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COPROCULTIVO

CURSO DE FORMACIÓN CONTINUADA CONTINUADA A DISTANCIA DIST ANCIA 2010-2011

ACTUALIZACIONES ACTU ALIZACIONES EN EL LABORATORIO CLÍNICO Nº 3

I.S.S.N.- 1988-7477 Título: Actualizaciones en el Laboratorio Clínico Editor: Asociación Española de Biopatología Médica Maquetación: AEBM Fecha de Distribución: enero 2011

Coprocultivo Germán Seseña del Olmo.-  Facultativo Especialista de Área. Servicio de Microbiología del Hospital Virgen de la Luz. Cuenca.

1. INTRODUCCIÓN Las gastroenteritis agudas son uno de los motivos de consulta más frecuentes en nuestro medio y una de las causas más importantes de morbimortalidad en el tercer mundo. La etiología de las diarreas es muy extensa: síndromes de malabsorción, procesos tumorales, patologías de origen endocrinológico, enfermedades inflamatorias intestinales, aunque de todas estas etiologías la más frecuente es la infecciosa. Dentro de la etiología infecciosa las diarreas pueden estar producidas por virus, bacterias, micobacterias y parásitos. Los mecanismos por los que las bacterias producen diarrea son fundamentalmente la producción de enterotoxinas y la invasión directa de la mucosa del colon. En este tema vamos a repasar el diagnóstico de las gastroenteritis a través del coprocultivo revisando brevemente la clínica y el tratamiento de los cuadros diarreicos más frecuentes producidos por bacterias.

2. INDICACIONES DEL COPROCULTIVO No todo cuadro diarreico es susceptible de ser estudiado mediante coprocultivo, dado que la mayoría de estos procesos son autolimitados. Este

dato, unido a la escasa rentabilidad de la prueba, hace que el coprocultivo esté indicado únicamente en los siguientes casos: - Cuadros graves que requieran hospitalización. - Persistencia prolongada de la diarrea. - Pacientes inmunodeprimidos. - Niños y ancianos; en estos pacientes la realización del coprocultivo debe valorarse de manera individualizada, dado que en estos grupos la morbilidad es mayor.

3. MUESTRA Las heces han de ser recogidas en un recipiente de boca ancha (el mismo contenedor utilizado para la recogida de orina puede ser útil) y aunque no es condición imprescindible, preferentemente estéril. Las muestras han de ser enviadas al laboratorio tan pronto como sea posible. Las heces recogidas con escobillón no son recomendables para este tipo de estudios aunque pueden utilizarse si la obtención de heces no es posible.  Algunos autores señalan que la recuperación de Shigella spp  y Clostridium difficile  por medio de escobillón podría ser más rentable 1.

Con una cantidad equivalente al tamaño de una nuez es más que suficiente para realizar todos los estudios preceptivos. En ocasiones el paciente no ha sido instruido en estas labores y es enviada una cantidad insuficiente de muestra para realizar el coprocultivo, en cuyo caso habrá que solicitar nueva muestra, otras veces es enviada

al laboratorio una cantidad excesiva de

muestra que puede llegar a fermentar, produciendo, por los gases emitidos,

deformidad del propio contenedor, en estos casos es aconsejable desechar la muestra por el peligro que puede conllevar su manipulación, solicitando igualmente una nueva muestra. Si las heces no pueden procesarse inmediatamente se pueden conservar en nevera 24 horas, aunque en laboratorios sin actividad asistencial durante los fines de semana, esta norma tendrá que obviarse por necesidad.

4. SIEMBRA La siembra se llevará a cabo con asa (plástico o metálica) realizando una descarga en los medios seleccionados. Hay que ser especialmente cuidadoso a la hora de extender la muestra en el medio, procurando que los microorganismos queden lo más reaislados posible, debido a la gran carga bacteriana que suele haber en la muestra. Si las heces son líquidas puede emplearse una pipeta para realizar la siembra. Si la muestra es dura se puede diluir una pequeña cantidad en suero para realizarla. Se escogerá preferentemente aquella parte de la muestra que contenga sangre, moco o pus para obtener una mayor rentabilidad.

5. MEDIOS DE CULTIVO Cada laboratorio adecua los medios a utilizar dependiendo de la etiología de las gastroenteritis en su entorno y de la capacidad del mismo. Los medios más utilizados en la práctica clínica pueden dividirse en tres grupos 2:

-

Escasamente selectivos; inhiben el crecimiento de microorganismos Gram positivos; entre ellos el agar MacConkey y el agar EMB (Levine).

-

Moderadamente selectivos; inhiben el crecimiento de Gram positivos y algunos coliformes; agar entérico de Hektoen, agar Xilosa-LisinaDesoxicolato (XLD), agar Salmonella-Shigella  (SS) y agar de Rambach.

-

 Altamente selectivos; de uso más restringido, permiten el aislamiento de Salmonella   ; agar sulfito de bismuto (Wilson-Blair) y el agar verde

brillante.

 Además de estos medios sólidos se utilizan también medios líquidos de enriquecimiento; caldo de selenito, tetrationato y Vassiliadis-Rappaport. Tras la inoculación de estos, los medios se incuban 18 horas haciendo un subcultivo a los medios sólidos. El retraso del subcultivo puede complicar la recuperación del microorganismo estudiado debido a que, pasado un umbral de tiempo, la flora coliforme tiende a sobrecrecer. En algunos laboratorios se incluyen medios no selectivos como agar sangre para evaluar el tipo de flora que presenta el paciente. Esta estrategia permite realizar oxidasa directamente a la colonia sugerente de  Aeromonas spp., Plesiomonas spp, y Vibrio spp. como veremos más adelante.

6. INFORME DE RESULTADOS Cuando en la muestra se aísla una de las bacterias motivo de estudio se informará como tal así como el antibiograma preceptivo. De no aislarse ningún

patógeno, se debe emitir un informe acorde con el resultado obtenido dependiendo del crecimiento de las placas: si el cultivo ha sido estéril, se puede emitir el siguiente resultado:

“A usencia

de flora saprofita habitual, no se aísla

flora patógena ” ,  esta circunstancia es típica en pacientes ingresados que están

recibiendo tratamiento antibiótico de amplio espectro. Si hubiera crecimiento de coliformes y enterococos el informe podría ser el siguiente:  “Flora entérica habitual” .  Algunos laboratorios optan por incluir en su informe todas aquellas bacterias que serían capaces de aislar en función de los medios de cultivo utilizados, de esta manera el clínico cuenta con una información adicional; el resultado de no aislarse ningún patógeno podría ser el siguiente: “No se aísla Salmonella spp, Shigella spp , Campylobacter spp  ni Yersinia spp ” , de esta

manera el clínico estaría advertido de que no se han incluido placas específicas para el estudio de E. coli  productora de diarrea. Es importante señalar la escasa rentabilidad del coprocultivo que se estima en torno al 1,5-5,6 % 3.

7. ESQUEMÁTICA DE TRABAJO Como hemos señalado anteriormente, cada laboratorio adecúa la siembra dirigida fundamentalmente a los microorganismos más prevalentes en su área, así como a la capacidad de trabajo del mismo. El esquema de trabajo que se presenta a continuación es meramente orientativo, aunque con pequeños cambios es el más seguido en la mayoría de los laboratorios clínicos.

Esquema de trabajo para una sección de coprocultivos

 Agar sangre 1

Tipo

de

flora,

ausencia

de

la

misma.

Oxidasa ( Aeromonas, Plesiomonas, Vibrio )

Mackonkey

1

Identificar colonias lactosa negativo

1

Medio SS

Identificar colonias lactosa negativo y sulfhídricas

 Yersinia (CIN) 1

Campylobacter

Selenito

Identificar colonias puntiformes rosadas

2

1

Identificar colonias brillo rosado metálico; Gram

Subcultivo a medio SS

1

 incubación 18 horas

2

 incubación 18-48 horas

La identificación

de género y especie de cepas presuntivas de ser

patógenas no es necesario en la mayoría de los casos, por lo que se puede aplicar previamente una batería de pruebas bioquímicas para eliminar aquellas cepas que resulten ser lactosa positiva o productoras de ureasa (excepto algunas cepas de Yersinia enterocolitica ). La realización de un Kliger o de un TSI (según la experiencia en cada laboratorio) junto con las pruebas de urea e

indol, de fácil acceso y realización, pueden cribar muchas cepas no patógenas y que por tanto no habría que identificar.

8. BACTERIAS IMPLICADAS EN LA PRODUCCIÓN DE DIARREA 8.1  Salmonella spp Salmonella spp   es en nuestro medio junto con Campylobacter spp  la

causa de diarrea bacteriana más frecuente. Es un enterobacteria que se caracteriza por no fermentar la lactosa, producción de sulfhídrico y pruebas de indol y ureasa negativas. Posee antígenos somáticos (O) que son lipopolisacáridos y antígenos flagelares (H) que son proteínas. S. typhi   posee un antígeno capsular o de virulencia (Vi). Desde que se describió, la nomenclatura para el género Salmonella  ha sido tema de continua discusión. En la actualidad existen hay más de 2.400 serotipos descritos. En la práctica habitual las cepas con pruebas bioquímicas compatibles con Salmonella spp   se confirman utilizando antisueros policlonales que contienen anticuerpos contra los subgrupos más frecuentes. Estas pruebas no son del todo específicas por lo que es necesario identificar por otros medios la colonia (API, Microsan, Vitek). Existen cepas de Citrobacter spp  y Proteus spp  capaces de aglutinar a los antisueros descritos. S. typhi   produce menor cantidad de sulfhídrico, que se traduce en una

media luna sulfhídrica en el TSI o Kliger, además presenta prueba del citrato negativa, a diferencia de las salmonellas entéricas.

Salmonella spp  en medio SS (Asa calibrada 1/400)

Salmonella spp   puede encontrarse en la carne cruda y en huevos. Se ha

aislado también en mascotas habiéndose descrito varios brotes en relación con el cuidado de reptiles 4. El hombre es el único reservorio para S. typhi 5. El período de incubación oscila entre las 8 y las 48 horas Produce un cuadro de gastroenteritis de intensidad variable que puede llegar a cursar con bacteriemia hasta en el 5 al 10% de los casos. S. typhi , causante de la fiebre tifoidea, en los primeros estadios de la enfermedad puede cursar con estreñimiento. Tras la infección, Salmonella spp  sigue excretándose en heces durante 4 a 5 semanas. El estado de portador crónico se define a los seis meses tras la infección por lo que no está indicado hacer controles hasta esta fecha. La

vesícula biliar es el principal órgano donde se acantona el microorganismo. Se estima que la tasa de portadores crónicos es inferior al 1%. Salmonella spp   presenta especial afinidad por los injertos protésicos

vasculares, aneurismas aórticos y placas de ateroesclerosis por lo que hay que prestar especial atención a las infecciones en ancianos. La afectación ósea por Salmonella spp   se ha relacionado sobre todo en casos de drepanocitosis. El tratamiento de elección de Salmonella spp   son las penicilinas y las quinolonas. El cotrimoxazol puede ser también buena elección. Aunque in vitro Salmonella spp   presenta buen perfil de sensibilidad frente a cefalosporinas de

primera y segunda generación así como aminoglucósidos no deben utilizarse en el tratamiento.

8.2 Campylobacter spp Es un bacilo Gram negativo curvo microaerófilo que se caracteriza por ser oxidasa positiva. Las especies más frecuentemente aisladas en cuadros diarreicos son Campylobacter jejuni  y Campylobacter coli Campylobacter spp  es capaz de crecer a 42º C. Esta característica puede

ser útil para su aislamiento, ya que si las placas se incuban a esta temperatura inhibiremos el crecimiento de aquellos microorganismos que no son capaces de crecer a esta temperatura. Para su aislamiento se utilizan medios selectivos entre los que están el medio de Butzler, agar sangre de Skirrow, medio de Blazer y el medio de

Preston. La colonia crece presentando un brillo metálico de tonalidad rosácea. Las colonias tienden a crecer en la placa de manera confluente a lo largo de la línea de siembra. La incubación de las placas debe realizarse en situación de microaerofilia. El crecimiento puede observarse a las 24 horas aunque no se puede dar un resultado negativo hasta después de 48 horas de incubación. A las colonias sugerentes de ser Campylobacter spp , se les realiza una tinción de Gram para ver su morfología típica. Esta morfología de bacilo curvo podría permitir su identificación en la propia muestra. En algunos laboratorios cuando hay sospecha de que es Campylobacter spp   el microorganismo implicado en el cuadro diarreico, se realiza una tinción de Gram a las heces, con lo que se adelanta el diagnóstico etiológico. Es importante señalar que una incubación prolongada de las placas (fines de semana en laboratorios sin actividad asistencial) puede ocasionar que la morfología del Gram se desvirtúe y se pierda la forma típica de bacilo curvo, pudiendo simular la morfología de una enterobacteria o incluso formas cocoides. Para la identificación definitiva se pueden utilizar los sistemas de caracterización habituales; galerías API, VITEK 2. En nuestra opinión es suficiente con realizar la prueba del hipurato (positiva para Campylobcter jejuni ) ya que la gran mayoría de los cuadros son producidos por esta especie.

Campylobacter jejuni  tras incubación de 48 horas (Asa calibrada 1/400)

Es común el aislamiento de Campylobacter spp   en carne, sobre todo de pollo además de en la leche. Campylobacter spp   produce una diarrea típicamente con moco y sangre,

que puede tener afectación general con fiebre alta. El cuadro puede persistir varios días e incluso semanas. Se han descrito cuadros de artritis reactiva y síndrome de Guillain-Barré asociados a la infección por Campylobacter spp . El tratamiento de elección es la eritromicina. Se ha descrito en los últimos años un incremento muy significativo de la tasa de resistencia a quinolonas. No hay puntos de sensibilidad para los antibióticos de la CLSI para Campylobacter spp , lo que se traduce en una actitud muy heterogénea de

actuación por parte de cada laboratorio en este sentido. Hay laboratorios que obvian realizar el antibiograma, otros eligen un grupo de antibióticos entre los que no pueden faltar la eritromicina, realizando el antibiograma en medio BHI o similar. 8.3 Sighella spp Pertenecen a la familia Escherichiae . Se caracterizan por ser inertes a la mayoría de las pruebas bioquímicas. No fermentan la lactosa y sólo algunos biotipos de S. flexneri  producen gas. Existen cuatro subgrupos –

–

–

–

S. dysenteriae S. flexneri S. sonnei S. boydii

Para su aislamiento se utilizan medios entéricos como el agar MacKonkey o el SS. Su identificación se lleva a cabo en primera instancia por medio de antisueros que determinan el subgrupo. Después se lleva a cabo la identificación de confirmación con los sistemas habituales. El período de incubación va desde las 6 horas hasta los 9 días, siendo las 72 horas lo más habitual. La diarrea puede acompañarse de cefalea, meningismo y convulsiones, sobre todo en niños Se han descrito cuadros de artritis tras dos a cinco semanas del cuadro agudo, asociada al antígeno de histocompatibilidad HLA B-27.

La obstrucción intestinal, que se da hasta en el 3% de los casos es un signo de mal pronóstico. Puede asociarse a síndrome urémico-hemolítico. También se han descrito cuadros de conjuntivitis por autoinoculación.

8.4 Yersinia enterocolitica Son cocobacilos Gram negativos no esporulados. Para el diagnóstico de laboratorio el medio más adecuado es el CIN (cefsulodina-irgasan-novobiocina) 6. La incubación de este medio se realiza a 30º C durante 18 horas, aunque algunos autores señalan que la incubación a temperatura ambiente puede ser igualmente válida. Las colonias de Yersinia  enterocolitica   presentan en este medio un aspecto característico; son colonias

puntiformes, con el centro rosado, rodeadas de un halo transparente. Después de las primeras 24 horas de incubación, esta forma típica de la colonia se desvirtúa lo que complica la lectura de estas placas si no puede hacerse dentro de este período de tiempo. Las colonias de  Aeromonas spp   crecen bien en este medio, presentando colonias de tamaño mayor. El inconveniente para la identificación de  Aeromonas spp   en este medio es que no se puede realizar la prueba de la

oxidasa directamente, por lo que habría que hacer un subcultivo en agar sangre para comprobar la prueba de oxidasa, positiva para este género. Yersinia enterocolitica   posee varios reservorios animales, entre los que

destaca el cerdo.

El período de incubación va de uno a tres días. Produce habitualmente un cuadro de disentería con fiebre y afectación general. En ocasiones puede llegar a producir adenitis mesentérica presentando una clínica parecida al de una apendicitis aguda. También se han descrito, en relación con la infección por Yersinia enterocolitica, cuadros de poliartralgias migratorias y eritema nodoso.

El tratamiento de elección es el ciprofloxacino 7, como alternativas puede utilizarse cotrimoxazol o doxiciclina. En bacteriemias y localizaciones extraintestinales el tratamiento de elección sería una cefalosporina de tercera generación asociada a gentamicina.

8.5 Aeromonas spp  Son bacilos Gram negativos, oxidasa positiva. Se han relacionado varias especies de  Aeromonas   con cuadros diarreicos;  A. hydrophila, A. caviae, A. media y A. veronii , siendo la primera de ellas la más frecuentemente implicada. Se pueden recuperar de los medios agar sangre y del medio CIN, como hemos visto anteriormente. Su identificación definitiva se puede obtener a través de los métodos automatizados habituales, aunque la similitud bioquímica que presenta con algunos vibrios puede llevar a confundirla con estos. Para salvar este obstáculo puede utilizarse el factor vibriostático.

 Aeromonas hydrophila  en medio CIN (Asa calibrada 1/400)

Se asocia a cuadro de gastroenteritis de 3 días de duración, con deposiciones líquidas, con moco y acompañada de dolor abdominal. Los aislamientos de  Aeromonas spp   se han de valorar con precaución debido a que su presencia en las heces no siempre se relaciona con cuadros diarreicos, pudiendo ser un hallazgo casual. El tratamiento se realiza con quinolonas o cotrimoxazol. Si la infección es diseminada se pueden utilizar cefalosporinas de tercera generación o un carbapenem.

8.6 E. coli Hay seis mecanismos distintos por los que E. coli   puede producir diarrea: E. coli   enterotoxigénico, enteropatógeno, enteroinvasivo, enterohemorrágico,

enteroagregante y difusamente adherente. La diarrea del viajero es causada más frecuentemente por E. coli  enterotoxigénico 8. La mayoría de estos cuadros son autolimitados, si bien E. coli  enterohemorrágico se ha visto relacionado con la producción de colitis hemorrágica y con el síndrome urémico-hemolítico, sobre todo en niños y ancianos. E. coli   0157:H7 enterohemorrágico fue el primero de los serotipos

productores de toxina Shiga del que se supo que era capaz de producir enfermedad en humanos. La producción de toxina Shiga no es por sí sola suficiente para producir enfermedad. Hay otros factores de virulencia que incluyen la presencia de un plásmido (p0157) además del locus de borramiento del enterocito (LEE). El plásmido codifica una enterohemolisina (EHEC_Hly) que permite que el microorganismo utilice la hemoglobina como fuente de hierro. El LEE contiene genes para la síntesis de una molécula de adhesión (timina) además de otros factores para su fijación. Para su aislamiento en el laboratorio se utiliza el medio MacKonkey Sorbitol. Estas cepas de E. coli   no fermentan el sorbitol, lo que hace que en este medio aparezcan como colonias blancas, a diferencia de las que fermentan el sorbitol (colonias rosas). A estas colonias se las aglutina posteriormente con

antisueros frente a los serotipos descritos hasta la fecha capaces de producir diarrea. Después habría que confirmar la existencia de los mecanismos patógenos anteriormente descritos. Se han desarrollado kits comerciales para determinar este patrón; hasta hace pocos años, este último paso sólo se llevaba a cabo en laboratorios de referencia. El inicio de la clínica producida por este microorganismo viene definida por cólicos y diarrea que en uno a dos días se torna sanguinolenta. Según algunos autores el tratamiento con antibiótico podría aumentar la producción de toxina Shiga, empeorando el cuadro. De hacerse, la elección serían las quinolonas y las penicilinas.

8.7 Plesiomonas shigelloides Plesiomonas shigelloides   es la única especie de este género, se trata de un

bacilo Gram negativo oxidasa positiva. Crece bien en agar sangre y en los medios entéricos. Presenta colonias no hemolíticas grises, brillantes y opacas, pudiendo estar sobreelevadas en el medio. Se ha asociado a un cuadro de diarrea acuosa leve.

8.8 Vibrio spp Son bacilos Gram negativos curvos o con forma de coma. Son catalasa y oxidasa positivas. Fermentan la D-glucosa, raramente producen gas y reducen nitratos a nitritos.

Se caracterizan además por ser sensibles al factor vibriostático 0/129, aunque se han descrito algunas cepas resistentes en la India y Bangladesh. La búsqueda de este microorganismo no se hace de rutina en la mayoría de los laboratorios, por lo que es importante conocer la exposición del paciente en zonas o situaciones concretas. Crecen en agar Mackonkey como colonias lactosa negativas, excepto V. vulnificus   que fermenta la lactosa. Para su aislamiento específico suele

utilizarse el medio TCBS (tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa). Las colonias de V. cholerae   crecen de color amarillo y con un diámetro de 2 a 3 mm. Desde

este medio no puede realizarse directamente la prueba de la oxidasa. Se puede utilizar agua peptonada alcalina como caldo de enriquecimiento para Vibrio spp. este caldo contiene peptona al 1% y NaCl al 1% a un pH de 8,6. Este pH alto inhibe el crecimiento de bacterias intestinales comensales. El mismo caldo podría utilizarse igualmente como medio de transporte. Se asocian con cuadro diarreicos V. cholerae, V. fluviales, V. furnisii, V. hollisae, V. mimicus  y V. parahaemolyticus 9. V. cholerae  se divide en 3 subgrupos; 01, 0139 y Non 01

El subgrupo 01 se ha asociado con cuadros más graves en pacientes con grupo sanguíneo O. El subgrupo 0139 ha sido descrito recientemente en India y Bangladesh, produciendo un cuadro diarreico de gravedad similar al 01. El subgrupo Non 01 se caracteriza por no producir toxina colérica. Los cuadros diarreicos producidos por este subgrupo son en general menos graves que los producidos por el 01.

La identificación de V. cholerae   01 en situaciones especiales de epidemias puede realizarse con antisuero. Otras técnicas también empleadas son la coaglutinación, la fluorescencia directa y la aglutinación con látex. En situaciones normales se puede utilizar para el cribado de colonias sugerentes el factor vibriostático, para una identificación posterior con galerías API u otros sistemas automatizados. La diarrea causada por V. cholerae  es una cuadro potencialmente mortal sin tratamiento. La característica de la enfermedad es la grave deshidratación debido al elevado número de deposiciones acuosas que sufre el paciente. Puede haber hasta 30-40 deposiciones al día, con un aspecto característico de “agua de arroz” . El paciente no suele presentar fiebre.

El tratamiento debe ir encaminado a corregir la severa deshidratación. La reposición de líquidos debe ser rápida y constante. La administración de antibióticos puede acortar la duración del cuadro. Se utilizan tetraciclinas, quinolonas y cotrimoxazol.

8.9 Clostridium difficile La diarrea por este microorganismo se asocia generalmente a ciclos de antibióticos previos en pacientes ingresados, aunque se han descrito casos en los que falta este antecedente.  Aunque se han relacionado la práctica totalidad de antibióticos con la diarrea asociada a Clostridium difficile , el más frecuentemente documentado ha sido la clindamicina.

El diagnóstico de este cuadro suele hacerse en la mayoría de los laboratorios mediante la detección de toxinas (A o B). Hay kits de inmunocromatografía disponibles en el mercado muy sencillos de realizar. En algunos laboratorios se lleva a cabo el cultivo de heces para el diagnóstico. Es un tema controvertido, debido a que este microorganismo puede ser comensal intestinal, por lo que su aislamiento no tendría por qué estar relacionado siempre con patología. El cultivo se debe hacer en condiciones de anaerobiosis. El cuadro clínico es muy variado y puede ir desde una diarrea autolimitada hasta un cuadro diarreico severo. También se han descrito casos de megacolon e incluso estallido colónico. En el tratamiento se utiliza metronidazol o vancomicina oral.

8.10 Otras bacterias. Edwarsiella tarda es una enterobacteria capaz de producir cuadros

diarreicos en humanos. Se caracteriza por ser indistinguible de Salmonella spp  en medio SS, aunque se diferencia de la misma por presentar prueba del indol positiva. Sus principales reservorios son los reptiles y los peces de agua dulce. Produce un cuadro diarreico leve que mejora sin tratamiento, aunque se han descrito casos graves asociados a infección por esta bacteria. La asociación de  Moellerella wisconsensis con cuadros diarreicos es controvertida. Es una enterobacteria que se caracteriza por ser resistente a colistina.

Otras bacterias relacionadas con cuadros de gastroenteritis cuyo diagnóstico no suele hacerse mediante coprocultivo son Clostridium perfringens, Clostridium botulinum, Staphylococcus aureus y  Listeria monocytogenes

9. NUEVAS HERRAMIENTAS En los últimos años el diagnóstico de las gastroenteritis bacterianas no ha sufrido grandes modificaciones. Se han incluido nuevos medios de cultivo cromogénicos que son capaces de diferenciar distintos tipos de bacterias, si bien no han demostrado una mayor tasa en la recuperación de enteropatógenos. También se han incluido pruebas rápidas para el cribado de cepas no patógenas aprovechando alguna de sus pruebas bioquímicas. Como novedad se ha desarrollado el sistema Robobact

10

, un nuevo

aparato capaz de realizar la siembra e incubación tras la inoculación de la muestra en medios de enriquecimiento.

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