Araujo Roman Lessly Katherine

 ARAUJO ROMAN LESSL LESSLY Y KATHERINE KATHERINE

INTRODUCCION El método Papanicolau para colorear  extendidos cervicales Usado desde hace aprox. 50 años en todo el mundo Consiste en el uso de un colorante nuclear (hematoxilina) y colorantes citoplasmáticos citoplasm áticos que compiten entre si permitiendo una tinción policomatica

Es el método de tinción mas utilizado para material citológico. La coloración de Papanicolaou es la técnica por excelencia de la citología general como la hematoxilina eosina lo es para el método histológico

Tinción Papanicolaou 

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Tinción de rutina elaborada por  el Dr. Georges Papanicolaou, tienen un valor práctico en la diferenciación celular  tanto citoplasmática como nuclear y sus modificaciones. Para este método se necesitan 3 soluciones especificas: Hematoxilina de Harris Orange 6 (OG6) Eosina Azur 36, 50 ó 65 (EA-50)

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Para la Coloración de Papanicolaou es necesario que los preparados sean previamente fijados en alcohol 96º.

Tinc ión d e  Papanicolaou 

Hematoxil ina de Harris

Coloración Tricrómica

EA 50

Orange G

TECNICA DE COLORACION -  Alcohol 96º

- Agua corriente 10 pasajes. - Hematoxilina 45 Seg. Virar en agua corriente hasta que esta quede transparente sin trazas de colorante. - Alcohol 96º 10 pasajes. - OG6 3 Min. - Alcohol 96º 10 pasajes. - EA 3 Min. - Alcohol 96º 10 pasajes. - Alcohol 100º 10 pasajes. - Alcohol 100º 10 pasajes. Dejar secar al aire Montar.

ematoxilina de Harris 

2 soluciones Stock: 

Solución A: Hematoxilina al 10% en alcohol.

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Solución B: Alumbre de potasio al 10% en agua destilada.

+ óxido de mercurio

Orange G 

Colorante ácido debido a la presencia de grupos sulfónicos

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Bajo peso molecular 

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Tiñe: 

Células maduras

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Células con hiperqueratosis

L o s c i t o p l as m as s i n q u er at i n a n o r et i en e n   e l c o l o r a n t e.

EA 50 

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Compuesto por: 

Eosina

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Verde Luz

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Pardo bismarck

Tiñe de rosado (eosinófilas) las estructuras más diferenciadas de los citoplasmas. Las menos diferenciadas son teñidas con el verde luz, desplazando a la eosina y quedando teñidas de color azul ( basófilas).

COLORANTE

ELEMENTOS CELULARES

Hematoxilina de Harris

Afinidad por la cromatina. Tiñe el núcleo.

OG 6

Tiñe la queratina. Penetra rápidamente al citoplasma

EA 50

Tiñe el citoplasma de las células escamosas cianofilas y eosinofílas. Nucléolos y cilios.

NUCLEOS •

La cromatina y la membrana nuclear toman el color  azul oscuro o púrpura mientras el nucléolo obtiene el color rojo, rosado o naranja

CITOPLASMA •

 Adopta el color amarillo o naranja, si hay presencia de queratina. Caso contrario el color varía de verde, azul o gris.

Muestra citológica cervicouterina. Tinción Papanicolaou observada con un aumento de 4x.

Muestra citológica cervicouterina. Tinción Papanicolaou observada con un aumento de 10x

CELULAS SUPERFICIALES

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Frotis de exocérvix normal (examen de Papanicolaou). Células exfoliadas de un epitelio escamoso normal. A la izquierda, dos células intermedias, poligonales de citoplasma azul verdoso, con núcleo central redondo, de estructura conservada. A la derecha, una célula superfcial poligonal, de citoplasma eosinófilo y núcleo retraído, oscuro, puntiforme.

CELULAS BASALES Y PARABASALES

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Frotis de un carcinoma invasor. Células exfoliadas de un carcinoma espinocelular del cuello uterino. En general poligonales, de tamaño variable y citoplasma abundante. Relación núcleo-citoplasmática aumentada. Núcleos de tamaño y forma variables, hipercromáticos, algunos homogéneos y otro con grumos de cromatina que alternan con espacios claros. Algunos núcleos con bordes irregulares.