Amilasa Salival

Introducción. Las enzimas son proteínas cuya función es catalizar reacciones químicas, es decir, acelerarlas, ya sea a nivel celular o fuera de ellas. Logran su efecto mediante la reducción de la energía de activación. Se caracterizan por actuar en bajas concentraciones, no sufrir modificaciones durante su acción, no alterar el equilibrio de la reacción sólo su velocidad y ser específicas. Esta última característica determina que las enzimas actúen en rangos específicos tanto de temperatura como de pH. En cuanto al primer factor, sumado a la característica de ser estructuras proteicas, provoca que puedan ser desnaturalizadas a medida que se aumenta la temperatura y así perder su actividad biológica. En relación al pH, las enzimas pueden cambiar de un estado ionizado a uno sin carga. Estos catalizadores poseen un valor óptimo, en el cual puede realizar su función y cualquier variación del mismo le afectará. Dentro del proceso digestivo es necesario degradar las biomoléculas a niveles más sencillos para poder absorbidas, reacciones en las cuales actúan diversas enzimas, entre las que se cuenta la Amilasa Salival o ptialina, que participa en la degradación de Almidón, obteniéndose Maltosa y Glucosa. Con el fin de determinar la actividad enzimática se planteó determinar el efecto de la temperatura sobre esta enzima y determinar el efecto del pH sobre la actividad enzimática de la Amilasa Salival.

Materiales y Métodos. Se obtuvieron 10 ml de saliva, de ellos 5 ml fueron diluidos en 15 ml de agua destilada para forma la solución 1:3. De esta solución se agregó 1 ml a 4 tubos de ensayo para el análisis del efecto de la temperatura. Cada tubo de ensayos fue sometido a una temperatura diferente (0°; T° Ambiente; 38°; 100°) durante 5 minutos, tiempo luego del cual se les agregaron 5 ml de solución de almidón 1%. A cada tubo se le aplicó la solución de Felhing, para luego observar los resultados. Se agregó también a 3 tubos de ensayo 1,5 ml de la solución 1:3, esta vez para medir el efecto del pH, posteriormente se añadió a cada tubo una solución buffer (pH 2,5; pH 7,0; pH 10,0). Los tubos se mantuvieron por 5 minutos a 38° C, luego de lo cual a cada tubo se añadieron 5ml de almidón al 2%. Se aplicó reactivo de Felhing a cada tubo y se observaron los resultados.

Resultados. Tabla 1: Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática de la Amilasa Salival.

Tubo N° 1

Temperat ura

2

0° T° Ambiente

3

38°

4

100°

Resultados No hubo cambios. Coloración: Azul intenso No hubo cambios. Coloración: Azul intenso Coloración: Verde opaco fuerte. Aspecto sucio Coloración: Azul verdoso. Azul en mayor intensidad.

La Tabla 1 muestra los resultados obtenidos, en relación al efecto de la temperatura sobre la Amilasa Salival, para las temperaturas: 0°; T°; 38°; 100°. A los 0°C no se observaron cambios de coloración, se mantuvo el color azul intenso que quedó luego de la aplicación del reactivo de Felhing. En cuanto al tubo sometido a T° Ambiente, al igual que a los 0°, no hubo cambios. El tubo que se mantuvo a 38°C presentó una variación de color, presentándose una coloración Verde opaca, con pequeñas zonas en que se observaron colores azul y gris, en pequeña cantidad. Para los 100° se observó un color azul intenso, mostrándose una leve tendencia a una coloración débil de color verde, pero se mantuvo el azul, mismo color luego de aplicar Felhing.

Tabla 2: Efecto del pH sobre la actividad enzimática de la Amilasa Salival. Tubo N°

pH

1

2,5

Mantiene color solución 1:3. Aspecto sucio

2

7,0

3

10,0

Coloración: Azul con tintes morado tenue. Formación de precipitado color Azul Intenso. Color de solución: Se mantiene

Resultados

La Tabla 2 muestra los resultados observados en relación al efecto del pH sobre la Amilasa Salival. Con respecto al tubo N°1 se observó una coloración similar con la solución 1:3, pero con una mayor concentración. En relación a lo visto en tubo con la solución de pH 7,0 hubo un leve cambio de coloración, marcándose un tenue tono morado en la solución. En el Tubo 3 (pH 10,0) se observó la formación de un precipitado de color azul intenso, en tanto que la solución mantuvo el color luego de aplicar Reactivo de Felhing.

Discusión y Conclusión.

Bibliografía. •

PEÑA, Awilda. 2004. Digestión de Carbohidratos por Amilasa Salival. Área de Ciencias Fisiológicas, Departamento de Medicina, PUCMM. Santiago, Rep. Dominicana.

Sitios Web. •

GONZÁLEZ, Carlos. Enzimas. diciembre 2010]

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[en [consulta:

07

línea] de

Fundación Educacional Padre Manuel Tomás Albornoz Colegio San Alberto Hurtado Departamento de Ciencias Profesor: Daniel Piñones Tapia

Efecto de la Temperatura y el pH sobre la actividad enzimática de la Amilasa Salival.

Nombre:

Matías A. Jara Varas

Curso:

III° Medio B

Fecha de Entrega: