristal violeta así mismo contiene cloruro sódico que igualmente funge como agente selectivo ya que inhibe el crecimiento de bacterias que no son de interés así mismo también es un medio diferencial ya que contiene indicador rojo neutro el cual cambia con el crecimiento de determinados determina dos microorgani microorganismos. smos. d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condic iones de incub ación.

*Incubar a 32,5±2,5 ° C durante al menos 20 horas (máximo 72 h) *A partir del caldo de enriquecimiento, se inocula Agar Macconkey para obtener colonias aisladas. Incubar a 32,5±2,5 °C durante al menos 24 horas (máximo 48 h) *A partir del caldo Shigella, sembrar Agar Macconkey y Agar Entérico Hektoen. Incubar a una temperatura de 37±1 ºC durante 20-24 horas

 

e) Fundamento Fundamento bioqu ímico:

La lactosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía.Por cada molécula de glucosa que se oxida mediante glucólisis dos moléculas de NAD son reducidas a NADH, y se obtienen dos piruvatos y dos moléculas de ATP. En los organismos fermentadores, dada la imposibilidad de utilizar el poder reductor generado en forma de NADH en la cadena transportadora de electrones, se recurre a la reducción de un sustrato endógeno (esto es, un producto del propio metabolismo), como forma de reciclar el NADH en NAD para permitir que la glucólisis continúe y se siga genera generando ndo ATP. En la fermentación láctica, el sustrato endógeno utilizado es el propio piruvato producto de la glucólisis, que se reduce a ácido láctico.

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Enterobacter aerogenes , Salmonella enteritidis,Shigella enteritidis,Shigella dysenteriae, Escherichia coli y Proteus vulgaris

 

10. Agar MRS a) Objetivo del medio

Agar MRS es un medio selectivo, basado en la formulación desarrollada por Man, Rogosa y Sharpe. Proporciona los nutrientes para un buen crecimiento de lactobacilos en general, pero en especial de aquellas cepas que presentan un crecimiento deficiente en otros medios existentes previamente como L. brevis y L. fermenti. El medio es apto para el crecimiento de bacterias del ácido láctico, incluidos Lactobacillus, Lactobacillu s, Pediococcus y Leuconostoc Leuconostoc b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Agar

10

Dextrosa

20

Sulfato magnésico 0.2

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

Agente solidificante solidifican te Carbono Fuentes de iones y sulfato

Extracto de carne

8

Nitrógeno, vitaminas, minerales

y

aminoácidos Tween 80

1

Emulsionante

Citrato amónico

2

Inhibidor

Peptona

10

bacteriológica

Nitrógeno, vitaminas, minerales

y

aminoácidos Fosfato dipotásico 2 Sulfato de manganeso

0.05

Buffer fuentes de iones y sulfato

 

Acetato de sodio

5

Extracto de

4

levadura pH del medio:

Buffer Vitaminas Vitaminas,, del grupo B

6,2 ± 0,2

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Agar MRS es un medio selectivo pues el citrato de amonio, a un pH bajo, inhibe la mayoría de los microorganismos, pero permite el crecimiento de Lactobacilli. d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

Condiciones de incubación: (30±1 ºC / 72±3 h). Incubar las placas en 5% de CO2 a 35 °C durante 3 días o a 30 °C durante 5 días

 

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

La dextrosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía (Dextrosa es un nombre alternativo para denominar a la D-glucosa. D -glucosa. Un monosacárido con forma química C6H12O6), por lo que su vía metabólica en la glucolisis

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Lactobacillus brevis, Lactobacillus acidophilus, acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus lactis, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus

jugurti,

Lactobacillus

bulgaricus,

Lactobacillus

leichmannii,

Lactobacillus del brueckii, Lactobacillus salivarius, Pediococcus damnosus

 

11. Agar Mueller Hinton a) Objetivo del medio

El medio de cultivo Mueller-Hinton es un medio líquido nutritivo utilizado para el estudio de la sensibilidad de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas frente a agentes antimicrobianos. Se utiliza como medio de cultivo para efectuar la técnica de antibiograma con el método de dilución o como medio básico para preparar un inóculo bacteriano. b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

infusión de buey 2.0

nitrógeno , fósforo y aporta nutrientes

deshidratada

carbono

hidrolizado

17.5

caseína

aporta nutrientes

aminoácidos

almidón

1.5

agar

17

pH del medio:

nitrógeno

cationes y vitaminas

aporta nutrientes agente gelificante

pH 7,3 +/- 0,2 *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

es un medio nutritivo puesto que contiene hidrolizado de caseína , almidón e infusión de buey deshidratada los cuales aportan gran cantidad nutrientes que en condiciones favorables de pH y temperatura permiten el crecimiento de bacterias aerobias aerobias y anaerobias anaerobias facultativas así mismo, el medio de cultivo Mueller-Hinton Mueller-Hinto n tiene una baja concentración de timina y timidina, y se controla

 

la concentración de calcio y magnesio. Esta formulación permite garantizar garantizar la exactitud lo que significa que prácticamente todos los microorganismos cultivados crecerán en su superficie. Por otra parte, es un agar suelto, lo que permite una mejor difusión de los antibióticos (a diferencia de en otros medios con mayor proporción de agar), por lo que se observarán las zonas de inhibición verdaderas. Además, contiene almidón, que absorberá las toxinas liberadas por las propias bacterias, de modo que no interfie interfieran ran con los antibiótico antibióticos. s.

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los micro organismos en el el medio y condicio nes de incub ación

*16  – 18 h, 35± 35±2 2 °°C Ce en n co nd ndic icio iones nes asépticas *16  – 20 h, 35± 35±1 1 °°C Ce en n co nd ndic icio iones nes asépticas

e) Fundamento Fundamento bioqu ímico:

la fuente de energía en este caso es el almidón el cual, es una macromolécula que está compuesta por dos polímeros distintos de glucosa, la amilosa (en proporción del 25 %) y la amilopectina (75 %).Por lo que la mayoría de las bacterias crecen en este medio degradando los polímeros de glucosa por medio de la ruta metabólica de la glucólisis que es la ruta metabólica encargada de oxidar la glucosa con la finalidad de obtener energía para la célula. Consiste en 10 reacciones enzimáticas enzimáticas consecutivas que convierten a la glucosa en dos moléculas de piruvato, el cual es capaz de seguir otras vías metabólicas y así continuar entregando energía al organismo. Esta ruta se realiza tanto en ausencia como presencia de oxígeno, definido como proceso anaeróbico Durante la

 

glucólisis se obtiene un rendimiento neto de dos moléculas de ATP; el ATP puede ser usado como fuente de energía para realizar trabajo metabólico, mientras que el NADH puede tener diferentes destinos.

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Escherichia coli , Enterococcus faecalis , Staphylococcus aureus ,Pseudomonas aeruginosa

 

12. Agar Nutritivo a) Objetivo del medio

El agar nutritivo es un medio adecuado para el cultivo y enumeración de bacterias exigentes. La adición de sangre, fluido de ascitis o suero lo hace también adecuado para cultivar estreptococos, neumococos y otros microorganismos. Se emplea para la enumeración y el aislamiento de bacterias, y también como una base de alto grado para preparar medios de cultivo especiales. b) Tabla de compon entes Componentes Compo nentes

Agar

(g/L)

Fte. Nutri entes

12

Funci Función ón especial

Agente solidificante solidificante

bacteriológico Peptona

15

Nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos

Extracto de

3

Vitaminas

Dextrosa

1

Carbono

Cloruro sódico

6

Electrolitos

levadura

esenciales

para el transporte y el equilibrio osmótico. pH del medio:

7,5 ± 0,2

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Es un medio complejo pues algunos de los componentes como son la peptona y el extracto de levadura tienen una composición química exacta desconocida, sin embargo a este agar se le puede adicionar de sangre, fluido de ascitis o suero haciéndolo un medio enriquecido

 

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

- Incubar las placas de petri aeróbicamente a 35 ± 2ºC durante 18-24 horas.

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

La dextrosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía (Dextrosa es un nombre alternativo para denominar a la D-glucosa) por lo que su vía metabólica en la glucólisis, ruta metabólica mediante la que se degrada la glucosa hasta dos moléculas de piruvato, a la vez que se produce energía energía en for forma ma de ATP y de NADH, posteri posteriormente ormente se degradara al piruvato obteniéndose un pH ácido en el cultivo  

 

 

a) Ejemplo de micr organismos que puede pueden n cr ece ecerr Shigella flexneri, Streptococcus pyogenes, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Staphylococcus aureus 

 

13. Agar Papa Dextrosa a) Objetivo del medio:

El Agar Dextrosa y Patata está recomendado por APHA y FDA para cultivar levaduras y mohos. También se puede usar en la identificación de hongos y levaduras en paralelo con su morfología celular, o en métodos de microcultivo en portaobjetos. b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Agar

15

dextrosa

20

infusión de papa

4 fuente de almidones pH 5.6 ± 0.2

pH del medio:

Funci Función ón especial

agente gelificante carbono y glucosa

aporta nutrientes aporta nutrientes

Clasifi Cla sifi cación del medio y po r qué se le atribu atribu ye e esta sta clasificación :

Es un medio de cultivo definido para fines generales ya que contiene dextrosa e infusión de papa lo que hace que muchos tipos de microrganismos crezcan en este medio c) Imá Imágene genes s de crecimiento de los mic roorg anismo s en e ell medio y condicio nes de incub ación

Cuando se va a usar para el recuento de hongos y levaduras, agregar al medio de cultivo una vez esterilizado y enfriado aproximadamente a 45ºC, 14 ml de una solución estéril de ácido tartárico al 10% para obtener un pH aproximado de 3.5. Sembrar el medio de cultivo por estría en la superficie o adicionar la muestra para la técnica de vaciado en en placa. Incubar hasta 7 días a 35 grados .

 

 

d) Fundamento Fundamento bioqu ímico:

La dextrosa se metaboliza de la misma forma que la glucosa, vía ácido pirúvico o ácido láctico dando lugar a dióxido de carbono y agua, con la consiguiente liberación de energía. Es el producto final de la glucólisis, una ruta metabólica universal en la que la glucosa se escinde en dos moléculas de piruvato y se origina energía (2 moléculas de ATP). En esta vía, el piruvato se reduce, permitiendo regenerar las moléculas de NAD + consumidas en los procesos anteriores. anteriores.

e) Ejemplo de microrg anismos que puede pueden n cr ece ecer: r: Candida albicans , Saccharomyces cerevisiae , Trichophyton mentagrophytes y  Aspergillus niger

 

 

14. Agar Sal y Manitol a) Objetivo del medio

Agar Sal y Manitol (MSA) (Medio Chapman) es un medio selectivo preparado según las recomendaciones de Chapman para el aislamiento de presuntos estafilococos patógenos. La mayoría de las otras bacterias están inhibidas por la alta concentración de cloruro sódico. b) Tabla de compon entes Compon entes

Agar

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

15

Agente solidificante solidifican te

bacteriológico Extracto de carne

1

Nitrógeno, vitaminas, minerales

y

aminoácidos Digerido

péptico 5

de tejido animal

Nitrógeno, vitaminas, minerales

y

aminoácidos Cloruro sódico

75

Inhibidor

Electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico

D-manitol

10

Carbono

Digerido

5

Nitrógeno, vitaminas,

pancreático

de

minerales

caseína Rojo fenol

y

aminoácidos 0.025

Indicador de pH

 

pH del medio:

7,4±0,2

Vire Indicador:

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Es un medio selectivo y diferencial pues cuenta con un inhibidor el cual es el cloruro de sodio, y tiene un indicador de pH el cual es el rojo fenol que vira de amarillo 6.8 a rojo 8.4 

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

Incubar a una temperatura de 35±2 ºC durante 18-24 horas, y después de 48 horas.

 

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

La degradación del manitol por bacterias produce productos ácidos que cambian el color del medio de rosa a amarillo. El manitol luego se oxidará a fructosa por MTD utilizando el NADP+ como cofactor. Finalmente, la fructosa sería fosforilada a fructosa-6-fosfato por una hexoquinasa. Después la fructosa se integrará a la vía metabólica de de la glucosa

 

  f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Staphylococcus epidermidis, Enterobacter aerogenes, Staphylococcus aureus,

 

15. Agar Salmonella-Shigella a) Objetivo del medio

Es un medio selectivo y de diferenciación para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos, en especial los pertenecientes al género Salmonella, a partir de muestras clínicas.El agar Salmonella-Shigella es una modificación del agar citrato desoxicolato.Se le considera un medio moderadamente selectivo según el nivel de inhibición de los microorganismos gram positivos y Enterobacteriaceae diferentes de Salmonella y Shigella,que inhibe por contenido de sales biliares, verde brillante y citratos. b) Tabla de compo componentes nentes Compon entes

extracto de carne

(g/L)

5.0

Fte. Nutrientes Nutri entes

nitrógeno,fós nitrógeno,fósforo, foro,

Funci Función ón especial

aporta nutrientes

azufre digerido

2.5

aminoácidos

pancreático

esenciales

caseína

vitaminas

lactosa

2.5

carbono

aporta nutrientes

aporta nutrientes y permite la fermentación

sales biliares

10

agente inhibidor

citrato sódico

8.5

agente inhibidor

tiosulfato sódico

8.5

permite la formación de SH2

citrato férrico

8.5

permiten la detección de producción

de

sulfhídrico rojo neutro

0.025

indicador de pH

ácido

 

agar

13.25

agente gelificante

verde brillante

0.330

agente inhibidor

pH del medio:

pH 7,2 ± 0,2 *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

Vire Indicador:

Los organismos que fermentan lactosa producen ácido que, en presencia del indicador rojo neutro, propicia la formación de colonias de color rojo. Los organismos no fermentadores de lactosa forman colonias incoloras. Este último grupo incluye la mayoría de los patógenos intestinales c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

este medio de cultivo funge como un medio selectivo ya que al estar presentes ingredientes como sales biliares y colorantes como verde brillante además de fuentes de carbono como lactosa harán que solo los microorganismos que se adaptan a estos ingredientes y que fermentan lactosa en presencia del indicador rojo neutro, propiciarán la formación de colonias mientras que los organismos no fermentadores fermentad ores de lactosa forman colonias incoloras.

 

 

d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

Incubar las placas, protegidas de la luz, a una temperatura de 35 ± 2 °C durante un período de 18 a 24 horas o durante más tiempo si es necesario.

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

La lactosa, al fermentar, produce energía que es aprovechada por las bacterias y el ácido láctico es eliminado.mediante eliminado.mediante un pr proceso oceso de síntesis de ATP en ausencia de oxígeno el cual termina con la excreción de ácido láctico. La fermentación fermentación ácido-láctica comienza con una célula (bacteriana o muscular) consumiendo glucosa o de algún tipo de azúcar o carbohidrato relacionado. Este “consumo” se da a través de la glucólisis.Inicialment glucólisis.Inicialmentee se invierten 2 ATP por cada molécula de glucosa consumida, pues esta es fosforilada por la enzima hexoquinasa para rendir glucosa 6-fosfato, que es isomerizada a fructosa 6-fosfato (enzima glucosa 6-P isomerasa) y vuelta a fosforilar a fructosa 1,6-bifosfato (enzima fosfofructoquinasa).

 

 

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecer: r:

E. coli ,Enterobacter/Klebsiella ,Proteus,Salmonella ,Shigella ,Pseudomonas

 

16. Agar Sangre a) Objetivo del medio

Base de Agar Sangre se utiliza para el aislamiento, cultivo y detección de las reacciones hemolíticas de microorganismos fastidiosos. Es adecuado para el aislamiento y cultivo de una amplia variedad de microorganismos con difíciles características de crecimiento. Al añadir la sangre se puede emplear para determinar reacciones hemolíticas. La adición de sangre proporciona factores de crecimiento extra para microorganismos fastidiosos y es la base para determinar las reacciones hemolíticas. Los patrones hemolíticos pueden variar con el tipo de sangre o la base de medio utilizado. Por ejemplo, la sangre desfibrinada de oveja da mejores resultados para estreptococos del grupo A b) Tabla de compon entes Compon entes

Agar

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

15

Agente solidificante solidifican te

bacteriológico Peptona de carne

10

Carbono, nitrógeno, vitaminas, minerales

Infusión

de 10

corazón

y aminoácidos Nitrógeno, vitaminas, minerales

y

aminoácidos Cloruro sódico

5

Electrolitos esenciales para el transporte

y

balance osmótico pH del medio:

7,3±0,2

el

 

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Agar enriquecido, pues tiene sangre para microorganismos exigentes d) Imáge Imágenes nes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

- Incubar a 35±2 °C durante 24-48 horas.

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

Las peptonas son la fuente de carbono utilizada en este medio, son polipéptidos formados durante la degradación enzimática de proteínas. Contienen aminoácidos libres y cadenas cortas de péptidos. Primero debe hidrolizar la peptona para obterner aminoácidos, entonces ocurre una descarbox descarboxilación ilación de aminoácidos para la obtención de carbono. La descarboxilación descarboxilaci ón de los aminoácidos se hace por acción de una descarboxilasa específica para cada aminoácido dando origen a la respectiva amina y liberando CO2.

 

  f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr Staphylococcus epidermidis, Neisseria meningitidis, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae

17. Agar Soya-Tripticasa a) Objetivo del medio:

Es un medio de crecimiento de uso general preparado con o sin sangre o enriquecimientos. Se utiliza para el aislamiento de diferentes cepas de microorganismos microorgan ismos aerobios, y anaerobio anaerobioss facultativos y estrictos. Al ser suplementado suplementa do con sangre permite el crecimiento de microorgan microorganismos ismos exigentes y la clara visualización de reacciones de hemólisis. Se usa para el mantenimiento de cultivos de referencia, recuento en placa, aislamiento de microorganismos a partir de una variedad de tipos de muestras y como base para los medios que contienen sangre. Se incluye en los compendios de métodos para el análisis de agua, aguas residuales y alimentos b) Tabla de compon entes Compon entes

digerido

(g/L)

15.0

Fte. Nutrientes Nutri entes

nitrógeno

Funci Función ón especial

orgánico, aporta nutrientes

pancreático

aminoácidos

caseína

péptidos de cadena

y

larga digerido

papaico 5.0

harina de soya

nitrógeno y carbono

aporta nutrientes

 

cloruro sódico

5.0

agar

15.0

pH del medio:

iones esenciales

aporta nutrientes agente gelificante

pH 7,2 ± 0,2 *Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación clasifica ción :

Es un medio para fines generales ya que debido a los digeridos de caseína y de soya, aporta los requerimientos nutricionales como fuente de carbono y nitrógeno permite el crecimiento y aislamiento de diferentes cepas de microorganis microorganismos mos aerobios, y anaerobios facultativos facultativos y estrictos y la clara visualización de reacciones de hemólisis. d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

Dado que muchos patógenos requieren dióxido de carbono para su aislamiento primario, las placas pueden incubarse en una atmósfera con aproximadamente 3  – 10% de CO2 e incubar las placas a 35 ± 2 °C durante 18 – 24 h. Incubar los tubos con las tapas flojas a 35 ± 2 °C en atmósfera aerobia. Examinar los tubos después de 18 – 24 h y 42 – 48 h

 

e) Fundamento Fundamento bioqu ímico:

Debido a que la fuente de carbono son peptonas, entonces ocurre una descarboxilación de aminoácidos para la obtención de carbono. La descarboxilación descarboxila ción de los aminoácido aminoácidoss se hace por acción de una descarboxilasa específica para cada aminoácido dando origen a la respectiva amina y liberando CO2.

f) Eje Ejemplo mplo de micror ganismos que puede pueden n crece crecerr

shigella flexneri , Escherichia coli ,Streptococcu ,Streptococcuss pneumoniae y Streptococcus pyogenes

 

18. Agar Verde-Brillante  a) Objetivo del medio

El Agar Verde Brillante B rillante (BGA) se utiliza para el aislamiento selectivo de Salmonella spp, distinto a S. typhi, en alimentos y muestras clínicas, a través de la fermentación de la lactosa/sacarosa lactosa/sacarosa b) Tabla de compon entes Compon entes

(g/L)

Fte. Nutrientes Nutri entes

Funci Función ón especial

Agar

Agente solidificante. solidificante.

Lactosa

Carbono

Verde brillante

Inhibidor

Peptona

Carbono,

nitrógeno,

vitaminas, minerales y aminoácidos Cloruro sódico

Electrolitos esenciales para el transporte

y

equilibrio osmótico. Rojo fenol

Indicador de pH

Sacarosa

Carbono

Extracto

de

Vitaminas

levadura pH del medio:

6,9±0,2

el

 

Vire Indicador: Indicador: Rojo fenol

c) Cla Clasifi sifi cación del medio y por qué se le atribuye e esta sta clasificación

Es un medio selectivo pues tiene Verde brillante un inhibidor de bacterias Gram positivas y la mayoría de bacilos Gram negativos, excepto Salmonella spp, la cual es la bacteria que se puede sembrar en este medio d) Imágenes Imágenes de crecimiento de los m icroor ganismos en el medio y condicio nes de incub ación

- Incubar a 35±2 ºC durante 18-24 horas.

 

e) Fundamento Fundamento bioq uímico

El principal microorganismo cultivado en este medio son las bacterias del género Salmonella, las cuales no fermentan sacarosa o lactosa, por lo que ocupan a las peptonas como fuente de carbono, Las peptonas contienen aminoácidos libres y cadenas cortas de péptidos. Con ellas ocurre una descarboxilación de aminoácidos para la obtención de carbono. La descarboxilación de los aminoácidos se hace por acción de una descarboxilasa específica para cada aminoácido dando origen a la respectiva amina y liberando CO2. Con esto se obtiene un pH alcalino en el medio.

La lactosa en la principal fuente de carbono, la cual se degradará a glucosa y galactosa que posteriormente se incorporarán a la vía metabólica de la glucólisis.

El rojo fenol es el indicador de pH, convirtiendo el medio en un color amarillo con la formación de ácido como resultado de la fermentación de lactosa/sacarosa. Sin embargo los fermentadores de lactosa/sacarosa son generalmente inhibidos. Ejemplo Eje mplo de microrg anismos que pueden crece crecerr Salmonella bongori, Salmonella enterica, Salmonella choleraesuis, Salmonella enteritidis, Salmonella nyanza, Salmonella virginia, Salmonella typhi  (crecimiento moderado), Escherichia coli (crecimiento moderado)

 

TABLA RESUMEN Nombre del medio d e

Para qué tipo de

cultivo

m.o. se utiliza

1. Agar Baird Parker

Ejemplos de m .o.

Gram Gram pos itiva

Staphylococcus aureus

Levaduras

C. albicans, C. tropicalis, C.

2. Agar Biggy

krusei y C. kefyr, Gram negativos  

Bacilos Gram negativos aerobios y anaerobios anaerobios facultativos no esporulados de los géneros: Escherichia, Klebsiella y Enterobacter

3. Agar Bilis y Rojo Violeta Bacterias gram (+)

Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus,

4. Agar Bilis-Esculina

Staphylococcus epidermidis, Hongos y bacteria bacterias s  Aspergillus, Penicillium, Gram Gra m posit ivas

Paecilomyces y otros hongos similares que presentan el característico micelio y conidias. 

5. Agar Czapek-Dox Hongos

Candida albicans,

filamentosos y

Epidermophyton floccosum,

levaduras

6. Agar Dextrosa Sabouraud

violaceum Bacterias gram

7. Agar Eosina y Azul de metileno

Trichophyton schoenleinii, T.

Negativas

Bacilos entéricos Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter aerogenes Escherichia coli

 

Bacterias, hongos y Neisseria meningitidis, levaduras  Aspergillus brasiliensis, Streptococcus pyogenes,

8. Agar Infusión Cerebro-

Streptococcus pneumoniae,

Corazón

Saccharomyces cerevisiae Gram Negativas

Enterobacter aerogenes , Salmonella enteritidis,Shigella dysenteriae, Escherichia coli y Proteus vulgaris

Bacterias gram (+)

Lactobacillus brevis,

9. Agar Mac Conkey

Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei,

10. Agar MRS

Lactobacillus fermentum Bacterias Gram Negativas

Escherichia coli , Enterococcus faecalis , Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa 

Bacterias g ram (+)

Shigella flexneri, Streptococcus

Bacterias g ram (-)

pyogenes, Listeria

11. Agar Mueller Hinton

monocytogenes, Escherichia

12. Agar Nutritivo

coli, Staphylococcus aureus Hongos, Moho Moho y

Candida albicans ,

levaduras

Saccharomyces cerevisiae , Trichophyton mentagrophytes y  Aspergillus niger  

13. Agar Papa Dextrosa Bacterias g ram (+)

14. Agar Sal y Manitol

15. Agar SalmonellaShigella

Bacterias g ram (-)

Staphylococcus epidermidis, Enterobacter aerogenes, Staphylococcus aureus,

Bacterias Gram

E. coli Enterobacter/Klebsiella

Negativas

Proteus,Salmonella ,Shigella Pseudomonas

 

Bacterias g ram (+)

Staphylococcus epidermidis,

Bacterias gr am (-) (-) 

Neisseria meningitidis, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae 

16. Agar Sangre Bacterias Gram

Shigella flexneri, Escherichia

Negativas

coli,Streptococcus pneumoniae y Streptococcus pyogenes 

17. Agar Soya-Triptica Soya-Tripticasa sa Bacterias gr am (-) (-) 

Salmonella bongori, Salmonella enterica, Salmonella choleraesuis, Salmonella enteritidis, Salmonella nyanza,

18. Agar Verde-Brillante

Salmonella virginia,