Cara Pengujian Pirogen Dan Endotoksin

 





Pirogen berasal dari kata  pyro yang artinya keadaan yang berhubungan dengan panas, Gen yang artinya membentuk atau menghasilkan. Pirogen adalah suatu produk mikroorganisme, terutama dari bakteri gram negatif dan dapat berupa endotoksin dari bakteri ini.

Berasal dari membran sel bakteri gram negatif



 Pengujian ini pada prinsipnya merupakan injeksi intravena di bagian telingga kelinci pada suhu dan kondisi tertentu dan selanjutnya dipantau dicatat temperatur 3 kelinci dalam jangka waktu tertentu



suatu sediaan dinyatakan memenuhi syarat,  jika kenaikan suhu ketiga kelinci tidak melebihi batas tertentu; dan tidak memenuhi syarat jikatotal kenaikan suhu ketiga kelinci melebihi batas tertentu





Jika respon yang terjadi terletak di antaranya, pengujian dapat diulangi menggunakan 3 kelompok kelinci yang lain. Apabila pengujian ke empat jumlah respon melebihi 6,60 oC, sediaan tersebut dinyatakan tidak memenuhi syarat.







Dikembangkan pada 1960’s by Drs. Bang and Levin Berdasarkan pada reaksi clotting darah horseshoe crab dengan endotoxin Lebih cepat, ekonomis, lebih sensitif dibanding uji pirogen menggunakan kelinci.

  

MetodeGel-Clot Metode kinetik turbidimetri Metode Kromogenik / Metode Colorimetric



Metode Original



The official “referee test”



Spesimen diinkubasi dgn LAL yang diketahui sesitivitasnya. Formasi gel clott postif untuk endotoxin.





Sebuah metode kinetik Spesimen diinkubasi dgn LAL bersamaan dengan kecepatan peningkatan dalam turbidimetri atau waktu pengambilan untuk mencapai turbiditas kemudian diukur dengan spektrofotometri dan dibandingkan dengan standar.



Endotoxin mengkatalisis aktivasi proenzim dalam LAL dimana akan mengikat substrat tidak berwarna menjadi endoproduk yang berwarna sehingga dapat diukur secara spektrofotometri dibanding kurva standar

 

 Depirogenasi Endotoksin dengan Inaktivasi Despirogenasi dengan Menghilangkan Endotoksin

       

Hidrolisis Asam Basa Oksidasi Alkilasi Perlakuan dengan panas kering. Perlakuan dengan panas lembab. Radiasi ionisasi. Poliniksin B LAL (Limolas Amobacyte Lisate)

     



Pembilasan. Destilasi Ultrafiltrasi Osmosa bolak balik Karbon aktif Daya tarik elektrosatik dengan jalan modifikasi media Daya tarik hidrofobik pada media hidrofobik