Aislamiento de Psicrofilos

 

 

AISLAMIENTO DE PSICROFILOS  PSICROFILOS  GUIA EXPERIMENTAL

 

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JETIVO

INTRODUCCION:

Los microorganismos psicrófilos también son conocidos como criófilos, prefieren activamente las temperaturas bajas, y crecen en medios fríos casi tan rápido como los microorganismos ordinarios lo hacen en medios cálidos. De ahí se suele inferir que poseen tipos especiales de enzimas que realmente funcionan más de prisa a temperaturas bajas que los correspondientes a los microorganismos normales, pero estas enzimas son más fácilmente destruidas por el calor, lo que puede explicar por qué estos psicrófilos mueren si la temperatura temperatur a sube por encima de 20º. Estos microorgani microorganismos smos tienen membranas celulares de una composición de grasa especial, de manera que son relativamente fluidas a temperaturas cercanas al punto de congelación, pero estas se vuelven demasiado fluidas, y empiezan a fundirse, a temperatura que la mayoría de microorganismos microorganis mos prefieren. Los trabajos más recientes sobre psicrófilos, en cuanto a aislamiento son realizados en ambientes muy fríos, por lo general bajo cero, los ambientes acuáticos, incluyendo el fondo del mar (-1 ° C a 4 ° C), el  Ártico y los hábitats marinos de la Antártida (agua de mar y sedimentos cerca de -1 ° C y el hielo marino, donde los fluidos internos permanezcan en estado líquido a -35 ° C en invierno), el hielo glaciar, lagos (hasta -5 ° C). El aislamiento de microorganismos a partir de muestras naturales se realiza, en la mayoría de los casos, mediante la producción de colonias aisladas en cultivos sólidos. El crecimiento explosivo de los microorganismos permite producir un gran número de ellos a partir de una única célula inicial de forma que, tras un periodo de incubación en las condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple vista y formada por individuos iguales.

Aislar colonias de psicrofilos para su estudio

Poder determinar las características de las colonias de psicrofilos si se llegan a encontrar en las placas

Como regla general, es mejor utilizar una serie de medios diferentes cuando se hacen aislamientos primarios y siempre se debe incluir algunos medios diluidos, que se podrán complementar con bajas concentraciones de extracto de levadura (0.01- 0,001%) para garantizar que la vitamina y el cofactor cumplan los requisitos para los organismos exigentes. No hay medios que son específicos para los diferentes grupos de microorganismos psicrófilos En cuanto a la temperatura de incubación, es mejor que las placas y cultivos líquidos de aislamientos primarios de bacterias, estén por debajo de 5°C. Para las levaduras, hongos y algas, temperaturas tan bajas como 10°C son probablemente suficientes. Las placas deben ser incubadas durante al menos 2 semanas, mientras más tiempo se  

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incuben las placas es la mejor, porque, aunque la mayoría de microorganismos psicrófilos forma colonias visibles dentro de 1 mes a 5°C, algunos microorganismos crecen más lentamente. MATERIALES:

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Plate count agar Pipetas Agua peptonada Balanza Placas Petri Propipetas Filete de pescado congelado

PROCEDIMIENTO

Tomar 10g de filete de pescado congelado y triturarla con 90ml de agua peptona , dejar que se sedimente la mezcla

Con la ayuda de una pipeta y propipeta sacar 10ml de la mezcla y realizar disoluciones de 101,10-2 y 10-3

Poner 1mL de cada disolución decimal en placas de Petri

 Añadir 15 mL de de medio de cul cultivo tivo (Plate coun countt agar) distribuyéndolo distribuyéndolo bien en las placas

Incubar la serie de placas a 20°C por un periodo de 3 dias

Después de la incubación se puede estudiar las colonias de psicrofilos en la placa donde se puede hallar el recuento de UFC

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