Caldo Rojo de Fenol

 

Fundamento: cald ldo o ro rojo jo de fe feno noll es us usad ado o pa para ra El ca

obse ob serv rvar ar la fe ferm rmen enta taci ción ón de al algú gún n

carbohidrato como puede ser maltosa, glucosa, sacarosa, lactosa, trealosa, etc. El caldo rojo de fenol solo lleva un carbohidrato a la vez. Base de Caldo Rojo Fenol es un medio sin carbohidratos agregados que se utiliza como base para la adición de los carbohidratos para determinar las reacciones de fermentación fermen tación de los microorganismos. microorganismos. Debe ser capaz de soport soportar ar el crecim crecimiento iento de organismos de prueba. La peptona de caseína proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento, y permite el crecimiento abundante de una amplia variedad de microorganismos exigentes. El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico. El rojo fenol es el indicador de pH. Vera recomendó usar peptona de caseína en los medios de ferme fermentació ntación, n, ya que descubrió que podría usarse con el indicador  de pH rojo fenol en las pruebas de fermentación con un alto grado de precisión. La Base de Caldo Rojo Fenol se utiliza para los estudios de fermentación de carbohidratos de muchos microorganismos. Los tubos de control de medio sin inocular deben estudiarse en paralelo con los tubos inoculados. Los tubos deben exam ex amin inar arse se co con n fr frec ecue uenc ncia ia po porq rque ue se ut util iliz izan an di dife fere rent ntes es ca carb rboh ohid idra rato tos s a velocidades variables. La Base de Caldo Rojo Fenol es un excelente sustrato para estreptococos, así como para otras bacterias menos exigentes. Para los anaerobios, el medio debe usarse el mismo día de la preparación. De lo contrario, el medio debe calentarse y enfriarse antes de su uso. El manitol es el carbohidrato fermentable, se manifiesta por un cambio de color del indicador el rojo de fenol que vira de rojo a amarillo. La detección de gas se observa por la formación de vacío o burbuja en la campana de Durham

 

Diagrama de fujo: PREPARACION:

 

NaOH

 

En un vaso de precipitado agregar14.2ml de NaOH.

Pesa 0.10g de rojo de enol y manitol

Agregar al vaso de precipitado con NaOH.

Completar con agua deslada hasta los 250ml.

 

Medir 14.2ml de NaOH.

Colocar los tubos en la autoclave para esterilizar esteriliz ar hasta la temperatura especíca y dejar enriar a 0 el manómetro

Calentar a ebullición para disolver el medio Almacenar o pasar a tubos de ensayo para su inoculación.

TOMA DE MUESTRA:

Rot Rotula ularr los los tub tubos os con echa de elab elabora oración ción y nombre del culvo

RESULTADOS

Calentar el asa en el mechero Calentar mechero.. Destapar Destapar el tubo de la muestra con una mano. Calentar la boquilla del tubo de la muestra.

Tomar Tom ar la muestr muestraa con el asa esteri esterililizad zadaa incl inclinand inando o la muestra. muestra. Volver a cale calentar ntar la supercie y cerrar la muestra. INOCULACIÓN DE LA MUESTRA:

Incubar a 35°C Incubar 35°C de 18 a 24horas.

Volver a posición inicial y la inoculación inoculación queda  justo debajo de la super supercie cie.. Ag Agita itarr con suavidad.

Inclinar el tubo 30° y el asa de inoculación con la muestra debe tocarr la supercie toca supercie interna del vidrio justo por arriba del punto donde don de la super supercie cie del cal caldo do orma un ángulo agudo