Buku Parasit Malaria

KATA PENGANTAR

Di Indonesia, malaria merupakan salah satu masalah kesehatan masyarakat yang mempengaruhi angka kematian bayi, anak umur dibawah lima tahun dan ibu melahirkan serta menurunkan produktifitas kerja. Angka kesakitan penyakit ini relatif masih cukup tinggi terutama dikawasan timur Indonesia. Malaria masih mengancam status kesehatan masyarakat terutama bagi masyarakat miskin yang hidup di daerah terpencil sehingga pemerintah menganggap penyakit malaria merupakan hal yang serius untuk ditangani. Upaya pengendalian penyakit malaria perlu kita tingkatkan terus antara lain dengan meningkatkan kemampuan dan ketrampilan para pelaksananya/tenaga mikroskopis terutama di Dati II dan tenaga lapangan (Puskesmas/Rumah Sakit/Unit Pelayanan Kesehatan). Buku pedoman Petunjuk Teknis Pemeriksaan Parasit Malaria ini disusun oleh Subdit Malaria dengan melibatkan para ahli dari berbagai instansi seperti Badan Litbangkes, Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia dengan maksud agar dapat dijadikan panduan untuk pemeriksaan parasit malaria di berbagai tingkat pelayanan kesehatan di Indonesia dalam upaya pengendalian penyakit malaria. Semoga buku pedoman ini bermanfaat bagi semua pihak yang terlibat pada pelayanan kesehatan masyarakat khususnya program pengendalian malaria di Indonesia. Saran-saran dan kritik terhadap buku ini sangat diharapkan guna lebih menyempurnakan edisi selanjutnya.

Direktur Jenderal PP & PL

Prof. Dr. Tjandra Yoga Aditama Sp.P(K), MARS, DTM&H, DTCE NIP 19550903 198012 1 001

DAFTAR ISI Kata Pengantar I.

PENDAHULUAN.......................................................................................... A. Latar Belakang........................................................................................ B. Pengertian.............................................................................................. C. Tujuan umum, khusus............................................................................ D. Sasaran.................................................................................................. E. Kebijaksanaan........................................................................................

1 1 1 2 2 2

II. PEMERIKSAAN PARASIT MALARIA......................................................... A. Siklus hidup parasit malaria.................................................................... B. Gejala klinis malaria................................................................................ C. Diagnosa malaria.................................................................................... D. KEGIATAN :............................................................................................ - Alat dan bahan...................................................................................... - Penggunaan Mikroskop........................................................................ - Menguji Mutu Giemsa........................................................................... CARA KERJA :........................................................................................ - Pengambilan SD malaria...................................................................... - Pembuatan sediaan SD malaria........................................................... E. Pemeriksaan SD malaria........................................................................ F. Pelaporan hasil pemeriksaan SD malaria...............................................

3 3 5 5 6 6 7 10 10 10 10 32 33

III. ADMINISTRASI LABORATORIUM MALARIA............................................ A. Tugas dan Fungsi Laboratorium malaria................................................ B. Tingkatan-tingkatan Laboratorium malaria............................................. C. Asal sediaan darah................................................................................. D. Prioritas Pemeriksaan SD Malaria.......................................................... E. Kualitas Laboratorium malaria................................................................ F. Syarat-syarat Laboratorium malaria....................................................... G. Manajemen Laboratorium malaria..........................................................

35 35 35 35 36 36 37 37

IV. RAPID DIAGNOTIC TEST (RDT)................................................................ - Deteksi antigen dari parasit malaria..................................................... - Cara kerja............................................................................................. - Sensitifitas dan spesifisitas................................................................... - Keuntungan RDT dibanding pemeriksaan Mikroskopis........................ - Kerugian RDT dibanding pemeriksaan Mikroskopis............................. - Kebijakan penggunaan RDT di Indonesia............................................

41 41 41 42 42 42 43

V. LAMPIRAN - Buku penerimaan sediaan darah (Lab. 1) - Buku harian mikroskopis (Lab. 2) - Buku harian laboratorium (Lab. 3) - Laporan bulanan laboratorium Kabupaten (Lab. 4a) - Pengiriman SD untuk pemeriksaan ulang (Lab. 4b) - Daftar Kepustakaan - Daftar Kontributor

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Malaria merupakan salah satu masalah kesehatan masyarakat karena dapat menyebabkan kematian terutama pada kelompok risiko tinggi yaitu bayi, balita, dan ibu hamil. Angka kesakitan penyakit ini relatif masih cukup tinggi terutama di kawasan Indonesia bagian timur. Oleh karena itu upaya pengendalian malaria perlu kita tingkatkan terus antara lain dengan meningkatkan kemampuan, keterampilan para pelaksananya disemua lini pelayanan kesehatan yang ada fasilitas laboratoriumnya. Peran tersebut terutama sangat ditentukan oleh tenaga laboratorium/mikroskopis, karena mikroskopis berada digaris depan pelayanan kesehatan (Puskesmas, Rumah Sakit). Hal-hal yang penting diperhatikan adalah SOP (Standard Operating Procedure), tahap-tahapnya dimulai dari persiapan, pembuatan, pewarnaan sampai dengan pemeriksaan sediaan darah (SD). Dengan memperhatikan hal-hal tersebut, maka akan sangat mempengaruhi hasil akhir dari pemeriksaan SD. Dengan tujuan agar mampu menegakkan diagnosa malaria secara mikroskopis sebagai tolok ukur, dan dapat menentukan dengan pasti spesies Plasmodium nya sehingga pengobatan bisa diberikan dengan cepat dan tepat. Karena penderita dengan gejala klinis malaria tanpa pemeriksaan/konfirmasi laboratorium, hasilnya akan bias serta ketepatan diagnosisnya kurang akurat. Dengan adanya buku pedoman ini diharapkan dapat membantu/menjadi panduan bagi mikroskopis dalam bekerja dibidangnya. Buku pedoman ini merupakan perbaikan dari edisi sebelumnya, berdasarkan masukan-masukan dan pengalaman dalam penggunaan selama ini. Walaupun demikian, saran-saran masih tetap sangat diharapkan guna lebih menyempurnakan edisi selanjutnya. Semoga buku pedoman ini berguna bagi petugas kesehatan, khususnya petugas laboratorium/mikroskopis disemua unit pelayanan kesehatan termasuk kegiatan di lapangan dan bermanfaat pula bagi upaya pengendalian malaria dalam rangka meningkatkan derajat kesehatan masyarakat. B. Pengertian Pemeriksaan Parasit Malaria adalah : Pemeriksaan darah penderita yang diduga malaria, baik secara pemeriksaan mikroskopis maupun pemeriksaan cepat dengan Rapid Diagnostic Test (RDT). Penderita dinyatakan positif malaria apabila pada pemeriksaan secara mikroskopis ditemukan Plasmodium sp. dalam darahnya atau apabila pemeriksaan RDT positif.

1

C. Tujuan Tujuan Umum : Meningkatkan mutu diagnosis pemeriksaan darah malaria di semua fasilitas pelayanan kesehatan. Tujuan Khusus : - Membuat standar baku pemeriksaan darah malaria secara mikroskopis. - Membuat petunjuk teknis penggunaan Rapid Diagnostic Test (RDT). D. Sasaran - Petugas mikroskopis malaria. - Laboratorium di tempat pelayanan kesehatan. E. Kebijaksanaan - Pemeriksaan laboratorium dilakukan pada semua penderita diduga malaria (malaria klinis) disemua tingkat pelayanan kesehatan. - Meningkatkan kualitas petugas laboratorium dan fasilitas pemeriksaan laboratorium. - Penatalaksanaan kasus malaria berdasarkan diagnosa yang cepat dan pengobatan yang tepat.

2

BAB II PEMERIKSAAN PARASIT MALARIA

A. SIKLUS HIDUP PARASIT MALARIA 1. Pada Nyamuk Fase Seksual terjadi pada lambung nyamuk. Segera setelah nyamuk Anopheles betina menghisap darah penderita malaria, gametosit jantan akan mengeluarkan 4-8 flagel. Dengan flagel, gametosit jantan bergerak menuju ke gametosit betina dan membuahinya. Hasil fertilisasi bergerak menembus dinding lambung dan membentuk kista sepanjang dinding lambung nyamuk. Bila kista pecah akan keluar sporozoit yang akan masuk ke kelenjar liur nyamuk dan siap menginfeksi manusia. Rentang waktu antara masuknya gametosit sampai terbentuknya sporozoit adalah 1-2 minggu, tergantung spesies dan suhu sekitarnya.

Siklus Sporogoni

Nyamuk Anopheles betina dewasa menghisap darah manusia dan mengeluarkan sporozoit infektif

NYAMUK MANUSIA Siklus di dalam sel hati Setelah periode skizogoni, parasit masuk ke dalam aliran darah

GAMETOSIT PELEPASAN MEROZOIT

SKIZON DEWASA

TROPOZOIT MUDA (BENTUK CINCIN)

Siklus Eritrositer TROPOZOIT LANJUT

SKIZON MUDA TROPOZOIT MATANG

3

2. Pada Manusia a. Fase Hati Bila nyamuk Anopheles betina yang infektif menggigit manusia, maka parasit malaria akan ditularkan ke orang tersebut. Parasit mengikuti sirkulasi darah dan masuk ke dalam sel hati. Dalam waktu 7-21 hari parasit akan tumbuh dan berkembang biak, sehingga memenuhi seluruh sel hati. Selanjutnya sel hati pecah dan parasit masuk ke aliran darah, menginfeksi sel darah merah. Hal ini berlaku untuk infeksi P. Falciparum dan P. Malariae. Pada infeksi P. Vivax dan P. Ovale, sejumlah parasit tetap berada dalam hati dan tidak berkembang biak (dorman). Parasit yang dorman ini dapat menyebabkan kekambuhan pada pasien dengan infeksi P. Vivax dan P. Ovale. b. Fase Sel Darah Merah Fase ini merupakan fase aseksual. Pada saat merozoit dalam sel hati pecah, maka akan membebaskan tropozoit yang selanjutnya menginfeksi sel darah merah. Tropozoit akan terus mengalami perkembangan menjadi skizon. Skizon akan berkembang menjadi merozoit dan pecah membebaskan tropozoit. Siklus ini akan berlanjut sampai 3 kali. Kemudian sebagian Merozoit akan berkembang menjadi bentuk gametosit dan bila terhisap oleh nyamuk Anopheles sp betina siap melakukan perkembangbiakan seksual di dalam tubuh nyamuk.

4

B. GEJALA KLINIS MALARIA Pada penderita malaria dapat ditemukan satu atau lebih gejala-gejala klinis sebagai berikut : a. b. c. d.

Demam tinggi. Sakit kepala. Menggigil. Nyeri di seluruh tubuh.

Pada beberapa kasus dapat disertai gejala lainnya berupa mual, muntah dan diare. Gejala tersebut diatas hampir menyerupai dengan gejala-gejala penyakit lainnya, sehingga diperlukan pemeriksaan laboratorium untuk mendapatkan diagnosa yang pasti. Tidak mudah dalam menentukan diagnosa malaria pada orang yang pernah terkena serangan sebelumnya. Hal ini disebabkan karena tubuh penderita sudah menyesuaikan dengan penyakit sehingga gejala klinisnya tidak selalu dapat terlihat. Kondisi demikian dapat juga terjadi pada penderita yang sebelumnya sudah mengobati dirinya sendiri. Keluhan yang dirasakan mungkin hanya berupa sedikit demam dan sakit kepala ringan. C. DIAGNOSA MALARIA Banyak orang tidak mengetahui bahwa penyebab malaria adalah adanya parasit malaria yang masuk ke dalam darah. Ukuran parasit tersebut sangat kecil dan hanya dapat dilihat dengan menggunakan bantuan mikroskop. Untuk dapat melihat adanya parasit di dalam darah penderita, perlu dibuat sediaan darah malaria (SD). Selanjutnya diwarnai dengan pewarnaan giemsa. SD ditetesi minyak imersi dan diperiksa di bawah mikroskop menggunakan lensa objektif 100x. Jika ditemukan parasit pada pemeriksaan, penderita dinyatakan positif malaria. Bagaimanapun juga perlu diketahui bahwa untuk mendapatkan diagnosa pasti malaria adalah dengan melakukan pemeriksaan SD dengan menggunakan mikroskop. Diperlukan keterampilan yang baik dari petugas dalam memeriksa SD malaria. Dengan adanya buku pedoman ini diharapkan dapat membantu memperoleh keterampilan tersebut.

5

D. KEGIATAN 1. Pemeriksaan Mikroskopik ALAT Mikroskop Binokuler Mikroskop terdiri dari : 1. Tabung okuler 2. Prisma 3. Pemutar lensa objektif 4. Lensa objektif 5. Meja sediaan 6. Kondensor dan diafragma 7. Cermin 8. Kaki mikroskop atau landasan 9. Lensa okuler 10. Pegangan mikroskop 11. Makrometer 12. Mikroskop

Keterangan Gambar : 1 & 2 : Merupakan tempat prisma dan lensa okuler 3 : Berfungsi untuk mengatur pembesaran SD yang diinginkan

6











4 : Lensa objektif harus mempunyai pembesaran 10x, 40x dan 100 x. Lensa tidak boleh dibersihkan dengan alkohol atau aseton. Untuk pemeriksaan parasit malaria mula-mula digunakan lensa objektif 10x untuk mencari lapangan pandang. Kemudian untuk pemeriksaan parasitnya digunakan lensa objektif 100x. Pada pembesaran lensa 100x, digunakan minyak imersi (immersion oil). Setelah itu untuk memfokuskan lapangan pandang digunakan mikrometer. (penggunaan anisol terutama pada daerah dimana tidak tersedia minyak imersi) 5 : Berfungsi untuk menggeser SD ke kiri atau kanan, ke depan atau belakang pada waktu melakukan pemeriksaan. 6 : Kondensor dan diafragma berfungsi memaksimalkan cahaya yang jatuh ke lapangan pandang SD yang diperiksa. Bila menggunakan sumber cahaya listrik bukan dari mikroskop, dapat digunakan filter biru yang membuat lapangan pandang mikroskop lebih putih (bukan kuning). 7 : Cermin digunakan untuk memantulkan cahaya dari sumber cahaya listrik (lampu) atau cahaya matahari ke kondensor. Apabila sumber cahaya dari lampu, digunakan permukaan cermin yang datar. Sedangkan untuk sumber cahaya matahari, digunakan cermin cekung. 8 : Landasan mikroskop harus diletakkan di tempat yang permukaannya rata dan kuat, misalnya di atas meja. Landasan ini berfungsi untuk menahan agar mikroskop tidak mudah goyah pada waktu dilakukan pemeriksaan. 9 : Untuk pemeriksaan SD malaria lensa okuler dapat digunakan dengan pembesaran 10x. 10 : Digunakan untuk memegang mikroskop bila akan dipindahkan ke tempat lain (dengan tangan kanan) dan dianjurkan untuk mengangkat beserta landasannya (dengan tangan kiri). 11 : Makrometer digunakan untuk mencari secara cepat lapangan pandang besar (LPB) 12 : Mikrometer digunakan untuk mendapatkan gambaran secara lebih jelas (dengan lensa objektif yang lebih besar).

PENGGUNAAN MIKROSKOP UNTUK PEMERIKSAAN PARASIT MALARIA • Sumber cahaya Sumber cahaya yang baik merupakan salah satu syarat untuk mendapatkan hasil pemeriksaan yang optimal. Sumber cahaya dapat

7

berasal dari cahaya matahari maupun listrik. Sumber cahaya lain dapat menggunakan baterai atau generator. Cahaya tidak boleh terlalu terang atau terlalu gelap karena dapat mempengaruhi pemeriksaan SD. Jika memakai sumber cahaya lampu bohlam, maka perlu menggunakan filter. Sedangkan bila memakai sumber cahaya lampu neon maka tidak perlu menggunakan filter. • Pengaturan Cahaya a) Letakkan SD di meja sediaan mikroskop b) Atur cahaya dengan menaikkan kondensor dan membuka diafragma. c) Amati SD melalui okuler dengan menggunakan lensa objektif 10 x. Putar makrometer untuk memfokuskan lapangan pandang. Tidak dianjurkan untuk langsung menggunakan lensa objektif 100x untuk memfokuskan lapangan pandang. d) Bila lapangan pandang sudah ditemukan/fokus, teteskan minyak imersi atau anisol pada lapangan pandang tersebut dan lensa objektif diputar pada ukuran 100x. e) Amati lapangan pandang tersebut, bila belum fokus, mikrometer diputar sehingga lapangan pandang menjadi jelas. Jangan menggunakan makrometer untuk memfokuskan lapangan pandang. • Penyimpanan mikroskop a) Perlindungan terhadap debu dan kotoran - Harus ditutup dengan kain bersih/cover mikroskop. - Jika tidak dipakai dalam waktu lama harus dimasukkan dalam kotak mikroskop dengan posisi lensa objektif 10x. - Setelah mikroskop digunakan, lensa objektif dan okuler masingmasing dibersihkan dengan kertas pembersih lensa yang berbeda. - Untuk membersihkan minyak imersi bisa menggunakan eter alkohol dengan perbandingan 7 : 3. b) Perlindungan terhadap jamur - Simpan ditempat yang kering. Penyimpanan dapat dilakukan pada ruangan AC yang dipasang 24 jam terus menerus (tidak termasuk AC yang hanya dinyalakan pada jam kerja). - Apabila tidak tersedia fasilitas diatas, maka mikroskop disimpan dalam kotaknya atau lemari. - Mikroskop disimpan dalam lemari yang dipasang bola lampu 25-50 watt disesuaikan dengan ukuran lemari penyimpanan dan dihidupkan terus menerus. Apabila disimpan dalam kotak mikroskop, cukup dengan lampu 5 watt. - Apabila tidak ada fasilitas listrik maka mikroskop disimpan dalam kotaknya yang diberi 400 gram silica gel. - Jika mikroskop tidak digunakan dalam waktu yang cukup lama, maka semua lensa obyektif dan okuler harus disimpan terpisah dalam desicator atau toples kaca yang diberi silica gel. Jika silica gel sudah berubah warna menjadi merah muda dibandingkan dengan warna semula (biru), maka dapat didaur ulang (dipanaskan) untuk digunakan lagi. 8

- Jika lensa terkena jamur, lensa harus diservis langsung pada pabrik pembuatnya. BAHAN • Slide/Kaca sediaan (Object Glass) 1. Slide yang sudah tergores tidak boleh dipakai. Yang terbaik adalah menggunakan object glass yang baru, dan tidak boleh menggunakan slide bekas pakai. Semua object glass direndam dalam air sabun selama 30 menit – 1 jam kemudian dibilas dengan air mengalir. 2. Membersihkan object glass: Dilap dengan kasa atau kain bersih. Setelah kaca sediaan dibersihkan, tidak boleh memegang pada bagian permukaan kaca sediaan, dan langsung dipakai atau disimpan pada slide box. 3. Menyimpan object glass: Slide box yang yang dianjurkan adalah terbuat dari bahan plastik/fiber yang tahan pecah. Slide box sebaiknya tidak terbuat dari bahan kayu karena dapat berpengaruh pada SD yang disimpan. Ketebalan object gelas 1,1 – 1,3 mm, ukurannya 25 x 75 x 1 – 1,5 mm. • Lancet steril, digunakan hanya untuk 1x pakai. • Kapas, jika tidak tersedia kapas, dapat digunakan bahan halus. • Alkohol 70 %, lebih baik lagi jika menggunakan swab alkohol siap pakai. • Minyak imersi (immersion oil) bila tidak tersedia dapat menggunakan anisol • Larutan buffer (pH 7.2) Larutan buffer dapat dibuat dengan cara mencampurkan satu tablet buffer (pH 7,2) dalam 1 liter aquades atau air mineral (air kemasan dalam botol) yang jernih, tidak berbau dan tidak berasa. Larutan ini dapat dipakai untuk mengencerkan larutan giemsa stock. • Larutan Giemsa Beberapa hal yang harus diperhatikan : 1. Giemsa stock harus disimpan dalam botol kaca berwarna gelap dan hindari dari sinar matahari langsung. 2. Sebaiknya giemsa stock disimpan dalam botol berwarna gelap berukuran 100 ml. Hal ini untuk menghindari rusaknya giemsa stock karena oksidasi dan penguapan akibat seringnya membuka tutup botol. 3. Botol giemsa stock yang akan digunakan tidak boleh dikocok atau diaduk karena endapan/kristal giemsa akan naik ke permukaan larutan dan dapat menjadi artefak dalam SD yang diwarnai. 4. Pengambilan giemsa stock harus menggunakan pipet yang kering, agar giemsa stock di botol tidak tercemar dengan air. 5. Sisa larutan giemsa yang telah dicampur dengan larutan buffer bila tidak digunakan lagi harus dibuang dan dimasukkan kembali ke dalam botol giemsa stock.

9

6. Larutan giemsa dibuat segera sebelum digunakan dan tidak boleh disimpan/digunakan setelah 6 jam. 7. Adapun konsentrasi larutan giemsa yang akan digunakan dapat dilihat lebih lanjut pada halaman 13.

MENGUJI MUTU GIEMSA Ada dua cara menguji mutu giemsa untuk mengetahui apakah giemsa stock yang akan digunakan masih baik : a) Melakukan pewarnaan pada 1-2 SD, kemudian diperiksa di bawah mikroskop. Kalau hasilnya sesuai dengan kriteria standar pewarnaan yang baik, berarti giemsa pengencernya masih bagus dan dapat digunakan. Pengujian seperti ini perlu dilakukan setiap kali akan melakukan pewarnaan masal. b) Melakukan test menggunakan kertas Whatman no.2 dan metanol (metil alkohol) : o Letakkan kertas saring diatas gelas atau petri disk supaya bgian tengah kertas tidak menyentuh sesuatu. o Teteskan 1-2 tetes giemsa stock pada kertas saring. Tunggu sampai meresap dan menyebar. o Kemudian teteskan 3-4 tetes metanol absolut di tengah bulatan giemsa perlahan dengan jarak waktu beberapa detik sampai garis tengah giemsa menjadi 5-7 cm, maka akan terbentuk : - Lingkaran biru (methilen blue) ditengah. - Lingkaran cincin ungu (methilen azur) diluarnya, serta - Lingkaran tipis warna merah (eosin) pada bagian tepi. Giemsa sudah rusak dan tidak boleh dipakai lagi, bila warna ungu atau merah tidak terbentuk. • Kertas lakmus untuk mengukur pH

CARA KERJA 1) PENGAMBILAN SEDIAAN DARAH MALARIA o Untuk bahan o Untuk bahan pemeriksaan yang terbaik adalah darah dari ujung jari. o Bila menggunakan darah vena, sebaiknya darah yang digunakan adalah darah yang belum tercampur dengan anti koagulan (darah yang masih ada dalam spuit). SD harus segera dibuat sebelum darah membeku. o Bila menggunakan darah dengan anti koagulan harus segera dibuat SD malaria, karena bila sudah lebih dari 1 jam, jumlah parasit berkurang dan morfologi dapat berubah. o Untuk darah yang dimasukkan ke dalam tabung yang berisi anti koagulan, tabung tersebut harus diisi penuh dengan darah yang akan diperiksa.

10

2) PEMBUATAN SEDIAAN DARAH MALARIA a. Jenis Sediaan Darah Untuk membuat SD malaria dibuat 2 jenis SD, yaitu sediaan darah tebal dan sediaan darah tipis. Sediaan darah tebal Terdiri dari sejumlah besar sel darah merah yang terhemolisis. Parasit yang ada terkonsentrasi pada area yang lebih kecil sehingga akan lebih cepat terlihat di bawah mikroskop. Sediaan darah tipis Terdiri dari satu lapisan sel darah merah yang tersebar dan digunakan untuk membantu identifikasi parasit malaria setelah ditemukan dalam SD tebal. b. Pembuatan Sediaan Darah

1. Pegang tangan kiri pasien dengan posisi telapak tangan menghadap ke atas. 2. Pilih jari tengah atau jari manis (pada bayi usia 6-12 bulan darah diambil dari ujung ibu jari kaki dan bayi 100/µℓ darah. Jika jumlah parasit < 100/µℓ darah, maka sensitivitasnya menurun.  Sensitivitas Rapid Test terhadap non falciparum (pLDH atau p-Aldolase) dilaporkan lebih rendah dibandingkandengan P.falciparum (HRP-2).  RDT dapat mendeteksi antigen yang diproduksi oleh gametosit (sepert pLDH) sehingga dapat memberikan hasil positif pada penderita yang hanya mengandung gametosit.  Gametosit tidak bersifat patogen, dapat berada dalam darah walaupun penderita telah mendapat pengobatan, hal ini dapat menyebabkan hasil positif palsu.

Kelebihan RDT dibanding Pemeriksaan Mikroskopik :  Lebih sederhana dan mudah diinterpretasikan, tidak memerlukan listrik, tidak memerlukan pelatihan khusus seperti pada pemeriksaan Mikroskopik.  Variasi dari interpretasinya adalah kecil antara pembaca yang satu dengan yang lainnya.  Walaupun dapat disimpan pada temperatur kamar (suhu dibawah 300C), RDT dianjurkan disimpan dalam lemari es pada suhu 40C (usahakan tidak terkena cahaya matahari langsung).  Rapid Test dapat mendeteksi P.falciparum pada waktu parasit bersekuestrasi pada kapiler darah (hal ini tidak terdeteksi dengan pada pemeriksaan secara mikroskopik biasa). Hal yang sama dapat ditemukan juga pada placenta ibu hamil dengan infeksi P.falciparum.

Kekurangan RDT dibanding Pemeriksaan Mikroskopis 1. Rapid Test yang menggunakan HRP-2 hanya dapat digunakan untuk mendeteksi P.falciparum. 2. Rapid Test dengan HRP-2 dapat memberikan hasil positif sampai 2 minggu

42

setelah pengobatan, walaupun secara mikroskopik tidak ditemukan parasit. Hal ini dapat membuat rancu kita dalam menilai hasil pengobatan. 3. Harga RDT lebih mahal dari pada pemeriksaan mikroskopik. 4. Rapid Test bukan pemeriksaan yang bersifat kuantitatif sehingga tidak dapat digunakan untuk menilai jumlah parasit. 5. Kit yang ada tidak dapat membedakan infeksi antara P.vivax, P.ovale, P.malariae. selain itu tidak dapat membedakan antara Mixed P.falciparum dengan infeksi tunggal P.falciparum saja.

Jenis RDT yang beredar pada umumnya ada 2 jenis : • Single : hanya mendiagnosis infeksi P.falciparum (contoh : Paracheck Pf) • Combo / Pan specific : dapat mendiagnosis infeksi P.falciparum dan non P.falciparum (contoh : Parascreen combo)

Kebijakan penggunaan / aplikasi RDT di Indonesia RDT digunakan khususnya untuk penderita dengan gejala klinis malaria :  Pada puskesmas terpencil di daerah endemis, yang belum dilengkapi dengan mikroskop atau sarana laboratorium.  Di Rumah Sakit, dimana penderita datang di luar jam kerja rutin.  Pada Puskesmas daerah endemis malaria yang mempunyai fasilitas rawat inap dan digunakan di luar jam kerja rutin.  Pada daerah dengan KLB malaria; untuk diagnosis cepat, guna menentukan kebijakan selanjutnya.  Pada daerah pengungsian karena bencana alam atau hal lainnya baik di daerah endemis malaria, atau pengungsi yang berasal dari daerah endemis malaria. Perlu diingat bahwa RDT ini tidak dapat menggantikan pemeriksaan SD secara mikroskopis. Prosedur Tes RDT (jenis single atau combo) :

URAIAN/ PENJELASAN TES

KOTAK T

KOTAK UNTUK BUFFER B

KOTAK KONTROL C

KOTAK UNTUK SAMPEL DARAH) A 43

Contoh RDT (Paracheck P.f) beserta Loop untuk mengambil darah

Silicagel Loop yang telah dikalibrasi untuk mengambil darah sejumlah 5 ul

PERIKSA SILICA GEL & TULIS IDENTITAS PASIEN

CATAT: KODE, TANGGAL & WAKTU (JAM & MENIT)

PERIKSA WARNANYA BIRU

44

a. Jari manis/tengah penderita dibersihkan dengan kapas alkohol 70% (atau dengan disposible alcohol swab)

BERSIHKAN JARI DENGAN KAPAS ALKOHOL

b. Kemudian jari diseka kembali dengan kasa steril untuk membersihkan kemungkinan adanya sisa alkohol di jari.

SEKA KEMBALI JARI DARI SISA ALKOHOL DENGAN KASA KERING (STERIL)

45

c. Tusuk Jari manis/jari tengah dengan lanset steril.

TUSUK JARI DENGAN LANCET STERIL.

d. Seka darah yang pertama keluar dengan kapas kering. e. Ambil darah dengan loop/ micro capiler tube yang tersedia. Jumlah darah yang diambil harus tepat. Pastikan loop terisi penuh oleh darah.

46

SANGAT PENTING JUMLAH DARAH HARUS TEPAT PASTIKAN BAHWA LOOP TERISI PENUH OLEH DARAH

f. Teteskan darah tersebut di kotak tempat sampel darah. Dengan cara menyentuhkan loop pada kotak untuk darah (posisi loop harus vertikal/tegak lurus)

47

g. Kemudian teteskan cairan buffer pada kotak buffer. Jumlah tetesan tergantung jenis RDT ( umumnya 4 – 6 tetes). Posisi botol buffer tegak lurus.

h. Diamkan dan biarkan darah tercampur dan meresap pada kotak T (tes)

DIAMKAN DAN BIARKAN DARAH TERCAMPUR DAN MERESAP PADA KOTAK T

DARAH AKAN MENGALIR DENGAN SENDIRINYA

48

i. Umumnya hasil dibaca setelah menit 15 (maksimal sampai 30 menit ) Baca hasil tes ditempat yang terang

SETELAH 15’ LATAR BELAKANG PADA KOTAK JENDELA AKAN TERLIHAT BERSIH DAN JELAS

PERIKSA GARIS KONTROL

j. Tulis hasil tes dekat kotak T (Tes/ hasil) dan pada buku laporan tes.

CATAT HASIL TULIS HASIL TES PADA KOTAK (T) TES & PADA BUKU LAPORAN TES

k. Tes tanpa garis kontrol berarti tidak valid, tes harus diulang dengan menggunakan RDT yang baru. l. Bila telah melewati 30 menit, hasil tidak boleh dibaca lagi karena sudah tidak valid

49

Cara membaca hasil tes RDT jenis single (contoh: Paracheck P.f): • Bila terdapat 1 (satu) garis berwarna pada jendela Tes (T) dan 1 (satu) garis pada jendela kontrol (C) menunjukkan positif P.falciparum • Bila tidak terdapat garis berwarna pada jendela Control (C) menunjukkan kesalahan pada RDT (tes harus diulangi). • Bila terdapat garis pada jendela kontrol (C) menunjukkan negatif P.falciparum.

Cara membaca hasil pemeriksaan RDT jenis Combo/Pan (contoh: Parascreen combo):  Bila terdapat 2 garis berwarna pada jendela test (T) dan 1 garis pada jendela kontrol (C) menunjukkan infeksi P.falciparum atau infeksi campur. (HRP-2, pan LDH, Aldolase)  Bila terdapat 1 garis berwarna pada jendela T (HRP-2) dan 1 garis pada jendela C, menunjukkan adanya infeksi falciparum.  Bila terdapat 1 garis berwarna pada jendela T (pan-LDH/Aldolase) dan 1 garis pada jendela C, menunjukkan adanya infeksi non falciparum.  Bila terdapat 1 garis berwarna pada jendela C menunjukkan negatif.  Bila tidak terdapat garis berwarna pada jendela C menunjukkan kesalahan pada RDT (Test harus diulang/invalid).

Contoh Hasil Tes (combo) EXAMPLE RESULTS (SPECIFIC TEST FORMATS VARY)

Negative

50

Non-falciparum

Pure or mixed infection with P. falciparum

V. LAMPIRAN

BUKU PENERIMAAN SEDIAAN DARAH

No Urut 1

Tanggal diterima 2

Asal Sediaan Darah 3

No. Surat Pengantar 4

Lab. 1

Jumlah Jumlah Tanggal SD Tanggal selesai SD positif SD negatif Diperiksa Diperiksa 5

6

7

8

BUKU HARIAN MIKROSKOPIS

Tgl.

No.

SD

Keterangan kualitas Sediaan Darah

Diagnosa

No. Kode F R

G

V

M

Lab. 2

Mx

Neg.

Pewar- Ketenaan balan

Jml. SD tak dapat Cek Kepala Lain- diperiksa Laboratorium lain

BUKU HARIAN LABORATORIUM Bulan : ...........................................

Tgl

Jml. SD mikroskopis sebelum yang meme- pemeriksa riksa hari ini an

SD diterima hari ini

Jml yang harus diperiksa hari ini

SD tak dapat diperiksa diperiksa hari ini (rusak)

Lab. 3

SD

Sisa sediaan

Positif Jml

darah

F R

G

V

M

Mx

hari ini

LAPORAN BULANAN LABORATORIUM KABUPATEN

No. Urut 1

Sediaan darah diperiksa

Nama Mikroskopis

Tidak

Positif Jml

2

3

F Jml

R

G

4

5

6

Lab. 4a

Jml V

M

Mx

Neg

7

8

9

10

Jumlah Rata-rata

dapat

Hari

Diperiksa

diperiksa

kerja

Satu hari

11

12

13

Sub-total Total Lab. Kab. 1. 2. 3. 4.

Lab. Lap.

Jumlah

Sisa bulan yang lalu Diterima bulan ini Diperiksa bulan ini Sisa akhir bulan

Mengetahui, Kep. Seksi Malaria Kab.

........................................, 19.... Kep. Laboratorium Kabupaten

( .................................. )

( ................................................. )

Lembar I

Lab. 4 b

Lembar II

Lab. 4 b

PENGIRIMAN SD UNTUK PEMERIKSAAN ULANG

PENGIRIMAN SD UNTUK PEMERIKSAAN ULANG

A. SD positif (*) Nama pemeriksa I Kabupaten Bulan

A. SD positif (*) Nama pemeriksa I Kabupaten Bulan

No. Urut

No. Kode

1

2

: : : Diagnosa Pertama 3

Ulangan 4

B. Sediaan Darah Negatif (-) Jumlah : (Pemeriksa I) Jadi positif : (Pemeriksa II) No. Kode SD

Diagnosa spesies

Nama pemeriksa ulangan

No. Urut

No. Kode

5

1

2

: : : Diagnosa Pertama 3

Ulangan 4

B. Sediaan Darah Negatif (-) Jumlah : (Pemeriksa I) Jadi positif : (Pemeriksa II) No. Kode SD

Diagnosa spesies

Nama pemeriksa ulangan 5

DAFTAR SINGKATAN : 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13.

SD LPB pH KH2PO4 Na2HPO4 PMN µl RDT PA ACD PCD KLB PCR

= = = = = = = = = = = = =

sediaan darah lapangan pandang besar tingkat keasaman (asam-basa) kalium dihidrofosfat binatrium hidrofosfat polymorphonuclear mikroliter Rapid Diagnotic Test Pro Analysis Active Case Detection Passive Case Detection Kejadian Luar Biasa Polymerase Chain Reaction

Daftar Kepustakaan : 1. Basic Malaria Microscopy, Part I. Learner’s Guide WHO 1991. Reprinted 2004 2. Rapid Diagnostic Test, WHO, WPRO

Daftar Kontributor :

1. Dr. Rita Kusriastuti, MSc. 2. Prof. Dr. Inge Sutanto, M. Phil 3. Drs. Saktiyono, MSc. 4. Dr. Bangkit Hutajulu, MScPH. 5. Dr. Marti Kusumaningsih, MKes 6. Dr. Worowijat 7. Dr. Achmad Farchanny 8. Dra. Rawina Winita, MS 9. Dra. Hendri Astuti, MS 10. Ali Romzan, BSc.