Antibiograma de Disco Normalizacion Kirby-Bauer

 

BlOMEDlCA Vol. 4, No. 3

4

1984

ACTUALIZACIONES

EL

ANTIBIOGRAMA DE DISCOS. TECNICA DE KIRBY-BAUER MAYE BERNAL R..

INTRODUCCION En el manejo clínico clínico de la e nfer meda d infecciosa es indispensable la identificación del agente causal con el objeto de hacer un control terapéutico, en lo posible, específico. Tratándose de entidades de orígen bacteriano, este concepto es aún más estricto, toda vez que el médico cuenta con gran cantidad de agentes antimicrobianos de los cuales debe seleccionar aquéllos que además de su fácil administración, buena penetración y baja toxicidad toxicidad s ean realmente activos contra el microorg microorganismo anismo cau sa l 1 ) . Estas corisideraciones implican que el médico, además del buen conocimiento y comando de los aspectos clínicos, conozca en profundidad los antimicrobianos y su farmacología, ordene el aislamiento e identificación del agente etiológico y su sensibilidad frente a dichos antimicrobianos cuando éllo sea necesario; esto permitirá establecer un manejo más confiable evitando su uso indiscriminado y la posibilidad de seleccionar cepas bacterianas resistentes, peligro cada vez más creciente como lo destacan investigadores de la genética bacteriana en reciente declaración mundial, 2 ) . Para que los estudios de sensibilidad de los microorganismos a los antibióticos tengan aplicación y validez clínica, es necesario que los procedimientos de laboratorio que la investigan sean confiables. La La ex periencia mundial en el campo

MIGUEL GUZMAN U.

demuestra que es necesario una normalización de su metodología 3). El presente trabajo, tiene por objeto dar las directrices para la correcta realizació realización n e interpretación interpretación del antibiograma de disco que constituye el sistema más comunmente utilizado para microorganismos de crecimiento rápido, 4). El seguimiento seguimiento estricto d e est as direc tric es aseg ura del al antibiograma laboratorio yla alrealización realizació n correcta médico un resultado confiable para el manejo de su paciente. La prueba de sensibilidad utilizando el procedimiento del disco es una modificación de la técnica descrita por Bauer, Kirby, Sherris y Turk 5); es la técnica que se recomienda para los laboratorios clínicos. La prueba es rápid a, práctica y reproducible 6, 7, 8). Los procedimientos de diluciones diluc iones en aga r o dilucion diluciones es en caldo p ar a determinar la concentración inhibitoria mínima mín ima CIM) CIM) de los antimicrobian os son también procedimientos satisfactorios 8). DISCO PARA ANTIBIOGRAMA Loss discos, Lo discos, pa ra antib iogra ma son producidos por casas comerciales bajo un riguroso protocolo de control internacional. Cada disco contiene una concentración predetermin ada que permite permite una correlación más o menos precisa con la concentración mínima inhibitoria que dicho antibiótico

U n id ad d e B acter io lo g ía C lín ica. G r u p o d e M icr o b io lo g ía e I n mu n o lo g ia. A ctu almen te en el G r u p o de Micobacterias. Instituto Nacional de Salud - B o g o tá. Jefe Gr up o de Rdicrobiolo Rdicrobiologia gia e Inm uno logia . Insti tuto Nacional de Salud ciado Facultad de Fdedicina, Universidad Nacional de Colombia.

-

Bogotá. Profesor Aso-

 

EL ANTIB IOGR AM A D E

DISCOS.

NOR M AL lZ AC lON D E LA TECNICA D E

alc an za in vivo vivo segú n los re sul tad os de resistencia o susceptibilidad. Solo deben utilizarse discos con nombre genérico (3). La conservación de los discos es crítica ya que de élla depende la confiabilidad de los resultados. Se debe, por lo tanto, tener particular cuidado al respecto siguiendo las indicaciones siguientes: Los recipientes individuales que contienen los los di discos scos deben man tenerse refrigerados de 4 5° C. o almacenados a -20 -20°C. °C. hasta que sean utilizados; los discos que contienen drogas de la familia familia de la penicil penicilina ina o d e la s cefalosporinas deben mantenerse siempre congelados, excepción de una pequeña cantidad de discos pa ra el trabajo diario, llos os cuales pueden mantenerse refrigerados hasta por una semana. Los nuevos recipientes con discos de sensibilidad deben colocarse a temperatura ambiente antes de abrirlos para ponerlos en uso. Los dispensado res que contie contienen nen disc discos os par a pr ueba de susce~tibilidaddeben susce~tibilidad deben almacenarse cons un desecknte en el refrigerador pero debe permitirse que alcancen la temperatura ambiente antes de ser utilizados. Se debe desechar todo disco cuya fecha de expiración, expresamente puesta por la casa manufacturadora, esté vencida. Los discos deben mantenerse secos hasta que se utilicen. Las técnicas de a ntibiograma s por d difusi ifusión ón han sido normalizadas para microorgan i s m o ~de ~de crecimiento rápido, tales como Staphylococcus y Enterobacteria Enterobacteriaceae ceae pero no son confiables cuando s e aplican a mi microcroorganismos de crecimiento lento, los cuales pueden mostrar zonas de inhibición mucho más grandes que aquéllos de crecimiento rápido. Sin embargo, la total resistencia puede ser significativa; por lo tanto, la prueba de susceptibilidad de microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales o que necesiten una atmósfera anaeróbica o concentracion concentraciones es a ltas d e OZ o que presentan una rat a de creci crecimient miento o particularmente particularment e lenta, deben estudia rse con métodos de antibiograma por dilución o esoecíficos como los va desarrollados v esiandarizados de difusión para este tipo d e microorganismos (3, 7).

KIRBY BAUER

CE CEPA PAS S CO CONT NTRO ROL L Para que los resultados del antibiograma de discos sean realmente confiables es de primordial importancia, además de los aspectos técnicos, introducir un control de calidad interno mediant mediante e el u uso so de la s cepa s control. Estas son de uso universal, se trata de cep as de S. aureu s, E E.. co coli li y Ps aerugino sa las cuales tienen un patrón de sensibilidad ya conocido frente a los antimicrobianos [Cuadro No. l , sensibilidad que debe ser reproducida en cada laboratorio asegurándo con éllo que el procedimiento empleado está operando en óptimas condiciones (9). Po Porr las a nteriores consideraciones, una cepa control de Stap ph h y llo ococ cc cus a ure us (ATCC (AT CC25 25923 923)) multisensible, d ebe pro ba rse con el conjunto de discos para g6rmenes Gram positivos y una cepa multisensfble de Esc heri chia coli (AT (ATCC2 CC2592 5922) 2)con e l conjunto de discos para microorganismos Gram negativos. Una cepa control de Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) debe ser probada Cuadro No S E NS NS l B l L l DAD

1

L A S CEPAS CONTROL

DE INHIBICION EN

ZONA

POTENC A

S. BUIliU

DEL

ATCC 25923

ANTlMlCRO El ANO

DISCO

mm

L

18-24 24

-

18

35

15-20

-

mnmm 20 24

37

mmnm

2 mcg

13- 10

2

Amikacimi

30 mcg

Amplclllna

1 0 m ccg g 100 m q

C.falotino

30 mcg

25

Cetomandole

3

mw

28

C.fotaxima Cafoxilina

30 mcg 30 mcg

Cllndomlclna

2 rncg

23

Clomnisnlcol

3 0 m ccq q

21

24

- 34

-

29

18- 23

lnrmma

bmmm

mmma

28

23

28

rmmmm

29

mmnmi

mlmmL

-

-

19- 26 mnnm

-

21 -27

15 w 10 mcq

23

Genlamlcina

19- 27

1 9 - 26

Kanomiclna

30 m q

19- 26

17

R 'M Pollmixina x,aoe

5 m q 1 U B

Tstroclclina ~rimwtoplm-SUI~O TObramlcina Vancomlcl Vanco mlclno no

3  

U

w

30 m p I 2512375 mp

lomc g 3 0 mcg

mmm

23

Erltromicina

~ x a c i l iin no

15 - 2 2

mmma

10 m 9

30 m q 300 m q

rmmm

31

24

Col1 stina

Nllroiurantoina

ATCC 27853 rllmQU0

30 mcg

Aclcido Oxolinico

Nwomici~

e

- 25 - 24 - 24

Acido Nalldixico

Carbenicilina

i

ATCC 25922

-

X

18- 26 20

-

24

II -15 8 - 14 25

1 7 - 23 ¿U

-

24

12

6

12- 16

rnmm 16

- 21

6

mmmm nmm

1 7 - 22 26 - 37

mmm

wmm ~ iUmmZa

7- 13 23-27

12-16 22-26

1 1 - 16

19-Eñ

1 8 - 25

9-1 4

24

32

19-29 15 - 19

24

6

- 32

1 8 - 26

19-25 iimüüfB

 

M AYE BERNAL R. . M I GUEL GUZM AN U.

con Amikacina, Carben icilina, Cloranfeni Cloranfenicol, col, Clindamicina, Gentamicina, Kanamicina, Tetraciclina y Tobramicina. Esta cepa de Pseudornonas aeruginosa, tiende frecuentemente a desarrollar mutantes resistentes a la Carbenicil Carbenicilina ina dur ante lo loss pases sobre los

Los antibióticos recomendados para pruebas de susceptibilidad de microorgan i s m o ~Gram ~Gram positivos y Gram negativos aparecen en el cuadro ; la lista debe ente nde rse co como mo una simpl simple e sugeren cia 4). En la selección de los antimicrobianos

medios de cultivo en el laboratorio; si esto sucede se debe usar una nueva cepa. Las cepas control deben probarse cada vez que se realicen las pruebas y, el tamaño de los halos de inhibición debe anotarse en una hoja de control de calidad para cada antibiótico Fig. 1 . El diámetro de la zona de inhibición para los microorganismos control contr ol debe debe cae r dentro del rango indic indicado ado en el cu adro No. No. 1 Las variaciones en cada uno de los límites deben investigarse y cor reg irs e p ar a as eg ur ar r esu lta do s validos val idos 4).

debe tenerse hechos:

ANTI

I O G R AM AM A

DE DE D I S C O S

CONTRM.

A N T I M I C R O B I A N O ~ OTE NC IA 1

341

z

I

DE CALlDPD

CEA CONTROL

E. eall ATCC 2B9 22

RANW ACE P TABLE

15

20

333231 30-

27262524232221m

..

g;;:

1514 13 12 O

i

i

5

los

siguientes

El disco disco de Penicilina G es rep rese ntat ivo de todas las penicilinas G. El disco de Ampicilina es representativo de todas las aminopenicilinas tales como: Talampicilina, Pivampicilina, Bacampicilina, Hetacilina, Amoxicilina y Epicilina. m g ~1 disco disco de oxacilina de es rep repres resent entati ativo vo d de e todas todas las las pe peni nici cili lina nass resistentes a las Beta-lactamasas tales como: Meticilina. Nafcilina. Cloxacilina. Fluclo Flu cloxac xacili ilina na y ~i cl ox ac il in a, gualme gualmenté nté de todas las c e f a l o s ~ o r i n a s es de primera generación frente a S. aureus.

generación deben probarse por sep arad o ya generación ya que no no hay sensibi sensibilidad lidad cruzada entre éllas.

l o

FECHA

cuenta

El disco de Cefalotina es representativo de todas las cefalosporinas de primera generación que incluye: Cefaloridina, Cefalexina, Cefradina, Cefazolina, Cefaloglicina, Cefadroxil, Cefacetril, Cefapirina. Las cefalosporinas de segunda y tercera

E:

o

en

6

8

10

DIAS

12

13 13

14

15

16

17

1 0 19 -t

Figura 1

El disco de Tetraciclina es representativo de tod as la s Tetracicl.i Tetracicl.inas. nas. Los aminogluco aminogluco-sidos aunque íntimamente relacionados tienen variaciones individuales que obligan a probarlos individualmente. Este grupo incluye: Gentamicina, Tobramicina, Amikacina, Kanamicina, Sisomicina y Netilmicina.

ANT IBIOTIC ANTIBIO TICOS OS RECOMENDADOS EN U UN N ANTIBIOGRAMA Con el objeto de tener una guía general al realizar un antibiograma se debe seleccionar un número de antimicrobianos para el microorganismo en estudio, ya que no es recomendable, ni lógico, ni económico utilizar todos los antimicrobianos. Como regla general se pueden seleccionar antimicrobianos para microorganismos Gram positiv posi tivos, os, y Gram Gram negati negativos vos y d entr o d e es tos últimos para microorganismos aislados de tracto urinario y para Ps. aeruginosa.

Los Macrólidos sólo tienen un representante que es la Eritromicina Eritromicina.. Las Lincomicinas incluyen Lincomicin y Clinda micina. El El disco de Clindamicina es representativo y debe incluirse de rutina. El Cloranfenicol, la Vancomicina y la Nitrofurantoina deben probarse individualmente. El grupo de las Polimixinas, incluye la Polimixima B y E Solo una debe probarse usualmente para Ps. aeruginosa.

 

EL ANTIBIOGRAMA DE DISCOS. NORMALIZACION DE LA TECNICA DE KIRBY-BAUER Cuadro No

A N T l B l OGRAMA GUl A

OPC ON

GRAM INTEST NAL

PRIMERA

PARA

LA

N EGAT

URINARIA

S E L E C C I ON

DE

DI SCOS

DE

ANTl M lCROBl ANOS

VOS

GRAM GRA M POSI T I VOS

SANGRE TEJIDOS

PA

Staphylococcus

Streptococcus faec alis ( D)

aeruginoso

OTROS

Ampic ilina

Acido oxolinico Amikocina

Corbenicilina

Penicilina G.

Ampicilina

Ampicilina

Gentamicina

Acido ndidixico Ampicifina

Amikacino

Oxacilina

Cloranfenicol

Penic ilina G

Cloranfenicol

Norfloxacina

Gentamicina

Gentamicina

Eritromicina

Tetrociclina

Oxacilina

Trimlop.imSullo Nitrohimntoino

Cloranfenicd

Tobramic ino

Clomnfenicol

Eritromicina

Clindamicina

Tetraciclina

Cefamndole

Polimix ina

Clindamicina

Penicilina G

Eritromicini

Sulfisoxazole

Tetrocicl ino

Trimetoprm-Culfa T r i m t o p h - S u l b Tobrdino

SEGUNDA

Ampicllina

Cefoxitina

Colistino

Gentamicina

Cloranfenicol

Cefotaxima

Netilmiclna

Gentamicino

Kanomicina

Voncomicina

Gentomicina TrirnelopTii-Sulá Cloranfenic ol si

La Carbenicilina y antibióticos relacionados deben probarse par a Ps Ps.. aeruginosa y otros Gram negativos.

2

Ajustar su pH a 7.2-7.4 con solución de NaOH 0.1N.

El Acido Oxolínico, Acido Nalidixico y la 7cwfl 7cw floxa oxaci cina na deben pro bars e sólo p ar a ~roorgan ismos islado isladoss de tracto urinario.

3.

Ester Esterilizar ilizar en autoclave a una temperat ur a de 121 C por 1 5 minu minutos. tos.

4.

Manten Mantenerlo erlo en baño maría hasta que la temperatu ra sea de 4848-50° 50°C. C.

La combinación trimetoprim-Sulfa debe obarse individualmente.

5

Distribuir el med dii o e n c a n t i d a d aproximada de 25 C C en cajas de Petrí d e 15 x 150 ml, ml, estéri les.

Un disco de Sulfonamida de 300 mcg es 3presentativo de todas las sulfas. El disco le Sulfisoxazole es el m8s utili zado. .MEDIO .MEDI O DE CU CULT LTIVO IVO Se utiliza el medio de Muller-Hinton, el cual debe prepararse así: 1.

Prep arar el me medi dio o de acuerdo con con las instrucciones de la casa manufacturadora.

Cuando se van a es tud iar microorgani microorganismos smos exigentes tales como Streptococcus se debe agregar a l m medi edio, o, antes de distri distribuirlo buirlo en las ca ja s de Petrí , 5 50 010 de sa ng re d esfibri nada de cordero o conejo. Se debe dejar solidificar y manten mantenerlo erlo lue luego go a temperat ura ambiente por un tiempo prudencial hasta que el exceso de humedad se evapore. Las cajas con el medio, pueden incubarse por 30 minutos a 35°C. No debe hab er gotas de

 

M A Y E B E R N A L R. R. M I G U E L G U Z M A N U .

agua de condensación sobre la superficie de medio medi o o sobre lla a ta pa d e las caj as de Petrí. El pH final de cada uno de los lotes del medio de Mueller-Hinton solidificado debe ser 7.2-7.4. El medio así preparado puede ser utilizado inmediatamente o puede conservarse en refrigeración hasta por dos semanas, siempre y cuando las cajas de Petrí se guarden en recipientes herméticamente sellados pa ra preveni r la evaporación. No No s e deben utilizar medios secos o envejecidos 3-7). PREPARACION DEL INOCULO Seleccionar 4 6 5 colonias del microorganismo en estudio, organismo estudio, preferencialmente de un cultivo cultivo pur o o de un cultivo en que se haya obtenido el aislamiento primario del microorganismo. No utilizar cultivos de más de 24 horas. Transferir estas colonias, simplemente la parte superior de cada una con tocando asa bacteriológica a un tubo que contenga de 3-5 C C de caldo estéril de Mueller-Hi Muell er-Hinton nton o de Tripticase-s oya. Incub ar es te cultiv cultivo o a 35°C. por un tiempo tiempo prudencial de 2 a 8 horas hasta que se produzca un crecimiento moderado. Diluir el cultivo con solución salina estéril o caldo estéril hasta obtener una turbidez equivalente al tubo 0.5 de la escala de McFarland lo lo cual corresponde aproximadamente a 108 microorganismos microorganismos viables por m1 6).

microorganismo en estudio. N microorganismo No o u sa r cultivos sin diluir. 2.

Colocar el aplicador por encima del nivel del contenido del tubo y rotar10 contra las paredes del mismo para remover el exceso del inóculo.

3

Sem bra r el el inóc inóculo ulo uniformemente uniformemente sobre la superficie del medio con el aplicador. Hacer esta siembra en tres direcciones. Evitar inóculos muy concentrados o muy diluídos.

4.

Permitir que la superficie del medio sembrado se seaue durante 5-20 minutos, manteniendo la caja con la tapa cerrada.

5.

Colocar Colocar los discos sob re lla a superficie del agar con un dispensador o con pinzas pinz as esté riles; co con n ést as, presionar los discos ligeramente sobre el agar para asegurar un contacto uniforme.

6.

Colocar Colocar 6 discos en la perif eria y en el centro Fig. 2 dejando entre disco y disco un espacio uniforme aprox imad amente de 2 cm.); par a evitar que las zonas de inhibición queden imbricadas. Colocar los antibióticos que difunden bien en la parte externa y aquellos que producen halos de inhibición pequeña tales como la Vancomicina, Colistina y Polimixina B) en la parte central. NT l B l OGRAMA

ESTANDAR DE TURBIDEZ

DE D I S C O S

pre par ar estanda raañ99.5 adir m 0.5 m1 de Para BaCL2. 2H 2H2 2 es te1.175°/o) 1 de H2S04 0.36 0.36N N lolo). Mezclar perfe ctam ente y distribuir distribuir en tubo tuboss ta pa rosac a 13 x 100 en cantidad de 6-8 ml.; sellar herméticamente y almacenarlos en un lugar oscuro a temperatura ambiente. Preparar nuevo estandar cada 6 meses. Para hacer la comparación comparació n con el cultivo cultivo,, se de be a gitar el estandar preferiblemente con un agitador tipo vortex 3). SIEMBRA DE L A MUESTRA

Figura

1.

patrón de distribución de los discos de antibióticos

Sumergir un aplicador de algod6n estéril, dentro de la suspensión del

en el medio

de

cultivo

 

EL A N T I BI O G RA M A D E

7

8.

DISCOS.

N O R MA Ll ZA C l O N D E LA TECNlCA D E

Incubar las cajas inmediatamente o en los próximos 30 minutos a 35°C . No usar temperaturas más altas porque a l g u n a s c e p a s d e S t a ph ph y llo ococ cc cus resistentes a Meticilina pueden no detectarse. No incubar en cámara de

den al trata mien to con Penicilina. Este hecho hace necesario recomendar que cepas aisladas de LCR, sangre u otro líquido orgAnico se prueben frente a un disco de Oxacilina de 1 mcg. Se utiliza utiliza el medio de Mueller-Hinton enriquecid o con 5 de

COZ

sangre de carnero. El inóculo se obtiene a partir de un cu cult ltiv ivo o de 18 hora s, el cual s e emulsiona en caldo de Mueller-Hinton, se ajusta la turb turbidez idez al patrón conve convencio ncional nal y se siembra en la forma ya mencionada, se coloca un disco de Oxacilina de mcg,y se incu ba a 35°C por 18 ho ra s. Un halo 20 mm indic a susc epti bilid ad, zona s 19 mm indican resistencia (3).

Leer las cajas depués de 16 16-2 -24 4 hora s de incubación.

MICROORGANISMOS EXIGENTES Para este tipo de microorganismos se recomiend recom iendan an técnicas técnicas específicas para cada uno de éllos, así: Haemophilus influenzae : Se ut utiliz iliza a el medio de Mueller-Hinton enriquecido con 3010 de hemog hemoglobi lobina na o 5 de san gre de caballo y l0/o de isovitalex (BBL) o suplemento VX (Difc (Difco). o). El inócu inóculo lo s e obtie ne a

MEDICION MEDIC ION DE LOS HALO HALOS S DE INHI INHIBICON BICON

partir del crecimiento un cultivo de de 18 horas. Se emulsiona el de cultivo con caldo Mueller-Hinton a la turbidez necesaria y se siembra como en el caso convencional. No se requiere incubación en C 0 2 Las cepas que producen un halo de 19 mm fren te al disco de Ampicilina o Penicilina G son productoras de Beta-Lactamasa y por tanto no son susceptibles a la Ampicilina (3).

incluyendo los 6 mm de l disco , con una regla sobre el respaldo de la caja de Petrí sin remover remover la t apa . Un Una a lectur a de 6 mm indica que no hay zona de inhibición. Si se ha usado agar sangre pa ra la prueba, la medición de la zona de inhibición debe hacerse sobre la superficie removiendo la tapa de la caja.

Neisseria gonorrhoeae: el antib Neisseria antibiograma iograma d e discos se ha adaptado para investigar especialmente las cepas de N gonorrhoeae ~ r o d u c t o r a sde sde Beta-lactamasa. Se utiliza medio base GC enriquecid o con 1 de isovitalex o suplemento VX, pero no se le agrega hemoglobina. El inóculo se obtiene a par tir de un cul culti tivo vo de 18 horas , se emulsiona emuls iona en c aldo de Mueller-Hinton y se le da la turbidez necesaria. Se inocula en la forma convencional. Se Se incub a a 35°C. en C02. Zonas 19 mm fr en te al disco de Penicilina de 10 U son productoras de Beta-lactamasa. Las cepas susceptibles da rá n zóna 20 mm (3). Streptococcus pneumoniae: Hay en la actualidad preocupación por la ocurrencia de cepas de S. pneumoniae resistentes a Penicilina con CIM mcg/ml. Se ha observado obser vado que hay cepas con relativa resistenc ia CI CIM M 0.1 0.12 2 a 1.0 mcg/ml que no re spon -

 

KIRBY BAUER

Medir la zona de inhibición de cada disco contra una superficie oscura bajo luz reflejada. Medir el diámetro de la zona

El punto final de inhibición completa del crecimiento se estima a simple vista, excepto para las sulfonamidas y para algunas especies de Proteus. Con las sulfonamidas puede ocurrir un discreto crecimiento en la zona de inhibición, debido a que algunos rnicroorganismos crecen por algunas generaciones ante s de que la acción de la sulf sulfonami onamida da tenga lugar y debido también, al hecho de que el medio d e Muell Mueller-Hi er-Hinton nton contiene Timidina la cual inhibe la actividad de la sulfonamida. Las cepas deProteus mirabilis y Proteus vulgaris pueden crecer dentro de los halos de inhibición alrededor de ciertos agentes antimicrobianos. Sin embargo, la zona de inhibición está usualmente bien delimitada y este tipo de crecimiento invasivo, debe ser ignorado.

M AY E BE RNAL R. . MIGUEL G U Z M A N

Si se necesita un re sultad o muy rápido, el diámetro de la zona de inhibición puede leerse después de 6-8 horas de incubación pero estas lecturas deben confirmarse posteriormente, al término del período de incubación incubación de 18 horas . INTERPRETACION INTERPRE TACION DE LOS RESULTADO RESULTADOS S Los resultados obtenidos deben interpretarse de acuerdo con el cuadro No. 3 En la interpretación de tales resultados es necesario tener en cuenta lo siguiente: El diámetro de la s zona s obtenid obtenido o con aminoglucósidos depende del medio utilizado, debido a la variación del contenido teni do de cationes y depende de la calidad del medio medio de Mueller-Hinto Mueller-Hinton n que ofrecen las casas productoras. Los rangos de interpretación son los siguientes: Resistente Resiste nte

Inde termin ter minado ado

Sensible Sensible

Amikacin

1 1

inm

12-15

mlri

16

iriin

(;enlaniicina

12

nim

13-16

irim

17

mm

Tobrarniciiia

min

13-16

nim

17 rnm

U

Cuadro

13-16 1316 mm pa ra cep as inde termi nadas y 2 17mm para cepas susceptibles, estas interpretacione interpr etacioness estan dar son tentativas, 7 . El disco disco par a ampicili ampicilina, na, es representativo de Hetacilina y Amoxicilina. De las penicilinas resistentes a las penicilinasas penicilinasas el disco clásico es la Meticilina y sus resultados son aplicables a: Cloxacilina, Dicloxacina, Oxacilina, Nafxilina. La Oxacilina y la Nafxilina son sin embargo, más resistentes a degradarse durante el periódo de almacenamiento. Los discos de Cloxacilina no deben usarse debido a que ellos no captan las cepas de Stap Staphilo hilococc coccus us a ure us res resisistentes a penicilina.

 

3

A N T l B l OGRAMA OGRAMA DE DISCOS l NTERP RETAC ON DE RESULTADOS RESULTADOS Zona ~l~~~

ANTIMICROBIANO

(mca

Inhibicl6n (mm)

~(54 I

\S >.)

OBSERVACIONES

Acido Nalldixico A c l d o O x o l in in i c o

l n f e c c i i u r iin n a rlrl a

Aml kacina Amoicilina Ampicill na

1

20

Haemophi ius

23

Proteus

16

17

P s ssu u d hm hm oh oh s a g l n o s a

17

18

17

18

17

18

16

17

17

18

19

Carbeniclllna

1

17

Carbenlcllina

1

13

14

Cefalotina

30

14

15

Cefamandole

30

14

15

Cafotaxlma

30

Cefoxltina

30

14

15

Clindamicina

2

14

15

Cloranfenicol

30

12

13

co~lstina

IO

8

9

Erltrom clna

15

13

14

18-22

-

-

1

I I

17

18

14

15

Gentamlclna

1

12

13

Kanamlclna

30

13

14

17

18

Neomicina

30

12

13

16

17

300

14

15

Nilrofuranta lna Oxacllina

5

10

Pmnlcllina G

10 U

20

Penicilina

IO U

G

Polimlxlna

S u lflf l s o x a r o l s Trfmetoprlm -Sulfa

13

30

14

15

125 m

10

10

R

Residente

=

28

12

30

12 9

Intermedio

17 13

2

300

Vancomlcina

16

- 1 2 12 9

Tobramiclna

-

2

8

300 U

B

Tetraclcl na

Las variaciones debidas a la influencia del medio son mucho más marcadas con la Pseudomonas Pseudomo nas aeru ginos a; por lo tan to, la zona indeterminada se basa sobre la medida del diámetro de la zona que se tenga con la cepa control de Pseudomonas aero ginosa AT ATCC CC 278 27853) 53) y es de 3 a 6 mm menos que cada medida. Por ejemplo, si el diámetro medio de la cepa control es de 19 mm la interpretación debe se r a 1 2 mm pa ra cep as resistententes,

No.

10

-

-

9

16

Infección urinarla

Infeccidn urinaria ~ Q ~ V I O C O C C U Q

22

Otros mlcmorganlsmos

12

pseudomonap

17

18

19

15

19

13

14 12

S

=

Sensible

:

Los datos de susceptibilidad para el Acido Nalid íco, Acido Oxolínico, C olistina, Nitrofurantoína y Sulfas diferentes a Trimetorm-Sulfa son válidos solamente para microoganismos aislados del tracto urinario. Algunos microorganismos tales como enterococos y bacilos Gram negativos que pueden cau sar infec infeccio ciones nes sic ém ic as responden a dósis altas de penicilina G la serisibilidad debe interpretarse según la tabla incluida. El disco de Cefalotina debe usarse para probar la susceptibilidad de todos los tipos de Cefalosporinas de primera generación, están incluidas en este grupo Cefalotina, Cefaloridina, Cefalexina, Cefazolina, Cafacetril, Cefradina y Cefapiri Cefapirina na entre ot ras . Las c epa s

EL A N T I B I O G R A M A D E DISCOS. NORMALIZACION D E L A TECNlCA DE K I R B Y B A U E R

de Sta phi loc occ us a e r e u s que mu es tr an resistencia a los discos de oxacilina deben reportarse como resistentes a los antibiótic ticos os tipo tipo cefalosporina, ssin in tener en cu enta el hal o de in inhibi hibición ción ya q ue e n la mayoría de las infecciones causadas por estos organismos hay una a las cefalosporinas, porresistencia tal mo moti tivo voclínica el disco de oxacili oxacilinade nade Smcg, Smcg, es val valid ido o pa ra las penicilinas-resistentes a penicilinasa y las cefalosporinas de primera generación; las de segunda y tercera deben probarse por separado ya que no hay sensibilidad cruzada entre ellas, 3 3.. El disco de Clindamicina debe usarse para probar la susceptibilidad tanto para la Clindamicina como para la Lincomicina. La Colistina y Polimixina B difunden muy pobremente en el agar por lo tanto la precisión de los procedimientos de susceptibilidad por el método de difusión es menor que con otros antibióticos. La resistencia es siempre significativa pero cuando se postula la posibilidad de usar tratamiento en infecciones producidas por cepas susceptibles, los resultados de las pruebas hechas por el método de difusión deberán confirmarse con procedimientos mediante el método de dilución. La concentración mínima inhibitoria [CIM) no puede c a l c u l a r s e c o n f i a b l e me me n t e p a r a e s t o s antibióticos por medio de los análisis de curva de regresión.

IN INFO FORM RME E DE LOS LOS RE RESU SULT LTAD ADOS OS.. El informe del resultado debe ser enviado médico médi co lo ma s pronto posible. Dicho informe debe ser sencillo, claro y preciso. Debe incluir, nombre d el pacient e, muestra estud iada, micr microorg oorganis anismo mo a islado y el listado de antibióticos a los cuales ha sido sensible. Para algunos médicos también es importante el listad listado o de antibió antibió-ticos a los cuales el microorganismo es resistente, por tanto dicha lista debe también incluirse. En algunas ocasiones los médi médicos cos tra ta nt es solicit solicitan an un antibió antibiótico tico específico; este resultado debe incluirse. Un mo model delo o de informe apa re ce e nl a figura N .3 FUENTE FUEN TES S DE ERROR EN EL ANTIBIOGRAMA ANTIBIO GRAMA PO POR R DISCO Frecuentemente algunos errores de tipo técnico pueden comprometer la seguridad y confiabilidad del antibiograma por discos ANTIBIOGRAMA INFORME

El disco de Tetraciclina es representativo de todas las tetraciclinas y su resultado aplic able, por tanto, a todos los microorga nis mo ~, si sin n embargo, muestran una mayor sensibilidad a la doxiciclina y minociclina.

 

RESULTADO

Nombre del paciente Medico cmwltank hbestra estudiada Mlcroorgimisrno aislado

I

U

Acido Nalidixico Aci&

Para antiobiograma de discos se puede utilizar cualquier disco comercial de sulfas de 250-300 mcg, interpretandose los resultados según la tabla incluida, los medios que contienen sangre no son, en general satisfactorios para antibiogramas de discos de sulfas, excepto si se usa sangre lisada de caballo, debe tenerse en cuenta que el Muel Muellerler-Hint Hinton on pa ra est e antibiograma debe ser en lo posible libre de Timidina.

DEL

DE DISCOS

Oxolinico

L1

14 Gentarnicina 15. 15. Konamicina

3 . Arnikacina Arnikacina

16 Nem icin a

4

17. 17. Nlhofu ranloin a

Arnpicilina

5

Carbenicilina

18. Oxacilin a

6

Cefalotina

19. Penicilina G

7. Cefarnandoie

P.Polirnixina

8

Cefatarima

21. Sulfisoxazole

9

Cefoxitina

23. Trirnetoprirn-Sulfa

l. Cloranfeniml 12. Colistina 13. Eritromicina

4

Tokarnicina

5

Vancomicina

26. S I MBOLOS

INTERPRETACION

ENSIBLE

NO

ESISTENTE

por no

I N T E R ME D IO IO

Figura

3

8

Tetraciclina

10. Clindarnicina

m m

•

8 piobd aam on