25.08.11Quimica Forense en La Investigacion Del Delito

QUIMICA FORENSE EN LA INVESTIGACION DEL DELITO

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QUIMICA FORENSE EN LA INVESTIGACION DEL DELITO MYRIAM ANTONIA FERNÁNDEZ BARRIENTOS

DEPARTAMENTO DE PUBLICACIONES POLICIA NACIONAL ASUNCIÓN – PARAGUAY AÑO 2006

Myriam Antonia Fernández Barrientos

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QUIMICA FORENSE EN LA INVESTIGACION DEL DELITO Myriam Antonia Fernández Barrientos Registro Nº 5644, Libro A, Foja 07. Dirección Nacional de Derecho de Autor Ministerio de Industria y Comercio Diseño, Dibujos, Compaginación, Impresión y Encuadernación: La autora y Personal Técnico del Departamento de Publicaciones de la Policía Nacional. Fotografías, colaboración de Oscar Migdonio Aguayo Viera, Perito en Accidentología Vial y Documentología

Departamento de Publicaciones de la Policía Nacional Jefe: Ediciones: Imprenta: Dirección:

FOTOCOPIAR ES DELITO. Todos los derechos son reservados. No se permite la reproducción total o parcial de este libro, así como tampoco su incorporación a un sistema informático, ni su transmisión en cualquier forma o por cualquier medio, sea este electrónico, mecánico, por fotocopia, por grabación u otros métodos sin permiso escrito de la autora y el editor.

Myriam Antonia Fernández Barrientos

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DEDICADO A mis hijos Victor Manuel, Alejandro Rafael y Lucas Daniel. por el tiempo cedido y la paciencia de esperar a mamá; a ellos como legado de esfuerzo y testimonio de superación.

AGRADECIDA ETERNAMENTE A mis padres Rafael y Juanita por sus ejemplos, enseñanzas y apoyo de siempre. A mi esposo Arsenio, por su comprensión y apoyo constante para alcanzar mis anhelos. A mis compañeros y compañeras de la Policía Nacional, por las experiencias compartidas; que me fortalecieron profesionalmente.

Myriam Antonia

Myriam Antonia Fernández Barrientos

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PROLOGO Prologar un libro científico, sea tal vez, la más difícil tarea que hasta la fecha me ha presentado la docencia, preferiría corregir una pila de exámenes. Sin embargo lo que la Dra. Myriam Fernández me pide con verdadera modestia, me llena no sólo de satisfacción y orgullo, por tratarse ella de una de mis primeras seguidoras en el ámbito forense, sino que fundamentalmente, me coloca ante un gran compromiso: “evaluar un trabajo que a simple vista refleja su gran dedicación y esmero y luego tener que presentarlo”.

La obra presenta un triple propósito, dirigida principalmente al estudiante de las Ciencias Criminalísticas, con el fin de proporcionarle los temas desde la perspectiva del peritaje químico-legal; por otro lado al jurista, a quien proporciona información valiosa acerca de lo que el peritaje puede brindarle para extraer el máximo provecho a los medios de prueba y por último a cualquier estudioso de las Ciencias Forenses ya que aborda con verdadera exhaustividad las más variadas problemáticas sobre los diferentes temas desarrollados, basados fundamentalmente en la experiencia de la autora y colaboradores.

Se hace muy difícil destacar alguno de sus capítulos en particular, pues en realidad todos están relacionados directa o indirectamente con las llamadas Ciencias Penales; antes bien el conjunto constituye un inmejorable aporte a la investigación científica del delito, expuesto con mucha calidad didáctica, unido a un extremado rigor científico que caracterizan a su autora, quien me ha honrado, sin duda, al permitirme suscribir este breve prólogo.

Dra. Marta Oviedo de Duarte Catedrática de Química Forense Facultad Ciencias Químicas U.N.A; U.C.A y UNINORTE

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ÍNDICE DEDICATORIA Y AGRADECIMIENTOS...............................…………………………….Pág. 2 PROLOGO………………………………………………….............…………………...…… Pág. 3 INTRODUCCIÓN…………………………........................……….…………………...…… Pág. 6

PARTE GENERAL ASPECTOS LEGALES Y METODOLOGÍA GENERAL CAPITULO I EJERCICIO LEGAL DEL PERITO QUÍMICO............................................………...…… Pág. 8 CAPITULO II A. LUGAR DEL HECHO - TRABAJO DE CAMPO……….…………………………… Pág. 13 B. LABORATORIO FORENSE - METODOLOGÍA ……………………………………. Pág. 16

PARTE ESPECIAL INDICIOS MÁS FRECUENTES. AREAS ESPECÍFICAS DE LA QUÍMICA FORENSE. EL LABORATORIO Y LA TOXICOLOGÍA FORENSE. CAPITULO I SANGRE............................................................................................................ Pág. 25 CAPITULO II SEMEN....................................................................................................................... Pág. 41

CAPÍTULO III PELOS.................................................................................................................................... Pág. 48

CAPÍTULO IV MATERIALES DIVERSOS.................................................................................................. Pág. 59

CAPÍTULO V PINTURAS............................................................................................................................ Pág. 72

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CAPITULO VI A- QUÍMICA BALÍSTICA (RESIDUOS DEL DISPARO)............................ ................. Pág. 75 B – EXPLOSIVOS.................................................................................................................... Pág. 84

CAPITULO VII QUÍMICA DOCUMENTOLÓGICA.................................................................................... Pág. 90

CAPITULO VIII QUÍMICA PAPILOSCOPICA………………………………….......…….………………... Pág.109

CAPÍTULO IX EL LABORATORIO Y LA TOXICOLOGÍA FORENSE…………….............…………… Pág. 118

ANEXOS 1.

ADN EN EL CAMPO FORENSE………............................…………...…………….. Pág. 131

2. DOCUMENTACIÓN E INFORMES TIPOS……...........................………......…….. Pág. 135 Solicitud de Pericia………………………………………………….………………........... Pág. 136 Recepción y Registro de Muestras………………………………………...........…..…….. Pág. 138 Acta Para Extracción de Muestras. ……………………………………………..........…... Pág. 139 Informe Pericial (modelos varios)………………………………………………................ Pág. 140

BIBLIOGRAFÍA DE REFERENCIA…………………………………………..…...…….….Pág. 146

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INTRODUCCIÓN Es innegable que la Química Analítica, en la especialidad conocida como QUÍMICA FORENSE; se ha constituido en uno de los pilares fundamentales para el esclarecimiento de hechos delictivos. Su esencia como ciencia, y la aplicación de métodos y técnicas analíticas le permite aportar importantes datos sobre la naturaleza de indicios hallados en la escena de un delito o con relación a él; determinar la presencia de sustancias específicas; establecer parámetros de identidad o individualización de personas, sirviendo además de apoyo a las innumerables técnicas de investigación utilizadas en las disciplinas de Criminalística, como ser Balística Forense, Documentología, Papiloscopía, etc.

En el Paraguay, la vigencia de la Química Forense aplicada a la investigación del delito, es relativamente nueva y se dieron sus albores con el LABORATORIO FORENSE de la Policía Nacional, inaugurado el 30 de agosto de 1989, de la mano de la Dra. Marta Oviedo de Duarte, a quién agradezco particularmente sus primeras enseñanzas y él haberme guiado en esta área tan profunda y fascinante de la química, que he abrazado con pasión profesional.

Si bien es cierto que hemos comenzado y nos falta mucho aún por recorrer y aprender; mi función como docente de la Facultad de Ciencias Químicas (UNA), la Escuela Superior Politécnica de la Policía Nacional y de otras instituciones privadas, en las que trato de transmitir conocimientos y experiencias adquiridas en estos 15 años de servicio en el Laboratorio de Criminalística, me ha puesto en la necesidad y más que nada ante un COMPROMISO; para con los alumnos y toda persona interesada en este campo, de elaborar para ellos un material bibliográfico de apoyo; que sirva al colega químico como guía de trabajo en el laboratorio y al mismo tiempo como fuente de consulta, con un lenguaje no muy técnico y de fácil comprensión para los que no sean químicos, pero que deseen conocer o aplicar en su labor profesional esta rama tan específica de la química.

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“LA QUÍMICA FORENSE EN LA INVESTIGACIÓN DEL DELITO”, es un material en el que he recopilado información de bibliografía extranjera sobre el tema, las que fueron y son nuestra fuente de consulta de siempre en el trabajo cotidiano del laboratorio. Así mismo, me he permitido plasmar en él, experiencias propias, aún con las limitaciones de nuestro medio; las que dieron paso a innovaciones y ajustes de técnicas extranjeras, como fruto del trabajo y deseo de realizar estudios analíticos que sirvan para aportar a los investigadores policiales el mayor número de datos posibles. Se incluye además a título de información un anexo; por gentileza y colaboración de la Dra. Marta Oviedo de Duarte, que trata sobre la tan avanzada temática del ADN aplicado en el campo forense. Es por tanto una satisfacción personal; entregar este material, con el especial deseo de que sea provechoso y de utilidad para todas las personas interesadas en la Química Forense.

La autora

Asunción, Marzo 2006

Myriam Antonia Fernández Barrientos

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CAPÍTULO I – PARTE GENERAL

EJERCICIO LEGAL DEL PERITO QUÍMICO (BASADO EN EL CÓDIGO PROCESAL PENAL)

Si bien es cierto que el ejercicio profesional del químico en el campo forense, no se halla aún instaurado como gremio específico y reconocido en nuestro país; tal como es el caso los profesionales médicos en ejercicio de la Medicina Forense; es si conocida la situación de que a la fecha se cuenta con aproximadamente una veintena de profesionales químicos, entre bioquímicos, ingenieros químicos y analistas químicos, que ejercen funciones profesionales en las distintas áreas de la División Criminalística de la Policía Nacional, en el relativamente nuevo y difícil campo de la Química Forense, apoyando la tarea de investigadores policiales y judiciales. La complejidad de los delitos de la actualidad, hace que este campo, día a día se extienda, haciendo necesaria la concurrencia de otros químicos sean estos de entes públicos y/o privados. Tales situaciones hacen necesario que los profesionales químicos, dispongan de su propio decálogo y normativas básicas para el Ejercicio Legal de ésta área en particular, lo que desde ya propongo como meta en conjunto a los queridos colegas químicos, ya que en la actualidad nos ceñimos al Decálogo Médico y sus principios básicos de actuación. Sin embargo, la naturaleza de ésta labor profesional y su alcance sociojurídico enmarcan, el ejercicio de ella en los principios básicos de la PERICIA, contemplados en los artículos de la ley Nº 1286 –Código Procesal Penal- de la República del Paraguay; sin olvidar lo regulado en el Código Sanitario, en lo que respecta al ejercicio de la profesión del químico. Así, en el LIBRO TERCERO (Primera Parte) del Código Procesal Penal, que trata sobre los Medios de Prueba, en su Título IV, define los artículos referentes a toda Pericia; la que en nuestro caso sería la PERICIA QUÍMICA; los artículos siguientes enuncian: Artículo 214. PERICIA. Se podrá ordenar una pericia cuando para descubrir o valorar un elemento de prueba sea necesario poseer conocimientos especiales en alguna ciencia, arte o técnica. La prueba pericial deberá ser practicada por expertos imparciales, objetivos e independientes.

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Artículo 215. CALIDAD HABILITANTE. Los Peritos deberán ser expertos y tener título habilitante en la materia relativa al punto sobre el que dictaminarán, siempre que la ciencia, arte o técnica estén reglamentadas. En caso contrario deberá designarse a persona idoneidad manifiesta. No regirán las reglas de la prueba pericial para quien declare sobre hechos o circunstancias que conoció directamente aunque para informar las aptitudes especiales que posee en una ciencia arte o técnica. En este caso regirán las reglas de la prueba testimonial. Artículo 216. INCAPACIDAD. No podrán actuar como peritos: 1) quienes por insuficiencia o alteración de sus facultades mentales, o por inmadurez, no comprendan el significado del acto; 2) quienes deban abstenerse de declarar como testigos; 3) quienes hayan sido testigos del hecho objeto del procedimiento; y 4) los inhabilitados Artículo 217. ORDEN PARA LA PERICIA. Los peritos serán seleccionados y designados por el juez o por el Ministerio Público durante la etapa preparatoria, siempre que no se trate de un anticipo jurisdiccional de prueba. El número de peritos será determinado según la complejidad de las cuestiones a plantear, considerando las sugerencias de las partes. Se podrá nombrar un solo perito cuando la cuestión no sea compleja. Así mismo, se fijarán con precisión los temas de la pericia y el plazo para la presentación de los dictámenes. Artículo 218. NOTIFICACIÓN. Antes de comenzar las operaciones periciales el juez notificará a las partes la orden de practicar una pericia. Artículo 219. FACULTAD DE LAS PARTES. Dentro del plazo que establezca el juez, cualquiera de las partes podrá proponer otro perito en reemplazo del ya designado, o para que dictamine conjuntamente con él, cuando las circunstancias particulares del caso, resulte conveniente su participación, por su experiencia o idoneidad especial. Las partes podrán proponer fundadamente temas para la pericia y objetar los admitidos o propuestos por otra de las partes. Artículo 220. INHIBICIÓN Y RECUSACIÓN. Serán causas legales de inhibición y recusación de los peritos las establecidas para los jueces. Artículo 50. - Capítulo IV - MOTIVOS DE EXCUSACIÓN Y RECUSACIÓN. Los motivos de separación de los jueces serán los siguientes:

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1) ser cónyuge, conviviente o pariente dentro del cuarto grado de consanguinidad o por adopción, o segundo de afinidad, de alguna de las partes o de su representante legal o convencional; 2) ser acreedor, deudor o garante, él, su cónyuge o conviviente, de alguna de las partes, salvo cuando lo sea de las entidades del sector público, de las instituciones bancarias, financieras o aseguradoras. Habrá lugar a la inhibición o recusación establecida en este numeral sólo cuando conste el crédito por documento público o privado, reconocido o inscripto, con fecha anterior al inicio del procedimiento; 3) tener él, su cónyuge o conviviente, o sus parientes dentro de los grados expresados en el inciso 1 de éste artículo, procedimiento pendiente con alguna de las partes o haberlo tenido dentro de los dos años precedentes si el procedimiento ha sido civil y dentro de los cinco años si ha sido penal. No será motivo de inhibición ni de recusación la demanda civil o la querella, que no sean anteriores al procedimiento penal que conoce; 4) tener interés personal en la causa por tratarse de sus negocios o de las personas mencionadas en el inciso 1; 5) ser contratante, donatario, empleador o socio de alguna de las partes; 6) haber intervenido anteriormente, de cualquier modo, o en otra función o en otra instancia en la misma causa; 7) haber dictado una resolución posteriormente anulada por un tribunal superior; 8) haber intervenido en el procedimiento como parte, representante legal, apoderado, defensor, perito o testigo; 9) haber sido condenado en costas, en virtud del procedimiento que conoce; 10) haber emitido opinión o consejo sobre el procedimiento que conste por escrito o por cualquier medio de registro; 11) tener amistad que se manifieste por gran familiaridad o frecuencia de trato; 12) tener enemistad, odio o resentimiento que resulte de hechos conocidos; y 13) cualquier otra causa, fundada en motivos graves, que afecten su imparcialidad o independencia. Artículo 221. CITACIÓN Y ACEPTACIÓN DEL CARGO. Los peritos serán citados en la misma forma que los testigos; tendrán el deber de comparecer y de desempeñar el cargo para el cual fueron designados. Si no son idóneos, están comprendidos en algunas de las incapacidades citadas, presentan un motivo que habilite su recusación o sufran un impedimento grave, lo manifestarán al comparecer, acompañando los elementos de prueba necesarios para justificar su afirmación

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Artículo 222. EJECUCIÓN. El juez resolverá todas las cuestiones que se planteen durante las operaciones periciales. Los peritos practicarán juntos el examen, siempre que sea posible; las partes y sus consultores técnicos podrán asistir a él y solicitar las aclaraciones pertinentes, debiendo retirarse cuando los peritos comiencen la deliberación. Si algún perito no concurre a realizar las operaciones periciales dentro del plazo otorgado, por negligencia, por alguna causa grave o simplemente desempeña mal su función, el juez ordenará la sustitución. Artículo 223. DICTAMEN PERICIAL. El dictamen será fundado y contendrá una relación detallada de las operaciones practicadas y sus resultados, las observaciones de las partes o de sus consultores técnicos y las conclusiones que se formulen respecto de cada tema estudiado, de manera clara y precisa. Los peritos podrán dictaminar por separado cuando exista diversidad de opiniones entre ellos. El dictamen se presentará por escrito firmado y fechado, sin perjuicio del informe oral en las audiencias. Artículo 224. PERITOS NUEVOS. Cuando los informes son dudosos, insuficientes o contradictorios, el juez o el Ministerio Público podrá nombrar uno o más peritos nuevos, según la importancia del caso, para que lo examinen y amplíen o, si es factible y necesario, realicen otra vez la pericia. De igual modo podrán actuar los peritos propuestos por las partes, cuando hayan sido nombrados después de efectuada la pericia. Artículo 225. AUXILIO JUDICIAL. Se podrá ordenar la presentación o el secuestro de cosas y documentos, y la comparecencia de personas, si es necesario para llevar a cabo las operaciones periciales. También se podrá requerir al imputado y a otras personas que confeccionen un cuerpo de escritura, graben su voz o lleven a cabo operaciones semejantes. Cuando la operación sólo pueda ser ejecutada voluntariamente por la persona requerida y ella rehúse colaborar, se dejará constancia de su negativa y se dispondrá lo necesario para suplir esa falta de colaboración. “LIBRO PRIMERO (Segunda Parte) del Código Procesal Penal, en sus Títulos I (Capítulo IV – Actos de Investigación) y III (Capítulo II – Sustanciación del Juicio)” Artículo 320. ANTICIPO JURISDICCIONAL DE PRUEBA. Cuando sea necesario practicar un reconocimiento, reconstrucción, inspección o pericia, que por su naturaleza y características deben ser considerados como actos definitivos e irreproducibles, o cuando deba recibirse una declaración que, por algún obstáculo

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difícil de superar, se presuma que no podrá hacerse durante el juicio, el Ministerio Público o cualquiera de las partes podrá requerir al juez que lo realice. El juez practicará el acto, si lo considera admisible, citando a todas las partes, quienes tendrán derecho de asistir, con las facultades y obligaciones previstas por este código. Si el juez rechaza el requerimiento, se podrá acudir directamente al tribunal de apelación, que deberá resolver sin más trámite y de inmediato, ordenando la realización del acto si lo considera admisible. Artículo 388. DICTAMEN PERICIAL. El presidente ordenará la lectura de los dictámenes periciales. Si los peritos han sido citados, responderán a las preguntas que les formulen las partes, los consultores técnicos y los miembros del tribunal, en ese orden y comenzando por quienes ofrecieron el medio de prueba. Si es posible, el tribunal ordenará que se realicen las operaciones periciales en la audiencia. El perito tendrá la facultad de consultar documentos, notas escritas y publicaciones durante su declaración.

“Los artículos transcriptos del Código Procesal Penal, normalizan la forma, designación de responsables y tiempo para la Pericia, a los efectos de que la misma sea considerada como prueba de valor; sin embargo es importante aclarar a los colegas químicos, que el Ministerio Público muchas veces ofrece la Pericia Química o mejor dicho al Perito Químico, durante el juicio oral y cuando no se ha cumplido con el art. 320 del Anticipo Jurisdiccional; en calidad de testigo, quien basará su testimonio en su pericia o informe como medio de prueba presentado”.

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CAPÍTULO II – A – PARTE GENERAL

LUGAR DEL HECHO (TRABAJO DE CAMPO) La mayoría de las veces el perito químico recibirá las muestras a las cuales dedicará su atención profesional, en el laboratorio; pero es importante que el mismo conozca del trabajo básico a realizar en el campo o lugar del hecho para la búsqueda y levantamiento de indicios a ser analizados posteriormente; ya que estas primeras acciones pueden aportarle valiosos datos a su trabajo analítico o, en el peor de los casos si no se han realizado correctamente los pasos básicos pueden causarle serios inconvenientes. Puede además, requerirse la presencia del Perito Químico in situ, para levantar los posibles indicios o muestras testigos que él considere oportuno para sus estudios.

A. METODOLOGÍA GENERAL DE INVESTIGACIÓN EN EL LUGAR DE LOS HECHOS Básicamente la importancia del lugar del hecho, y que da origen al llamado trabajo de campo, es el Principio de Intercambio de Indicios. Un indicio es definido como: “Todo objeto, instrumento, huella, marca, rastro, señal o vestigio que se usa y/o se produce en la comisión de un hecho presuntamente delictuoso” El Principio de Intercambio de Indicios pregona que: No existe delincuente que a su paso por el lugar del hecho y en su contacto con la víctima, no deje tras de sí o lleve consigo alguna huella aprovechable. Por lo tanto si no se recogen evidencias útiles, aunque sea en el largo plazo de una investigación, probablemente será por no haberlas sabido buscar. En el lugar del hecho se aplican cinco pasos, sistemática y cronológicamente ordenados: 1) Protección del lugar de los hechos 2) Observación del lugar 3) Fijación del lugar 4) Colección de indicios 5) Suministro al laboratorio

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1) Protección del lugar de los hechos: Antes de la intervención del Ministerio Público, la Policía y de los peritos, se hará la protección, acordonamiento o aislamiento del lugar, recordando seleccionar las áreas por donde se caminará en el lugar de los hechos, para no alterar o borrar indicios y no tocar o mover nada, hasta que no haya sido fijado todo el lugar y lo que en él hubiere. 2) Observación del lugar: Consiste primeramente en la observación, directa y macroscópica del lugar de los hechos, atendiendo a todo lo que en él se encuentre. Está observación tiene principalmente por objeto, la búsqueda y localización de indicios Una vez determinado los lugares y/u objetos que guardasen estrecha relación con el hecho se puede continuar la observación con fuentes luminosa especiales (luz blanca de alta potencia, ultravioleta, infrarroja, etc.) y/o elementos de aumento como la lupa a fin de examinar particularidades de los mismos. 2.1. Métodos para la búsqueda y localización de indicios: 2.1.1. En lugares abiertos: Se dirige la vista de la periferia al centro, en forma de espiral hasta llegar al centro del lugar de los hechos o viceversa. 2.1.2. En lugares cerrados: Se dirige la vista en forma paralela de muro a muro, o de la periferia al centro, comenzando por la entrada principal, después se sigue con los muros, muebles, escaleras y se concluye finalmente con el techo. Tener siempre presente antes, durante la búsqueda y localización de indicios, los siguientes aspectos: a) El tipo de hecho investigado; b) Los indicios encontrados y los que deberían encontrarse según la forma y tipo de hecho; así como c) La metodología específica para el tratamiento de los indicios, pues estos son testigos mudos de la verdad. Finalmente el éxito en la localización de los indicios, dependerá básicamente de la intuición y capacidad de observación del perito, así como de su criterio para seleccionar los verdaderamente importantes y útiles para el esclarecimiento del hecho investigado. 3) Fijación del lugar: Rige para el lugar de los hechos y los indicios que guarden relación con el hecho investigado. Se pueden utilizar las siguientes técnicas: a) descripción escrita, b) fotografía forense, c) planimetría forense, d) filmación y e) moldeado.

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4) Colección de indicios: Se realiza indefectiblemente una vez que el indicio se haya fijado, por al menos una de las técnicas de fijación arriba mencionadas. Se procederá para al levantamiento de ellos; aplicando la técnica adecuada para cada indicio conforme a su naturaleza y estado en que se lo encuentre. La colección de indicios se efectúa cumpliendo en orden y correctamente las siguientes acciones: 1. levantamiento, 2. embalaje y 3. etiquetado: en el que básicamente se harán constar: el tipo de indicio, caso, lugar, hora, fecha y personal que lo levantó. 5) Suministro de indicios al laboratorio: Se hará conforme a las necesidades y sugerencias del perito criminalista, del investigador policial o fiscal. En cada caso; el indicio correctamente identificado deberá estar acompañado de su pedido de pericia o análisis; atendiendo al cumplimiento estricto de la CADENA DE CUSTODIA, normativa jurídica que tiene por objeto garantizar la integridad, conservación e inalterabilidad de los indicios; desde el momento en que son encontrados en el lugar de los hechos, estudiados y analizados, hasta su presentación en el juicio oral, como MEDIOS DE PRUEBA. Para el cumplimiento de la cadena de custodia se recomienda: a) Labrar acta, en la misma se hará constar: - El detalle de todos los indicios coleccionados, - el lugar de su hallazgo, - el pedido de pericia, - el personal interviniente en el levantamiento, fecha y hora correspondientes con la firma de representantes del Ministerio Público, peritos y/o intervinientes, testigos y defensores si los hubiere. b) Lacrar los contenedores de los indicios: Para ello existen recipientes con precintas especiales que aseguran su apertura por única vez. Una práctica frecuente para subsanar la falta de estos recipientes especiales es el uso de cintas de embalajes con papeles que contengan la firma de todas las personas que participaron del levantamiento, dispuestos de tal manera que aseguren una sola apertura. c) Registrar por medio de actas, registro y archivo y/o notas de remisión, los lugares y personas que tienen acceso a los indicios a ser estudiados y una vez estudiado. Estos lugares y personas deberán ser los estrictamente necesarios y los habilitados jurídicamente.

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CAPÍTULO II – B – PARTE GENERAL

METODOLOGÍA - LABORATORIO FORENSE Es por todos conocido que la QUÍMICA; es la ciencia que se encarga del estudio de la materia y las transformaciones que de ella se derivan. Este concepto amplio, justifica la utilización y aplicación de la Química al estudio físico químico de indicios u objetos relacionados con la comisión de un hecho punible, en la búsqueda del esclarecimiento y justo juzgamiento del mismo, conociéndose está rama de la química bajo el nombre de QUÍMICA FORENSE. A. FINALIDAD DE LA QUÍMICA FORENSE 

Proporcionar al investigador, datos obtenidos a través del análisis de los indicios que puedan orientar la investigación. Estos datos ayudan a determinar el mecanismo del hecho o a establecer relaciones entre muestras, personas y/o lugares.



Aportar pruebas científicas para el esclarecimiento del hecho punible investigado; con resultados obtenidos en los diferentes trabajos periciales y en cumplimento del objeto de pericia.

B. OBJETIVOS GENERALES DE LA PERICIA EN UN LABORATORIO QUÍMICO FORENSE 

Obtener resultados que certifiquen naturaleza de los indicios (sangre, orina, pelos, etc.).



Obtener resultados que establezcan semejanza o diferencia entre testigos indubitados y los indicios (pelos, pintura, tinta, etc.).



Investigar la presencia de sustancias específicas o grupos de ellas (drogas de abuso, residuos del disparo, semen, alcohol, etc.).



Los resultados obtenidos en su mayoría tienen valor analítico de certeza, aunque para la investigación pueden resultar de carácter orientativo.

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C. MÉTODOS UTILIZADOS El avance tecnológico de hoy día permite la utilización de un sin número de métodos con aparatos simples, hasta los de muy alta sofisticación. Entre los utilizados más utilizados en nuestro medio, se pueden citar:  Físicos: Basados en la observación y determinación de propiedades físicas como el peso, color, forma, tamaño, puntos de fusión, ebullición, etc.  Químicos: Involucran reacciones químicas de todo tipo, que responden a las propiedades químicas de la materia; siendo las más comunes las reacciones colorimétricas, enzimáticas y de formación de cristales.  Inmunológicos: De gran utilidad en la identificación de sustancias, mediante la típica reacción antígeno-anticuerpo (cada antígeno reacciona con su anticuerpo específico). En este método de hace mención a la variedad de técnicas aplicables con el fundamento más arriba mencionado, como ser el RIA (Radio-inmuno-ensayo), que utiliza anticuerpos marcados con radioactividad.  Combinados: La utilización de técnicas específicas de análisis con métodos combinados, resulta de gran utilidad en la investigación rápida de sustancias particulares, por ejemplo en la investigación de drogas de abuso en orina por inmunocromatografía.  Instrumentales: Se hace referencia de algunos de los métodos instrumentales aplicados en nuestro medio, con la salvedad de que toda la tecnología al servicio de la ciencia puede utilizarse en el campo forense, por lo que abordarlos todos en este material no será el objetivo. - Ópticos: Desde la utilización de la lupa simple hasta los diferentes microscopios, pasando por el microscopio Standard, el de comparación forense, y el de barrido electrónico. - Cromatográficos: Incluye los diferentes cromatógrafos, HPLC, de gas, y las combinaciones de éstos para aumentar su especificidad y sensibilidad como la del cromatógrafo gaseoso con detector FID. - Espectrofotometría: Basados en la medición del espectro de luz o emisión de energía característica para cada sustancia, según la técnica específica de dicha medición; entre los más comunes: -Espectrofotometría Ultravioleta – Visible, Espectrofotometría de Absorción Atómica.

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Finalmente es importante mencionar que la metodología general para el estudio de los indicios se basa en la COMPARACIÓN, por lo que se deduce que deben disponerse de dos tipos de muestras como mínimo, en este contexto, hablamos de: 

Testigo, Patrón o Indubitado: cuando se trata de una muestra de naturaleza conocida o inequívoca, por lo que servirá de Standard o control.



Indicio, material, muestra o dubitado: Es la sustancia, materia u objeto levantado con relación al hecho investigado, de cuya naturaleza no se tiene certeza.

Diferencia entre indicio y evidencia, en nuestro vocabulario jurídico – policial paraguayo: Indicio: Señal o indicación de algo en particular. Evidencia: Indicio que una vez estudiado, cuya naturaleza ha sido comprobada; y en caso de establecer su relación con los hechos, se convierte en Prueba. D. MUESTRAS PARA ESTUDIO En general cualquier objeto o sustancia puede ser importante en el esclarecimiento de un hecho, la decisión sobre la importancia de éstos quedará a cargo de la objetividad pericial y criterio de asociación del perito, como ya se mencionara. A efectos de englobar los mismos en un listado, se establece una clasificación de acuerdo a su naturaleza. 

Físicos: Armas de todo tipo (blancas, de fuego, contundentes, etc.), pigmentos (pintura, tintas etc.), papel, vidrio, prendas de vestir, etc.



Químicos: Sustancias químicas en general, medicamentos, drogas de abuso, polvos, líquidos, etc.



Biológicos: Fluidos biológicos que provengan de seres vivos o cadáveres (humor vítreo, semen, saliva, leche, sangre, orina, heces, calostro, meconio, unto sebáceo, etc.) y tejidos en general (huesos, pelos, piel, etc.). Se incluyen también aquí, los materiales provenientes de otros animales y de los seres del reino vegetal. Los fluidos pueden presentarse de dos formas: - Seca o mancha: Entiéndase por mancha toda modificación de una superficie, sea por alteración de color o por depósito de sustancia extraña a la misma.

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- Líquida: Cuando se encuentra los fluidos en su forma natural o tal como se los encuentra en el ser vivo. E. BÚSQUEDA Y LOCALIZACIÓN DE INDICIOS A más de utilizar las técnicas generales de búsqueda de indicios en el lugar del hecho (descritas en el capítulo anterior), resulta de gran utilidad; sobre todo en el laboratorio el uso de elementos auxiliares de magnificencia como lupas o lámparas de luz blanca potente o las de diferentes longitudes de onda, entre ellas la luz ultravioleta o lámpara de Wood, ya que ante éstas, muchas sustancias pueden reaccionar con una fluorescencia particular, que si bien no tiene carácter identificatorio, la diferencia de fluorescencia con el resto del soporte ayuda a localizar la zona de mayor probabilidad de encontrar un determinado indicio F. CUIDADOS GENERALES CON LOS INDICIOS Dada la naturaleza química o biológica de los indicios, el manipuleo de los mismos debe ser cuidadoso, a fin de: - resguardar la salud del personal y evitar contaminaciones con materiales foráneos que conduzcan a resultados erróneos de laboratorio. Por lo tanto, aplicar las siguientes normas en el lugar de los hechos o en el laboratorio es de vital importancia:  Utilizar los elementos básicos de bioseguridad: guardapolvos, guantes de látex con o sin protección de malla metálica, gafas, cofia y zapatos especiales.  Fijar los indicios por métodos adecuados.  Examinar el cadáver, o los indicios utilizando guantes y/o pinzas con las puntas envueltas en algodón si fuese necesario.  Anotar los detalles relacionados al o los indicios como ser cantidad, forma, tamaño, etc.  Levantar cada indicio, según la técnica adecuada al tipo, estado en que se encuentran y al objeto de la pericia a solicitar.  Embalar cada indicio por separado y según técnica apropiada.  Rotular los indicios levantados, anotando fecha, hora, caso, víctima, lugar del levantamiento y personal interviniente.  Si se tratan de indicios físicos que contengan otros de naturaleza biológica, antes de embalarlos deben ser secados al aire libre, sin exponerlos al sol, como por ejemplo en el caso prendas de vestir.

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 Si se trata de sangre, orina u otros indicios biológicos en su estado natural, es imprescindible su refrigeración antes y durante su remisión al laboratorio, si la misma va exceder 1 hora  Si los indicios biológicos serán transportados largas distancias, cuidar el punto anterior referente a prendas y en caso de sangre, orina, vísceras, etc., enviarlas en frasco de boca ancha, preferentemente de vidrio, con tapa sellada y sin el agregado de ningún conservante, colocándolos luego en un recipiente térmico con hielo.  Remitir al laboratorio con el correspondiente pedido de pericia y la atención de la cadena de custodia.

G.

SOLICITUD DE PERICIA

La solicitud de pericia es el punto de inicio para el trabajo del perito, pues en ella se hará constar el objeto específico de la pericia y por lo tanto será la que demarque el contexto del trabajo químico pericial. Es importante distinguir y asentar en ella las siguientes partes: 

Datos generales: - Relacionados al hecho investigado (víctima, victimario, fecha, hora, lugar, etc.) y el solicitante de la pericia con sus datos personales que n caso de ser una figura pública como por ejemplo el Ministerio Público, bastará con la identificación pertinente.



Detalle de indicios: En este punto, se hace referencia a los objetos y/o materiales remitidos, que serán el objeto de la pericia, detallando brevemente sus características físicas



Objeto de la pericia: Puntualizar específicamente lo que se requiere de la pericia química forense. Distinguir claramente diferentes objetivos aunque se traten de una misma muestra. La definición del objeto de pericia se hará conforme a la naturaleza de las muestras, y su importancia para el hecho investigado.



Otros datos de interés: En los que se refieren situaciones particulares que pueden resultar de interés para la orientación del trabajo de laboratorio y posterior cotejo de resultados, como ser: - circunstancias del hecho, características sintomatológicas observadas en personas vivas o muertas de quienes se hayan colectado muestras (estado de ánimo depresivo o excitado, coloraciones específicas de la piel, etc.)

Myriam Antonia Fernández Barrientos

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H.

EL PERITAJE DE LOS INDICIOS

La pericia química se inicia cuando el personal que procederá al análisis, recibe la muestra, (RECORDAR QUE TODA LA DOCUMENTACIÓN DE INGRESO O RECEPCIÓN AL LABORATORIO DEBE REALIZARSE CORRECTA Y EFICIENTEMENTE A FIN DE CUMPLIR CON EL RÉGIMEN DE LA CADENA DE CUSTODIA). El trabajo de peritaje químico forense se puede resumir en los siguientes pasos: 

Descripción detallada del indicio o muestra para estudio. Dejar constancia del color, olor, tamaño, volumen, dimensiones y señas particulares (como logotipos de marcas, diseños, adherencias, manchas con sus características propias, orificios, desgarraduras, etc.) indicando la posición exacta de ellas en el soporte investigado.



Identificación de la porción o parte del indicio que será sometido a estudio.



Tomar una parte de la muestra, dejando: - Una porción para eventuales repeticiones o confirmación interna de resultados (lo que significa utilización de la muestra a corto plazo), y - otra porción, para un eventual contra peritaje, siempre y cuando el medio del laboratorio lo permita, pues como la mayoría de las muestras son de carácter biológico (por ejemplo viseras, sangre líquida, vómitos etc.), para guardarlas es necesario contar con un refrigerador especial, tipo freezer. Resulta algo más fácil guardar prendas que contengan fluidos corporales como sangre, semen, orina u otros, pues basta con secarlas según las indicaciones realizadas en el punto anterior, y guardarlas en su totalidad o solamente una pequeña porción.



Preparar la muestra para el estudio correspondiente. Las preparaciones básicas, sin entrar en técnicas o procedimientos específicos, comprenden: -Macerado, que consiste en colocar una porción de soporte que contenga una determinada mancha o depósito de sustancia, en una alícuota de solución salina, que no deberá ser excesiva para no diluir la muestra en demasía. Del macerado resultante se puede proceder al centrifugado cuando se trata de buscar células en el pellet obtenido o trabajar con el sobrenadante. - Montaje, sobre láminas para observar la muestra al microscopio, este montaje puede ser directo, con colorantes u otros, según la muestra y estudio a realizar. Es el caso de pelos, fibras, vegetales y otros. -Contacto y Extracción, con solventes orgánicos a partir de muestras biológicas en las que se realizarán investigación de tóxicos, o físicas como en el caso de tintas y pinturas.

Myriam Antonia Fernández Barrientos

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

Aplicar las técnicas y procedimientos específicos a las preparaciones correspondientes o sobre el material directo conforme a la solicitud de pericia química requerida y en el marco del hecho investigado.



Siempre que sea posible, guardar todos los indicios estudiados, incluyendo los soportes sobre los cuales se encontraban las muestras; cuidar de que tengan la identificación respectiva y utilizar bolsas con presillas o sobres de papel. El sobrante de los macerados estudiados puede guardarse seco, sobre trozos de tela de algodón blanca, seca y esterilizada; los extractos con solventes pueden guardarse en frasquitos de vidrio con tapa hermética.



Confrontar los resultados, haciendo relación con el hecho investigado, agotar todas las medidas de confirmación.



Elaborar el informe laboratorial.

I. INFORME LABORATORIAL El informe laboratorial, es la presentación final de los resultados obtenidos y confrontados. Para su elaboración es importante tener en cuenta, que la mayoría de las veces, este informe está dirigido a profesionales y personas no relacionadas con las ciencias químicas. Por ello es necesario que él mismo sea: - Claro: al exponer los resultados obtenidos; - Concreto: para responder específicamente sobre los puntos de pericia; y - Conciso: para no divagar la atención de la persona que tratará de entender y extraer datos de su interés, por ejemplo, no extremar los detalles de una descripción, no explayarse sobre métodos y técnicas utilizadas pues esto más bien confunde al tener tanto vocabulario y fundamentos técnicos. Básicamente el informe debe contener los siguientes puntos: 

Datos generales: Para la identificación del hecho o la causa investigada, a los fines de facilitar la entrega y recepción del informe al lugar de su destino, sobre todo cuando se tratan de causas y hechos de intervención pública.



Indicios recibidos: Detalle de todo lo recibido para la pericia, asegurando además de ésta manera, la cadena de Custodia.



Muestras para estudio: Identificar claramente la porción o parte del indicio que será sometido a análisis, designando para ello, nomenclaturas específicas.

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

Objeto de la pericia: Transcribir el objeto de pericia que motivo el análisis de los indicios, para dejar claramente asentado, a qué se dio respuesta analítica.



Estudios realizados y resultados obtenidos: En este punto se asientan los estudios realizados (si fue observación, reacción química, determinación de peso, cromatografía, etc.), haciendo referencia del método y/o técnica utilizada, de tal manera que se puedan interpretar el valor analítico, el valor pericial para la investigación y/o las limitaciones de ellos. En cada estudio mencionado, se hará constar el resultado obtenido.



Conclusiones: En las conclusiones, se dará respuesta a las interrogantes u objeto de pericia, relacionando los resultados obtenidos con las interrogantes específicas.

J. VALOR DEL ANALISIS Obviamente que la tarea del químico es realizar el análisis y quedará en manos de la justicia dar una valoración de los dictámenes periciales, en el marco jurídico de un hecho investigado. Sin embargo es importante aclarar los diferentes valores a los que se puede hacer referencia en el contexto de una pericia química.  Valor legal: Se refiere al valor otorgado por los procedimientos procesales legales, que marcan las normas jurídicas, tal como se hiciera mención en el capítulo I -. Parte General de éste material.  Valor analítico: Es el valor otorgado por la técnica de análisis utilizada.  Valor pericial: Es el valor de apreciación en relación al tipo de hecho investigado. Los dos últimos valores mencionados pueden ser de carácter: - orientativo (cuando los resultados obtenidos no dan una relación de identidad, naturaleza específica) o –certeza (cuando los resultados obtenidos determinan una identidad, naturaleza específica o establece una relación inequívoca con el tipo de hecho investigado. A modo de ejemplo, la determinación de plomo (con la técnica utilizada por la autora) en la investigación de los residuos del disparo, tiene un valor analítico de certeza porque identifica plenamente a éste metal, pero sin embargo tiene una valor pericial de orientación puesto que el metal no exclusivamente puede provenir del mixto fulminante o iniciador del fenómeno del disparo.

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CAPÍTULO I – PARTE ESPECIAL

SANGRE La sangre es un tejido líquido, característico de los animales vertebrados, cuya principal función en ellos, es el transporte de oxígeno y de los nutrientes a todo el organismo. Está constituida por una parte líquida, llamada plasma sanguíneo y una parte sólida; formada por las células sanguíneas, las que se diferencian en:  Glóbulos rojos, hematíes ó eritrocitos: son las células que se encuentran en mayor cantidad, de 3.000.000 a 5.000.000 por milímetro cúbico de sangre, las mismas contienen en su interior varias sustancias, siendo la principal de ellas el pigmento que da el color rojo a la sangre, llamado hemoglobina.  Glóbulos blancos o leucocitos: son las células cuya principal función es la defensa del organismo frente a invasores como bacterias, virus u otras partículas extrañas, existen cinco tipos diferentes: neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos los mismos se encuentran al alrededor de 5.000 a 10.000 por milímetro cúbico de sangre.  Plaquetas: son minúsculos discos formados de sustancias químicas que actúan en la coagulación de la sangre y en la oclusión de roturas de los vasos sanguíneos. El examen pericial de sangre asiste a la investigación de un hecho punible de la siguiente manera: - Localizando la escena del crimen: al identificar el mismo tipo de sangre de la víctima en un lugar determinado. - Para descubrir un delito: al identificar sangre humana en la acera, un balcón, en un vehículo, etc., pues es el primer indicio de que un hecho violento se ha cometido. - Puede identificar el arma utilizada: la sangre encontrada en un bastón, cuchillo o un martillo puede ser considerada de valor evidenciario. - Puede probar o desmentir la coartada de un sospechoso: la identificación de sangre humana en un objeto que pertenece a un sospechoso y alega que la sangre en el objeto pertenece a un animal, desmiente su coartada. - Orienta a la eliminación de sospechosos: al determinar que la sangre encontrada en un objeto pertenece al sospechoso, y no a la víctima.

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1. MUESTRAS PARA ESTUDIO DE SANGRE 1.1.

PRESENTACIÓN DE LAS MUESTRAS DE SANGRE

Las muestras de sangre pueden encontrarse en el lugar del hecho, sobre prendas de vestir y de cama, en el cadáver o soportes varios; en diferentes formas: a) Líquidas: Cuando la sangre se encuentra aún en su estado natural, su color es rojo vivo si procede de las arterias o rojo oscuro cuando es venosa. Puede ser hallada así en heridas recientes de víctimas con lesiones de tipo cortante, perforante, punzante, contuso-cortantes, que hayan afectado grandes vasos sanguíneos, igual en cadáveres recientes con las mimas lesiones, o en lugares próximos a ellos, siempre que se llegue al lugar del hecho en forma inmediata. b) Parcialmente líquidas: Cuando la sangre se halla parcialmente coagulada, encontrándose una parte sólida (coágulo) y una parte líquida, con la coloración característica según su procedencia más arriba citada. Puede ser hallada en este estado, en lugares en donde hubo mucho derramamiento de sangre, y ha transcurrido un cierto tiempo (horas) o en prendas que han tenido contacto con mucha pérdida de sangre, o en las heridas de la víctima. c) Coaguladas: Cuando la sangre ya ha coagulado por completo y solo es posible distinguir el coagulo sanguíneo, generalmente ya de un color rojo más oscuro por los cambios cromáticos producidos a consecuencia de la exposición de la hemoglobina al aire. Se encuentra así en las grandes heridas, ropas en contacto con mucha sangre y lugares en donde hubieron gran derramamiento de sangre. La coagulación se inicia dentro los 3 a 5 minutos del inicio del derramamiento de sangre, pero se deben considerar el tiempo que debe transcurrir para que toda la cantidad de sangre derramada coagule, y los siguientes factores: tipo de vasos sanguíneos lesionados, número de heridas, signos de vida entre otros. d) Seca o Mancha: Es importante recordar el concepto del término –mancha-, desde el punto de vista forense como: “Toda modificación de color, depósito o adherencia de material extraño, sobre un soporte determinado”. En el caso de la sangre, cuando ésta se encuentra totalmente seca y se deposita sobre soportes absorbentes deja una sensación táctil de almidonado y color marrón achocolatado; si el soporte es no absorbente la mancha seca se deposita en forma de costras de color marrón, fácilmente desprendibles. La coloración en ambos casos puede pasar desapercibida cuando el soporte es oscuro.

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1.2.

BÚSQUEDA Y LOCALIZACIÓN

La búsqueda de muestras posibles de sangre se debe focalizar en: a) El cadáver, y en su entorno inmediato (prendas de vestir) y mediato (lugar del hecho y alrededor). b) El lugar del hecho inmediato (centro de la escena del crimen) y todo objeto que en él se encuentre y en el lugar del hecho mediato (zona de los alrededores de la escena del crimen). c) El sospechoso o victimario: Teniendo en cuenta su entorno inmediato (prendas de vestir del momento) y entorno mediato (pertenencias y domicilio). Utilizar la técnica de la inspección ocular macroscópica, con luz artificial variando el ángulo de incidencia, buscando la coloración característica de cada caso y la palpación de soportes absorbentes. Es recomendable también la utilización de la lámpara de Wood o luz ultravioleta, sobre todo cuando se trata de inspeccionar soportes de color oscuro. Un caso extremo, sobre todo cuando existen referencias de que las muestras pudiesen haber sido lavadas, es utilizar el reactivo luminol (3- aminoftalhidracina), que ante la presencia de sangre reacciona con fluorescencia lilácea y no interfiere en posteriores reacciones analíticas. (Ver foto al final del capítulo)

1.3.

DATOS OBTENIDOS DE LAS MUESTRAS

Las características que presentan las muestras de sangre pueden aportar datos de interés para la investigación, por lo que el perito químico no debe desentenderse de la observación de los aspectos morfológicos de ellas, estos aspectos son: Color: El color observado en las muestras puede orientar sobre: a) El Origen: La sangre arterial es roja y brillante, sale a chorro y es impulsada a cierta distancia. - La sangre venosa es más oscura, de aspecto más denso y sale en forma de “baba” acumulándose cerca de la víctima, formando charcos o regueros. b) El tiempo transcurrido: entre el hecho y el hallazgo de las muestras, aunque esto no resulte muy exacto considerando que las mismas están sujetas a condiciones climáticas y de conservación, el color rojo indica que el hecho es reciente (horas), luego a medida que el tiempo transcurre la muestra va oscureciéndose, pasando por las diversas tonalidades del marrón, hasta llegar a un color verdoso si la mancha no se conserva en buen estado, lo que es entonces signo de putrefacción o

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descomposición de la misma, este proceso indica que ha transcurrido un tiempo considerable (días). Forma, dimensiones y otros datos: Las formas más comunes que suelen observarse son: a) Charco: gran volumen de sangre producido por caída desde un foco inmóvil, próximo a la víctima. b) Chorro: salpicaduras proyectadas por arteria. c) Escurrimientos: formados por regueros y rebabas, indican desplazamiento de la fuente que origina la sangre que sigue siempre la ley de la gravedad, pueden indicar cambio en la posición final o lugar del cadáver; desplazamiento de la víctima moribunda. d) Salpicaduras: Cuando la sangre cae a una superficie, desde una cierta altura, da lugar a: - Gotas Circulares : cuando la caída es perpendicular al suelo, y a medida que aumenta la altura el diámetro de la gota es superior y sus bordes festoneados o con denticulaciones hasta llegar a pequeñas gotas satélites; - Signo ortográfico de admiración : en sentido de la dirección del movimiento cuando la caída es oblicua, el mayor o menor alargamiento dependerá del ángulo de incidencia, la velocidad de proyección y el volumen de la sangre; - Gota en movimiento : cuando la sangre es proyectada en movimiento tiene forma de signo de admiración con la ventaja de que indican el sentido del movimiento, la punta de la mancha corresponde al extremo adelantado; - Gotas múltiples : pueden indicar que ha habido un mecanismo de acción muy violento que motiva una proyección considerable de sangre a alta velocidad. En el punto del estudio de estas salpicaduras, es posible también obtener otros datos de interés, como ser la determinación del punto de convergencia de las gotas que determina el lugar desde donde han sido proyectadas. (Ver Nº 1, 2, 3, 4 fotos al final del capítulo) Cantidad: La cantidad hallada en el lugar del hecho puede orientar: a) Sobre el número de personas intervinientes en la comisión del hecho y el modo en que ocurrió el mismo; observando el número de heridas en la víctima y su relación con la cantidad y distribución de las muestras de sangre halladas en el lugar; b) Respecto al lugar del hecho y el hallazgo del cadáver; relacionando la cantidad de sangre encontrada en la escena del crimen y el número o posición de la o las heridas en la víctima y su entorno mediato. 1.4.

LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS

El manejo de muestras sanguíneas se rige por las condiciones generales del tratamiento de indicios, extremando al máximo los cuidados requeridos por tratarse de un indicio biológico. El levantamiento de ellas, está sujeto a dos factores: a) La forma o estado en que se encuentran y b) El objeto de pericia o estudio a solicitar de las mismas.

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La técnica correcta de levantamiento, se aplicará según la forma en que se encuentran las muestras. En el cuadro siguiente, se describen las diferentes técnicas de levantamiento. 1.5.

OBJETO DE LA PERICIA QUÍMICA FORENSE

Conforme a la presentación de las posibles muestras de sangre en el lugar del hecho; en el cuadro siguiente, se establecen los objetos de la pericia química.

PARCIALMENTE LIQUIDAS

Técnica de levantamiento

A. Extracción desde el interior del cuerpo, por distintos medios de punción (cardiaca, venosa, arterial) (Ver foto Nº 6 al final del capítulo) LÍQUIDAS

LIQUIDAS

Presentación

B. Levantamiento desde el interior del cuerpo o del lugar, con jeringas, goteros o pipetas tipo Pasteur. (Ver foto Nº 5 al final del capítulo) Se colecta la parte de la sangre entera todavía líquida o el coágulo mismo, por medio de una pipeta, gotero o espátula, colocándolos en tubos de ensayo limpios y secos. Agregar suero fisiológico doblando el volumen de la muestra para evitar que se seque.

Objeto de pericia Alcoholemia: 2 a 3 ml, con o sin anticoagulante (según técnica analítica disponible) Tóxicos: 10 ml preferentemente sin anticoagulante, en caso de necesidad se recomienda el fluoruro de sodio. Tipificación: 1 ml, preferentemente con anticoagulante tipo E.D.T.A Naturaleza, especie y tipificación: 1 ml con suero fisiológico.

Naturaleza, especie y tipificación *Resulta inútil la investigación de alcohol y tóxicos en este tipo de muestras, pues no se tiene certeza de: el tiempo transcurrido, ni las condiciones de conservación de ellas.

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COAGULADAS

Presentación

Técnica de levantamiento

Colectar el coágulo y guardarlo en un tubo de ensayo limpio y seco. Agregar suero fisiológico para mantenerlo fresco.

Objeto de pericia

Naturaleza, especie y tipificación.

SECA O MANCHA

1. RASPADO: de muestras depositadas sobre soportes no absorbentes de superficie lisa, mediante algún instrumento con filo, tipo bisturí o lanceta. Las escaras obtenidas se colocan en tubos limpios y secos o sobres de papel. 2. FROTACIÓN: de la mancha con hisopo, embebido en suero fisiológico depositada en soportes absorbentes de superficie porosa y no absorvente *En circunstancias extremas pueden utilizarse agua de canilla, pozo o lluvia, reemplazando inclusive el hisopo por gasa o tela de algodón, preferentemente sin color. (Ver foto Nº 7 al final del capítulo)

Naturaleza, especie y tipificación.

3. CORTE: de la muestra en casos en que el soporte sea de traslado dificultoso. Solicitar la autorización pertinente y prever el corte de un blanco (porción del mismo soporte libre de mancha). Tener en cuenta que es mejor remitir el soporte en su totalidad para profundizar en detalles.

PRENDAS DE VESTIR O DE CAMA

4. REMISION: siempre que sea factible, remitir las muestras sobre el soporte original íntegro, lo que permitirá realizar observaciones de interés. Remitir las prendas, preferentemente en bolsas de papel. Si la remisión no va a ser inmediata proceder al secado de las mismas al aire libre, NO al sol.

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Naturaleza, especie y tipificación.

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2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALITICO

2.1.

DIAGNÓSTICO GENÉRICO (Determinación de la naturaleza):

Aunque la muestra en estudio sea de naturaleza inminentemente sanguínea, es necesario realizar su diagnóstico genérico par darle un valor legal y excluir aquellas que siendo muy similares a la sangre no lo son. En este sentido es posible realizar dos grupos de reacciones: 2.1.1. Reacciones de Orientación o de Campo: Son aquellas reacciones que pueden realizarse inclusive en el lugar del hecho. Necesitan poca cantidad de muestra, son rápidas y económicas, sin necesidad de instrumental sofisticado, ni conocimientos profundos de la química para su interpretación. Sin embargo carecen de especificidad por lo que su valor analítico es de orientación, aunque el valor pericial de las mismas está en que sirven para descartar muestras cuando la reacción de éstas, arroja resultado negativo. Constituyen un grupo de reacciones químicas de coloración, que buscan las peroxidadas de la sangre, la falta de especificidad radica en que éstas mismas enzimas se encuentran presentes en los jugos de ciertas frutas y otras secreciones biológicas como pus; inclusive agentes fuertemente oxidantes como el cobre y sus sales pueden arrojar resultados falsos positivos. Procedimiento Analítico: Colocar sobre la muestra (directa o macerado) una gota de los reactivos en el orden indicado, esperar la reacción no más de 2 minutos, pasado este tiempo toda aparición de color no tendrá significado válido alguno. Reactivos más comúnmente utilizados Reactivo Muestra + (1 gota) agua Oxigenada al 3 % + (1 gota) de reactivo A: 2 gr. de fenolftaleína + 30 gr de potasa anhidra + 100 cc de agua destilada + 20 gr de polvo de zinc.

Reacción Esperada o Positiva

Color fucsia

Sensibilidad 1:1.000.000 (Reacción de Kastle-Meyer)

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Reactivo Muestra + (1 gota) de reactivo: 1 gr. de leucoverde de malaquita disuelto en 100 cc de ácido acético + 150 cc de agua destilada. Sensibilidad 1:1.500.000 (Reacción de Medinger (1 gota) Luminol + Muestra Sensibilidad 1:5.000.000

1 cc de macerado de la muestra + 1 cc de tintura de guayaco + gotas de esencia de trementina. Sensibilidad 1:20.000 (Reacción de Van Deen) Agua oxigenada + muestra Acción del Amoníaco

Reacción Esperada o Positiva

Color verde azulado

Aparición fugaz de fluorescencia lilácea, persistente cuando se pulveriza sobre una superficie y se ilumina con luz ultravioleta (Ver foto Nº 8 al final del capítulo)

Color verde pálido que vira al azul

Se producen burbujas La solución sanguínea no se altera, pero si no lo es aparecen coloraciones diversas.

2.1.2. Reacciones de Confirmación o de Certeza: Son reacciones basadas en métodos físicos, químicos e instrumentales, que tiene por objeto confirmar la existencia de sangre, al evidenciar componentes específicos y exclusivos de la misma. Necesitan de conocimientos más profundos, manejo de materiales y equipos de laboratorio. Algunos de los métodos aplicables son:  Método Óptico (Técnicas microscópicas): Consiste en la observación directa de los macerados de las manchas obtenidas por raspado, frotación en caso de que la mancha sea reciente, e inclusive hilos de los tejidos, en la búsqueda de los elementos celulares de la sangre. Los preparados pueden teñirse o no, con las clásicas tinciones de Giemsa o May Grünwald - Giemsa. Procedimiento analítico: Preparar el macerado de la muestra, coágulo, líquido o porciones de 1 cm2 de prendas u otros con solución salina, evitando diluir la muestra en exceso. Colocar una a dos gotas del macerado sobre láminas y observar al microscopio.

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 Método Químico (Técnicas microcristalográficas): Fundadas en la formación de cristales, derivados de la hemoglobina en reacción con reactivos químicos específicos, como cristales de Clorhidrato de hematina o Teichman: obtenidos por reacción en caliente del macerado con ácido acético glacial, en presencia de una sal halogenada en este caso cloro. Si se utiliza una sal de bromo, o yodo, se formarán los correspondientes cristales de bromhidrato o yodhidrato de hematina. Procedimiento Analítico: - Cristales de Teichman 1. Macerar la mancha en agua hasta obtener una solución visiblemente coloreada 2. Concentrar el macerado gota a gota sobre un portaobjetos colocado sobre plancha caliente a 60 ºC. Evitar el calentamiento excesivo. 3. Cubrir con cubreobjeto y añadir por capilaridad unas gotas de ácido acético glacial. 4. Calentar el preparado a la llama hasta que se inicie la formación de burbujas, retirar dejar enfriar y añadir de nuevo gotas de ácido acético glacial. 5. Repetir la maniobra por lo menos tres veces. Observar al microscopio los cristales en forma de prismas alargados aislados o agrupados de color amarillo o pardo - Cristales de Yodhidrato de hematina: Utiliza la misma técnica pero en vez de ácido acético utilizar el siguiente reactivo (Acido yohídrico (2 a 3 gotas), Acido acético glacial (1cc), Alcohol de 95º (1 cc), Agua destilada (1cc). Se observará en caso positivo cristales romboédricos de color castaño, tendiendo a negro. - Cristales de bromhidrato de hematina: El procedimiento es similar a los anteriores, se introduce solución bromurada entre el porta y cubre objeto y se calienta sin llegar a la ebullición y agregar una solución en partes iguales de alcohol, ácido acético, glacial y dejar evaporar. En caso positivo se observará cristales similares a los de Teichman pero de mayor tamaño y color rojo más oscuro. - Cristales de Hemocromógeno: Obtenidos por reacción del macerado de la muestra frente el reactivo de TAKAYAMA (Hidróxido de sodio al 10 % -3 ml -, Solución saturada de glucosa –3 ml -, Piridina –3ml- y agua destilada –10 ml -. La técnica es similar a la descrita anteriormente y los cristales obtenidos en caso positivo son romboidales, a veces fusiformes o en forma de hojas de helecho, pero todos de un color rosa intenso o rojo anaranjado característico.

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 Métodos Físico – Químicos (Técnicas cromatográficas): Se procede a la identificación de la hemoglobina por corrida cromatográfica, en placa delgada. Procedimiento Analítico: Se realiza la corrida cromatográfica en papel Whatman Nº 1 o sobre capa fina de silicagel, utilizando: -un macerado de sangre hemolizada como testigo, -como solvente: Metanol, Ácido Acético y Agua, en la proporción 90:3:7 y como revelador: -Primero, una solución acética de bencidina, (no debe aparecer coloración alguna); luego de unos minutos pulverizar con una solución al 3 % de agua oxigenada, de reciente preparación. La hemoglobina testigo aparecerá de color azul, confrontar la coloración con la mancha en estudio y la relación de frente que deberá ser la misma.  Método Instrumental (Técnicas Espectroscópicas): Se puede también identificar la sangre a través del espectro de absorción de la hemoglobina y de alguno de sus derivados, pues como es sabido, la longitud de onda y la intensidad de las bandas de absorción de los espectros respectivos caracterizan las sustancias. Los principales espectros a investigar son los de la Oxihemoglobina, Hemoglobina, carboxihemoglobina, Hematina alcalina y Hemocromógeno. 2.2.

DIAGNÓSTICO ESPECÍFICO (Determinación de la Especie):

Confirmada la naturaleza sanguínea de la mancha, se podrá con el diagnóstico específico establecer si la sangre es humana o no lo es. Varios son los métodos y técnicas que pueden ser aplicadas para responder esta interrogante pericial. 

Método inmunológico, basado en la típica reacción “antígeno-anticuerpo”.

- Antígeno: Es toda sustancia que introducida en un organismo vivo origina anticuerpos. - Anticuerpo: Es la sustancia producida por el organismo vivo, en respuesta al antígeno y que reacciona exclusivamente con él. Por lo que basta conocer uno de ellos para identificar al otro.

a) Técnica de inhibición de la antiglobulina humana: Se aplica la reacción de Coombs, a las manchas de sangre, para demostrar la presencia de anticuerpos bloqueantes. La no aglutinación indica sangre humana. Fundamento: Los hematíes “O” Rh POSITIVO, sensibilizados con los anticuerpos bloqueantes (Anti-D), se aglutinan al añadirles suero antiglobulina humana o suero de Coombs, pero si este anticuerpo se ha puesto en contacto antes con una proteína humana ha agotado su capacidad de reacción y ya no es capaz de aglutinar a los hematíes.

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Procedimiento Analítico: I) Técnica para Sensibilización de Hematíes “O” Rh POSITIVOS: 1. Lavar los glóbulos rojos “O” Rh POSITIVOS, (se puede utilizar un pool), con solución salina hasta obtener sobrenadante límpido. 2. Tomar 0,5 ml de paquete globular lavado y diluir con 1ml de Anti-D (1:4 en solución salina), llevar a Baño María por una hora. 3. Lavar la solución anterior, tres veces con solución salina. 4. Diluir los glóbulos rojos sensibilizados, al 5 % en solución salina. II) Técnica de Inhibición de la Antiglobulina Humana: 1. Colocar 4 gotas del macerado (en solución salina) de la muestra a analizar, agregar 1 gota de suero de Coombs 1:4 (en solución salina). 2. Incubar en Baño María de 37ºC por 30 minutos. 3. Agregar 1 gota de glóbulos rojos sensibilizados al 5% y volver a incubar a BM 37ºC por 15 minutos. 4. Centrifugar 2 minutos a 1000 r.p.m. y leer los resultados. GR AGLUTINADOS= Test de Coombs Positivo, se interpreta como ausencia de Globulina Humana GR NO ALUTINADOS= Test de Coombs Negativo, se interpreta como presencia de Globulina Humana, que indica presencia de sangre humana. Recomendación: Hacer controles de reacción, utilizando: - Solo GR sensibilizados como blanco, -sangre humana y sangre animal conocidos. b) Test de Outcherlony: Se utiliza una placa de vidrio cubierta de agar-gel en solución salina o, en tampón veronal en solución salina más unas gotas de mertiolate. Se realizan en la misma unos hoyos para que contengan el anticuerpo y los antígenos (antígeno problema y los sueros de control: sueros de animal y extracto del soporte no manchado). Si se produce una correspondencia antígeno: anticuerpo se detecta una precipitación entre el hoyo que contiene el problema y el del antisuero humano. Con éstas técnicas inmunológicas se diferencia la sangre humana de la animal; también es factible hacer la diferenciación del género animal, utilizando los antisueros específicos (bovino, equino, vacuno, etc.), lo que constituiría de mucha utilidad, como dato o prueba científica en hechos de abigeato. 

Método Óptico: Consiste en la observación directa de la mancha, en la búsqueda de las células propias de la sangre, las que por su morfología y tamaño característicos aportarán datos identificatorios. En referencia se acota que, en

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los mamíferos los hematíes carecen de núcleo y se establecen diferencia de tamaño entre las diferentes especies, en las aves, reptiles y batracios son nucleados y de forma elíptica. 2.3.

DIAGNOSTICO INDIVIDUAL (Determinación del Grupo Sanguíneo):

Confirmado el origen humano de la muestra sanguínea, la etapa final de un análisis de rutina de sangre, en un laboratorio forense o criminalístico, consiste en individualizar dicha muestra para establecer la relación entre los protagonistas y el hecho. Aunque considerando a víctimas y victimarios, si existe similitud de grupo sanguíneo entre ellos no se podrán establecer conclusiones ni nexos valederos. La individualización e identificación de una mancha de sangre, puede hacerse aplicando los siguientes métodos:  Método Inmunológico: Varios son los aglutinógenos de la sangre de una persona, que permiten la clasificación de ellos en los diferentes sistemas. El sistema ABO, universalmente conocido es el de mayor utilidad a la hora de buscar estos “aglutinógenos” en sangre fresca y en manchas sanguíneas, dada su mayor estabilidad. -Aglutinógenos: Son proteínas presentes en las membranas de los hematíes y son los que determinan el grupo sanguíneo de las personas. -Aglutinina: Son los anticuerpos que existen en el plasma de las personas, distintos a los aglutinógenos presentes en sus hematíes.

a) Tipificación Directa: El método habitual para la determinación del grupo sanguíneo es aplicable a muestras de sangre líquidas, parcialmente coaguladas y/o el coágulo fresco. Procedimiento Analítico: Es por todos los profesionales bioquímicos y técnicos de laboratorio clínico, el procedimiento específico a realizar y que consiste en el agregado de una gota de antisuero (A, B) respectivamente a una gota de la muestra problema; la interpretación del grupo “O” se hará por descarte y la reacción a observar es la aglutinación. Según el siguiente esquema: Anti A Anti B Resultado aglutina no aglutina Grupo A no aglutina aglutina Grupo B aglutina aglutina Grupo AB no aglutina no aglutina Grupo O

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En esta determinación se puede, con el mismo procedimiento y el antisuero correspondiente (Anti D) investigar el Factor Rhesus (Rh). b) Técnica de Absorción – Elusión: De mayor práctica por la autora y sus colaboradores. Consiste en la identificación de los aglutinógenos presentes en la mancha, con los respectivos antisueros (A, B, H*), empleando hematíes testigos (portadores de aglutinógenos conocidos), para la lectura final, tras la ruptura del complejo realizada a 56º Celsius. Por cuestiones de disponibilidad, en la rutina del trabajo, la interpretación del grupo “O” se hace también por descarte, y la interpretación igual que en la tabla más arriba descrita. Procedimiento Analítico: 1º) Colocar en dos tubos marcados A y B respectivamente, telas manchadas con el macerado de la muestra sanguínea a analizar. 2º) Adicionar a cada tubo dos a tres gotas de solución salina fisiológica fría (4ºC) y una gota de antisuero A y B respectivamente a los tubos marcados. 3º) Dejar en reposo los tubos durante 10 a 12 horas en frigorífico. 4º) Retirar la solución salina y el exceso de antisuero, lavar la mancha de los tubos con solución salina fría por cinco a seis veces, dejando reposar cada lavado por 20 minutos en el frigorífico. 5º) Después del último lavado retirar toda la solución salina. 6º) Añadir nuevamente solución salina fría de dos a tres gotas. 7º) Colocar los tubos a Baño maría de 56 ºC, durante 15 minutos, agitando de tanto en tanto. En este paso se rompe la unión antígeno-anticuerpo que pudiera establecerse durante el paso 3ro. 8º) Sacar el soporte de la mancha (tela) de los tubos. 9º) Agregar a cada tubo, una gota de solución al 5 % de glóbulos rojos A y B en solución salina, a cada tubo respectivo y dejar en el refrigerador por espacio de 1 hora. 10º) Sacar los tubos de la heladera y centrifugar a 1500 r.p.m. por espacio de tres minutos. 11º) Observar los resultados de aglutinación directamente y al microscopio. La interpretación es la misma que en la técnica directa. Esta técnica es aplicable a los aglutinógenos (*) de los demás sistemas; disponiendo de los antisueros respectivos; pero considerando la mayor fragilidad de esos antígenos, el sistema ABO es de utilidad difundida en el campo forense. (*) No todos los sistemas pueden ser utilizados en el campo forense, debido a la extremada fragilidad de algunos.

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 Métodos Bioquímicos: Consisten en técnicas aplicables a la búsqueda de proteínas polimorfas específicas que existen en una determinada especie, así como de isoenzimas (proteínas enzimáticas que cumplen funciones de regulación en los diferentes procesos bioquímicos de los organismos.)

3.

LIMITACIONES DE LA PERICIA DE SANGRE

Con la sola pericia de sangre, no se puede determinar lo siguiente:  Tiempo de exposición de la mancha de sangre  Raza de la persona de quien proviene la sangre  No es posible identificar si la sangre proviene de un individuo específico. (**) (**) Estudios genéticos del ADN, permitirán identificar específicamente a un individuo.

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FOTOS CAPITULO I - SANGRE

FOTO Nº 1: Chorro, salpicaduras producidas por lesión de arterias

FOTO Nº 2: Gota circular (derecha) Movimiento de la fuente de sangre

FOTO Nº 3: Múltiples gotas y gotas en forma de Signo de admiración

FOTO Nº 4: Determinación del punto de convergencia

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FOTO Nº 5: Levantamiento con pipeta Pasteur

FOTO Nº 6: Extracción por punsión venosa

FOTO Nº 7: Técnica de frotación para manchas en soportes no absorbente

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a.

b. FOTO Nº 8: a. Manchas lavadas, no visibles a simple vista b. Manchas visibles por acción del reactivo luminol

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CAPÍTULO II – PARTE ESPECIAL

SEMEN Llamado también esperma o líquido seminal, es el producto de secreción del aparato genital masculino, que aparece en el hombre después de la madurez sexual. Recién emitido, es un líquido filante, cremoso, de color opalino que tiende a amarillo verdoso y de olor característico. Está compuesto por los espermatozoides que son las células del semen, y el plasma seminal, que constituye el líquido en el cual se mueven los espermatozoides (de 200 a 400 millones en una eyaculación normal); el plasma seminal contiene diversas sustancias que se hallan disueltas en él, como electrolitos, glucosa, urea, etc., y algunas de ellas en cantidades importantes como la enzima fosfatasa ácida, otras sustancias fosforadas como la espermina y la colina, entre otras que resultan útiles para la investigación de semen como veremos más adelante. El semen es un elemento probatorio decisivo en los delitos contra la libertad sexual de las personas y su hallazgo: - En la vagina, es un dato confirmado para establecer diagnóstico de cópula, facilitando luego la tipificación del hecho. - En manchas encontradas en la ropa de la víctima pueden ayudar a corroborar la acusación. 1. MUESTRAS PARA ESTUDIO 1.1.

CARACTERÍSTICAS

Muestras depositadas sobre soportes varios, sospechosos de contener semen, presentan ciertas características, según la naturaleza del soporte que las contenga. a) Si el soporte es absorbente, las manchas se presenta de un color grisáceoamarillento, y si el soporte es flexible como en el caso de las telas, estas se vuelven acartonadas o apergaminadas al tacto.

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b) En soportes no absorbentes o impermeables, cuando la superficie es: Rugosa: el semen al secarse, deja costras o escamas más o menos grandes de color blanquecino transparente; - Lisa: El esperma se extiende en una mancha grande, delgada, transparente y poco visible sobre fondo oscuro.

1.2.

BÚSQUEDA Y LOCALIZACIÓN

En hechos punibles que atentan contra la autonomía sexual de las personas, se buscarán las muestras, a más de en la víctima, sobre los más diversos tipos de soportes hallados en el lugar de los hechos, como por ejemplo, alfombras, prendas de vestir, ropas de cama, tapizados, pisos, etc. La localización de muestras, se facilitará utilizando luz ultravioleta sobre superficies varias del lugar del hecho; cuando estas superficies son examinadas bajo la acción de ella y siempre que no sean de fondo fosforescente, es posible observar que muestras sospechosas fluorescen ante esta luz, con una fluorescencia amarillo verdosa; que aunque no resulta específica, ayuda a seleccionar las zonas para estudio. En tanto que en la víctima, comúnmente se localiza en su forma líquida en la cavidad vaginal o anal, aunque pueden también ser localizadas en otras partes del cuerpo, como la boca buscando en la mucosa gingival y yugal, o localizarlas en forma de mancha blanquecina, principalmente en la región púbica y cara interna de los muslos. 1.3.

LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO

Las muestras se recogen de acuerdo a como se las encuentran y el lugar de su localización, atendiendo también a los cuidados generales del tratamiento de los indicios, así entonces: a) En el caso de soportes flexibles y absorbentes: como prendas de vestir, ropas de cama, toallas, etc.; es preferible remitir las mismas como tal y en caso de que ellas se encuentren húmedas, secarlas en corriente de aire sin exponerlas al sol, si el soporte es muy grande y no puede ser transportado hasta el laboratorio, se recomienda (previa autorización pertinente) remitir un corte de por lo menos 4 cm2, de la parte afectada y otra de la no afectada con las mismas dimensiones. b) Si el soporte es no absorbente: se procederá a levantar las características escamas, por medio de la técnica del raspado, colectando las mismas en tubos de ensayo limpios.

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c) En el caso de extracción de muestras a víctimas de delitos sexuales: ésta debe ser realizada por personal idóneo, utilizando para ello preferentemente hisopos secos y estériles. Si el material deberá ser sometido posteriormente a estudio genético, es preferible tomar dos muestras y colocar los hisopos una vez seco, cada uno por separado en un tubo limpio, seco y estéril. Pueden también ser útiles, láminas de vidrio con extendidos de exudados vaginales o anales. Cuando se trata de tomar muestras de otras partes del cuerpo, utilizar un hisopo embebido en solución salina y proceder a frotar la mácula.

1.4.

OBJETIVOS DE LA PERICIA QUÍMICA FORENSE Los objetivos del análisis de éstas muestras, podrán ser los siguientes:

a) b)

Investigar la presencia de semen. Determinar especie de la muestra.

2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALÍTICO Cuando las muestras se encuentran secas o sobre soportes absorbentes, se procederá a la maceración o extracción del soporte. Se sugieren como métodos de extracción: a) Maceración simple con solución salina. b) Destrucción del soporte con ácido sulfúrico al 80 % (destruye el soporte pero no los espermatozoides).

2.1.

DIAGNÓSTICO GENÉRICO (Para determinar naturaleza):

En la investigación de la presencia de semen, es necesario confirmar su naturaleza. Para ello se pueden emplear, los siguientes métodos:  Método óptico: El hallazgo de al menos un espermatozoide, otorga un valor analítico de certeza absoluta para naturaleza; la muestra se trata de semen, pues éste es el único fluido que los contiene. En cuanto al valor pericial, estará sujeto al tipo de hecho investigado, sin embargo cabe consignar que el hallazgo del espermatozoide es signo de eyaculación, pero no con lleva a que ésta, se halle relacionada con un acto violento.

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Procedimiento analítico: Colocar una gota del macerado de las muestras sobre lámina, cubrir con cubre objetos y observar al microscopio (x10 y x45). Los preparados pueden ser directos o sometido a previa tinción con Hematoxilina-eosina, azul de metileno, eritrosina amoniacal, etc. Se puede también concentrar la cantidad de espermatozoides sobre todo en macerados provenientes de prendas y otros soportes, centrifugando el mismo para observar el pellet al microscopio.  En caso de muestras contaminadas con hongos, resulta de gran utilidad la tinción con Anaranjado de Acridina, pues los hongos ricos en ARN fluorescen de color rojo ante la luz ultravioleta del microscopio, en tanto que las cabezas sueltas de espermatozoides ricas en ADN, fluorescen con coloración amarillo verdosa Por otro lado la imposibilidad de visualizar un espermatozoide, no significa que en la muestra no se encuentre semen, pues esta circunstancia puede deberse a causas clínicas del supuesto autor, como ser: - la azoospermia en donde el semen eyaculado carece de espermatozoides, por enfermedades congénitas o adquiridas e incluso una vasectomía y - la oligospermia, cuando el semen eyaculado contiene menos número de espermatozoides que lo normal. También puede influir para el hallazgo de espermatozoides; la higienización de la víctima, el tiempo transcurrido entre la toma de muestra y el hecho, así como los espermatozoides destruidos: por deshidratación de la muestra. La alternativa para todos estos casos descritos es el hallazgo de sustancias disueltas en el plasma seminal, centrando la búsqueda en aquellas que caractericen de algún modo al semen. Se describen a continuación los métodos utilizados más frecuentemente por la autora y colaboradores.  Métodos químicos: Basados en la búsqueda de los componentes del plasma seminal, mediante reacciones de tipo enzimáticas y de formación de cristales. a) Reacciones Enzimáticas: Consiste en la identificación de la fosfatasa ácida del plasma seminal, cuya concentración en él, es de 40 a 400 veces más que en otros líquidos biológicos. El valor analítico de certeza para la prueba, se lograra cuando se cuantifica la reacción, a razón de la concentración de fosfatasa más arriba citada. Un análisis cualitativo no implica certeza de naturaleza. A modo de información, se conoce que existen técnicas complejas aplicables también al estudio de la espermina y la colina.

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Procedimiento Analítico: Utilizar el macerado en solución salina de las muestras en estudio. Seguir la técnica analítica correspondiente a reactivos disponibles en el mercado, y basados en su mayoría en la medición de la actividad de dicha enzima sobre un sustrato que contiene fósforo. b) Reacciones Microcristalográficas: Basadas en la obtención de cristales específicos de las bases colina y espermina, componentes del plasma seminal, que se originan con los reactivos ácido pícrico e Yoduro, obteniéndose cristales de picrato de espermina e yoduro de colina, con formas y coloración características. Actualmente es una técnica poco utilizada, debido a la gran variedad de muestras distintas al semen que contienen en su composición las mencionadas bases. Procedimiento Analítico: La reacción se realiza sobre lámina de vidrio. 1. Colocar una gota del macerado. 2. Cubrir con cubre objeto. 3. Agregar el reactivo específico (*) para cada caso entre lámina y cubre objetos para que corra por capilaridad. 4. Observar al microscopio. 5. Ver cuadro de referencia relativo a las características de los cristales a observar. Reactivo Se forman cristales de: Florence: Yodo metálico (2,54 g) Yoduro de colina Yoduro de potasio (1,56 g) Agua destilada (30 ml) Barberio: Solución saturada de Ácido pícrico.

Son sus características: Láminas romboidales de color pardo

Cristales fusiformes, Picrato de espermina refringentes de color amarillo.

Se mencionan también otras técnicas que resultan, de mayor especificidad, pero poco accesibles en nuestro medio; ellas se basan en la búsqueda de sustancias específicas del plasma seminal: - Determinación de la Proteína P30, (Proteína exclusiva del semen) que puede ser aislada por métodos electroforéticos, y la Determinación de PAS (Antígeno Prostático Específico), en su mayoría por métodos inmunológicos combinados; éste último es segregado por la próstata en el comúnmente conocido como líquido lubricante, por lo que su hallazgo resulta aún positivo en aquellos atentados en los que no se ha llegado a la cópula o eyaculación.

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2.2.

DIAGNÓSTICO ESPECÍFICO (Para determinar especie)

La mayoría de las veces no es un problema del investigador determinar la especie a la que pertenece una muestra de semen, pero en caso de tal necesidad la respuesta analítica estará en aplicar los siguientes métodos:  Método óptico: En la misma metodología más arriba descrita, es imprescindible ahora detenernos en la morfología y dimensiones de los espermatozoides, ya que existen diferencias entre los espermatozoides del espécimen macho de cada especie animal. Se consigna una técnica basada en la tinción de los espermatozoides que permite diferenciar espermatozoides de distintas especies animales entre sí y del humano, los colorantes utilizados son la doble coloración de azul de metileno-eosina y hematoxilina-eosina, obteniéndose así la diferencia en las zonas de tinción en cuanto a las partes del espermatozoide, a lo que podemos sumar las diferencias morfológicas y dimensionales propias de cada especie. Procedimiento Analítico: Coloración con Hematoxilina – eosina. 1. Realizar un preparado para microscopía. 2. Cubrir con hematoxilina – eosina por 5 a 10 minutos y luego lavar con agua destilada. 3. Cubrir con eosina durante 1 minuto y lavar la preparación con agua corriente. Algunos ejemplos son: Forma del espermatozoide Hombre

Dimensiones

Perro

Longitud total: 60 micrones. Cabeza con escasa diferenciación de Espesor de la cabeza: 4 sus zonas, no es visible el cuello. micrones

Gato

Longitud total: 50 micrones. Cabeza en forma de bala, con Espesor de la cabeza: 3 pequeña zona nuclear levemente micrones coloreada.

Longitud total: 40 a 50 micrones. Espesor de la cabeza: 4 micrones

Características observadas con hematoxilina – eosina Cabeza púrpura intenso en la base, apenas oval, no se observa el cuello.

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 Método Biológico - Inmunológico: Basado en la reacción anafiláctica de un animal de laboratorio. Procedimiento Analítico: 1. Inyectar a un cobayo 1 cc de esperma humano fresco y en solución fisiológica. 2. A los quince días inyectar por vía intracardíaca, 1 cc de extracto de la mancha sospechosa. 3. Observar si se produce alguna reacción en el animal de tipo shock anafilático

2.3.

OTROS ESTUDIOS

a) Investigación de drogas de abuso: Se ha desarrollado una serie de técnicas mediante el sistema de RIA (radioinmunoensayo); éstas permiten detectar ciertas drogas de abuso, en las manchas seminales y otros líquidos biológicos como saliva, sangre, sudor y hasta en pelos. El RIA es un método que trabaja con escasa concentración de muestra y con muy alta sensibilidad y especificidad. Se fundamenta en el hecho de detectar un compuesto radioactivo en la reacción antígeno-anticuerpo. b) Tipificación de las Manchas Seminales (Sistema ABO): Aunque constituye un delicado problema el detectar antígenos correspondientes al grupo sanguíneo ABO, en manchas seminales, esto es factible, cuando nos encontramos ante individuos secretores, que son aquellos individuos que segregan sus antígenos sanguíneos correspondientes en otros líquidos biológicos, el principal problema y limitación de este estudio, es el hecho de que frecuentemente las manchas en estudio se hallan mezcladas con fluidos propios de la víctima (secreción vaginal), por lo que ante estos hechos es necesario descartar primero el carácter secretor o no de la víctima y el supuesto autor.

3.

LIMITACIONES DE LA PERICIA DE SEMEN.

La pericia de semen por sí sola, no puede identificar a un individuo. A los efectos de determinar si la muestra de semen pertenece a un individuo específico, se deberá recurrir al análisis de ADN, con la salvedad que indefectiblemente la muestra analizada deberá contener espermatozoides.

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CAPÍTULO III – PARTE ESPECIAL

PELOS Los pelos son filamentos cornificados que se forman por invaginación de la piel y se desarrollan en la epidermis. Está compuesto por proteínas, queratina y melanina. Su longitud varía de entre unos milímetros hasta más de un metro y se distribuyen con densidad variable por toda la piel, a excepción de los labios, las palmas de la mano, las plantas de los pies, las caras inferiores y laterales de los dedos de la mano y del pie. En el pelo se distinguen anatómicamente, las siguientes partes: PUNTA, extremo distal del pelo, TALLO cuerpo del pelo y BULBO o raíz del pelo. Punta

Tallo

Bulbo o Raíz

Morfológicamente el pelo está constituido de afuera para dentro, por: a) La cutícula: Es la cubierta externa, encargada de dar al pelo estabilidad y resistencia, está formada por células o escamas transparentes, muy delgadas que se han queratinizado, superpuestas unas con otras, semejando a un tronco de palmera y apuntando siempre a la punta del pelo. La variedad de modelos de cutícula, formadas por las escamas de animales, hace que el estudio de la misma sea muy importante para la identificación de la especie a la que pertenece la muestra en estudio. Los tipos pueden ser: simple, aserrada, dentada, flatenada, escamosa, crenada, elongada, ovalada, acuminada y escamosa, ésta última característica de la especie humana.

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b) La corteza: sostenida de la capa protectora de la cutícula, formada por células homogéneas y muertas, contiene los gránulos de melanina, pigmento encargado de dar la coloración al pelo. La importancia forense de la corteza, radica en el hecho de que el color y la distribución de los pigmentos, constituyen puntos de comparación, los elementos estructurales de la corteza son examinados al microscopio. c) La médula: Es la parte más interna del pelo, a modo de canal, está formada por capas celulares alternadas, con espacios de aire denominados sacos aéreos. Recorre a través del pelo, y en los animales este canal es predominante, mientras que en la especie humana es de diámetro menor. El análisis de pelos, ayuda en el proceso investigativo de la siguiente manera: - Coloca al sospechoso en la escena del crimen, mediante la comprobación del intercambio de pelos entre la ropa de la víctima, el sospechoso y la escena del crimen. - Identifica la escena del crimen. - Identifica el arma o el instrumento utilizado para cometer el delito. - Identifica un vehículo participante en el cometido del hecho o en acciones relativas a él. - Corrobora el testimonio del testigo. La utilidad del análisis pericial de pelos en Criminalística es amplia, se hace mención a continuación, de los aportes que pueden darse por el laboratorio Criminalístico de la Policía Nacional: 1. Relaciona un/unos individuos con un hecho determinado. 2. Establece identidad a través de las características morfológicas estudiadas (identidad indirecta). 3. Determina i es animal o humano. 4. Puede indicar datos sobre: la presencia de un acto violento, el área del cuerpo de la cuál proviene, el lugar donde ocurrió el hecho y si ha sido alterado con colorantes o tintes.

1.

MUESTRAS PARA ESTUDIO

Dependiendo del objeto de la pericia, si se trata de establecer la naturaleza pilosa de las muestras, o la especie humana de ellas, serán suficientes las muestras obtenidas del lugar del hecho en su entorno inmediato y mediato. En cambio,

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cuando las muestras serán sometidas a estudio de comparación, deben ser dos los tipos de muestras: -Pelos dubitados o indicio, que serán recolectados en el lugar del hecho, y los -Pelos Testigos que serán recolectados del/los sospechosos a fin de establecer semejanza o diferencia.

1.1.

LOCALIZACIÓN DE LAS MUESTRAS:

La búsqueda minuciosa de muestras problemas o pelos dubitados es muy importante, ya que estas se pueden encontrar en los más diversos lugares, según el hecho criminal del que se trate: así en casos de violación es común su localización en ropas de cama, prendas de vestir de la víctima, así como en ella misma y el victimario; en casos de homicidio, bajo las uñas y mano de la víctima o en su entorno. Como norma general se buscarán en los siguientes lugares: a) En la víctima y sospechoso (manos, ropas etc.). b) En los instrumentos o herramientas utilizadas en la agresión. c) En el tubo cañón y salientes de las armas de fuego, como el cerrojo (especialmente en casos de suicidio por arma de fuego). d) En peines, cepillos, suelos, lavabos y en lugares que se relacionen con el hecho a través de la investigación. 1.2.

COLECCIÓN Y TRATAMIENTO

Se fijan las siguientes normas: a) No se deben recogerse directamente con la mano. b) Es preferible, de ser posible trasladar el pelo en su soporte original. c) Utilizar la aspiradora para búsqueda de lugares amplios y cerrados, como automóviles y muebles. d) Las muestras deben ser siempre arrancadas, no cortadas y en cantidad suficiente. Para pelos testigos, tomar por lo menos 5 muestras de cada zona de la cabeza (frontal, parietal, occipital, y temporal) de tal modo a coleccionar las diferentes muestras que pueden tener medidas variables debido al corte de pelo. Se pueden también tomar muestras de otras zonas pilosas del cuerpo (pubis, extremidades, axila, barba, cejas, etc.). e) Se recogen siempre y sin excepción pelos de la víctima y del sospechoso. f) La recogida de muestras testigos deberá ser de las mismas regiones corporales, ya que se deben comparar pelos de zonas parecidas.

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g) Se remitirán las muestras de pelos, preferentemente en sobres de papel, en bolsas de plástico transparente de cierre hermético, acordes al tamaño o en tubos de ensayo perfectamente limpios y con tapas. h) Nunca pegar los pelos o utilizar papel adhesivo para sujetarlos. i) Los pelos de personas y/o zonas corporales diferentes, se remitirán en bolsas distintas y con etiquetado correcto. j) Para la colección de muestras se utilizan 2 técnicas: Caída espontánea: Peinar la zona pilosa seleccionada y recolectar las muestras así obtenidas en un sobre o tubos de ensayo limpios, utilizar siempre recipientes acorde al tamaño de las muestras. Extracción con pinzas: utilizar pinzas para obtener las muestras cuidando de tomar las muestras desde la zona más próxima a la raíz para evitar el corte de ellas. “NUNCA CORTAR LAS MUESTRAS DE PELO”

1.3.

OBJETIVO DE LA PERICIA QUÍMICA FORENSE

a) Determinar naturaleza. b) Determinar especie. c) Establecer semejanza o diferencia entre las muestras.

2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

2.1 ESTUDIO MORFOLÓGICO DEL PELO: El estudio microscópico de los caracteres morfológicos del pelo y algunos procedimientos específicos, permite realizar tres clases de identificación: 2.1.1. Identificación General: Para determinar naturaleza. Permite distinguir lo que es pelo de las fibras vegetales o sintéticas. Procedimiento Analítico: a) Quemar la muestra libre de sangre o parásitos. Si se trata de pelo humano o animal produce un olor característico a “cuerno quemado” y deja residuo; lo que no ocurre si se trata de fibras. b) Observadas al microscopio las fibras carecen de estructura similar al pelo.

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2.1.2. Identificación específica: Para determinar especie: Se basa en la observación microscópica de los caracteres morfológicos de las muestras. Especialmente en parámetros determinados que se verá más adelante. 2.1.3. Identificación individualizada: Para establecer identidad. La individualización de los pelos o identificación, puede tener una orientación: comparativa, cuando se basa en los caracteres morfológicos observados; ó individualizada, cuando se puede llegar al diagnóstico individual de pertenencia a una persona única, por ejemplo a través del estudio genético o polimorfismos del ADN y de las queratinas que constituyen las principales proteínas estructurales del pelo. Parámetros morfológicos considerados La observación microscópica minuciosa y detallada de los parámetros morfológicos, permite no solo dar respuesta a las interrogantes periciales, sino que permite la obtención de datos que pueden resultar de interés para la investigación.  Medidas: Comprende: Largo Total (del pelo), Diámetro Total, Diámetro Medular. Éstas se obtienen calculando la media aritmética de las distintas mediciones obtenidas.  Indice Medular (IM): es la relación que existe entre el diámetro medular y el diámetro total del pelo. Puede establecer la especie a la que pertenece el pelo, pues se toma como referencia el valor de “1/3”; por encima de éste, corresponde a una especie animal distinta al homo sapiens y por debajo a la especie humana. IM = Diámetro de la médula Diámetro total del pelo  Tallo: Orienta sobre la zona del cuerpo de donde proviene la muestra. Puede ser cilíndrico, oval, aplanado o triangular.  Médula: Indica la especie a la que pertenece la muestra. Es importante destacar que la presencia y apariencia de la médula varía en un mismo individuo, por lo que un pelo humano puede exhibir o no su médula, (en cuyo caso se le llama ausente), o tenerla fragmentada, discontinua, continua o interrumpida, o ser opaca o translúcida; en cambio en la mayoría de los animales las médulas son continuas o ininterrumpidas, globular, simple, compuesta, etc. (Ver fotos Nº 9, 10, 11 y 12 al final del capítulo)

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 Tipo de pelo: Orienta sobre la región del cuerpo a la que pertenece, o características particulares del individuo. Rizado puede provenir de la zona púbica, otros tipos de pelo son lacio, ondulado, crespo y ligeramente ondulado.  Cutícula: Indica la especie a la que pertenece el pelo, la cutícula en el hombre es del tipo escamosa, en los animales puede ser elongada, acuminada, aserrada, etc. (Ver foto Nº 13 al final del capítulo)  Corteza – Color: En la corteza, se encuentran los depósitos de melanina, la distribución y cantidad de estos pigmentos constituye un importante punto de comparación. Aquí se distingue también si se trata de muestras de pelo teñidas o decoloradas.  Punta: Puede ser tipo aguzada, cortada, roma en bisel, desflecada, aportando datos sobre el tiempo de corte (cortada, roma, etc.). (Ver fotos Nº 14, 15 al final del capítulo)  Bulbo: En él se encuentran la mayor cantidad de células que contienen la información para la determinación del sexo de la muestra, siempre y cuando este se encuentre en estado anagénico. Puede además aportar datos sobre el modo en que se obtuvieron las muestras, como por ejemplo si hubo violencia (bulbo arrancado, roto, ausente) o no (bulbo lleno o estado telogénico). (Ver fotos Nº 16, 17 al final del capítulo)  Adherencias: Se puede hallar adherencias en el pelo que puedan aportar datos a la investigación orientan según la naturaleza de ellas; - sobre la distancia del disparo (si hay quemaduras y residuos de pólvora), - la violencia en el hecho (si se encuentra sangre), - elementos relacionados a delitos sexuales (ante el hallazgo de materia fecal, semen y otros), así como el lugar físico de contacto con el pelo (cuando se encuentra pinturas domésticas, arena, etc.)  Otros: Se tiene en cuenta en éste parámetro, características particulares de la muestra estudiada, como ser enfermedades capilares debidas al metabolismo del pelo como la Pili Annulate, Tricorrexis, Monilethrix, Tricorrexis nodosa, Tricorexis invaginata tricoptilosis nudosa, Pili Torti, Tricoptilosis Nodosa, etc. O las enfermedades debidas a la presencia de parásitos como hongos (caspa) o pediculosis capitis (piojos y liendres). (Ver dibujo esquemático al final del capítulo)

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Procedimiento Analítico: La técnica utilizada es realizar primeramente una observación macroscópica de las muestras para determinar: 1. Aspecto externo: limpio, sucio, olor, dimensiones externas, medida del arco del pelo. 2. Las dimensiones o medidas externas, de la muestra se logran utilizando regla centímetrada y ocular micrométrico. 3. Observadas estas características generales se procederá a una observación microscópica directa (10x) a fin de observar adherencias microscópicas como restos de sangre, semen, parásitos, etc.; se procede luego a una limpieza de la muestra con solución salina, si la muestra es teñida se puede decolorarla con agua oxigenada. 4. Finalmente se observarán y considerarán las características morfológicas particulares de cada muestra (10 x y 45x). 5. En el caso del estudio de cutícula se puede realizar el molde de la misma, introduciendo el pelo en una solución tipo vinílica o esmalte para uña, colocar la muestra sobre la lámina y dejar secar, una vez que el preparado esté seco, se retira la muestra con sumo cuidado y se observa el molde obtenido al microscopio. 6. Es ideal hacer un corte histológico transversal y otro longitudinal del pelo, lo que permitirá una mejor y más profunda visualización de los componentes de pelo. La comparación se realiza sobre la base de la observación microscópica de los parámetros descritos, por lo tanto el valor analítico del estudio descrito es orientativo, al igual que el valor pericial para la investigación.

2.2. OTROS ESTUDIOS a) Determinación del sexo: Los métodos de determinación del sexo, están basados en la tinción diferencial de los cromosomas sexuales. Estos se hallan en el núcleo de las células de la vaina de la raíz. En la mujer los cromosomas sexuales aparecen como un par homólogo de cromosomas XX, uno de los cuales se tiñe en una coloración característica y es reconocido como el corpúsculo de BAAR, en cambio en el hombre corresponde al tipo "xy" y el teñido del cromosoma “y” es el que realiza la diferencia. b) Determinación del grupo sanguíneo: La determinación del grupo sanguíneo al que pertenece el pelo y por ende, el individuo de quién proviene las

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muestras, es posible en aquellos individuos secretores y mediante la utilización de métodos inmunológicos altamente sensibles. c) Investigación de venenos: Venenos como el arsénico, antimonio, plomo y mercurio pueden ser investigados por métodos instrumentales como la activación neutrónica en muestras de pelos.

3.

LIMITACIONES DE LA PERICIA DE PELO.



El análisis pericial del pelo no es considerado evidencia positiva, sin embargo, es buena evidencia circunstancial.



No se puede determinar si un pelo pertenece a una persona en particular.



No se puede determinar la edad del sospechoso.



Se puede determinar el sexo del sospechoso, dependiendo de la condición de la raíz del pelo.

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FOTOS CAPITULO III - PELOS

FOTO Nº 9: Médula continua

FOTO Nº 11: Médula interrumpida

FOTO Nº 6: Médula discontinua

FOTO Nº 12: Médula translúcida

Escamosa especie humana

FOTO Nº 13: Tipos de cutícula, alongada, escamosa, crenada, flatenada

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FOTO Nº 14: Punta en bizel

FOTO Nº 15: Punta aguzada

FOTO Nº 16: Bulbo anagénico

FOTO Nº 17: Bulbo telogénico

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Dibujo esquemático: Tipos de enfermedades esquemáticas

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CAPÍTULO IV – PARTE ESPECIAL

MATERIALES DIVERSOS Se ha englobado en este grupo denominado “Materiales Diversos”; indicios de naturaleza variada que con mayor o menor frecuencia llegan hasta el laboratorio, con el objeto de ser analizados, y establecer con los resultados obtenidos, la relación triangular de víctima, victimario y lugar del hecho, así como también información referente al mecanismo del hecho. A continuación se hace mención de los métodos de mayor práctica por la autora y colaboradores, aclarando que varios otros métodos pueden ser aplicados al estudio o identificación de estos indicios.

1.

INDICIOS BIOLÓGICOS

1.1.

SALIVA La saliva es el producto de secreción de las glándulas salivales.

1.1.1. Características: - En soportes absorbentes: las manchas de saliva son blanquecinas o amarillentas. – En soportes no absorbentes: se presenta en forma de escamas o pequeñas costras, diferenciándose de las manchas seminales por ser estas últimas más grandes y acartonadas al tacto. En situaciones aisladas, es posible hallarlas en su estado natural, como líquido incoloro y viscoso. 1.1.2. Localización y Recolección: A más de observar sus características físicas, la lámpara de Wood constituye un elemento de ayuda para su localización, pues las manchas de saliva reaccionan a ella con fluorescencia azulada. En cuanto a la recolección de objetos que sean posibles portadores de saliva, se debe realizar con pinzas, hasta colocarlos en los contenedores adecuados (bolsas de papel). Si la muestra se encuentra en estado líquido, se utiliza para su colección pipetas tipo Pasteur y se dispone en tubos de ensayo limpios y secos. 1.1.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Investigar la presencia de saliva.

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1.1.4. Métodos de Estudio – Utilidad Criminalística: En cuanto a su identificación, ningún método aplicable arrojará certeza absoluta sobre su naturaleza, ya que con ellos se buscarán sustancias que pueden ser halladas en otros materiales biológicos. Su identificación puede aportar datos sobre el modo de comisión del delito, por ejemplo, una persona amordazada, dejará gran cantidad de saliva en la mordaza, debido a la gran excitación nerviosa a la que fue sometida. Otro dato importante que puede dar a conocer el estudio de la saliva, es el grupo sanguíneo (según el sistema ABO) de la persona de quién procede dicha muestra, siempre que estas personas sean secretoras.  Método óptico: - Microscopía, se busca la presencia de células epiteliales provenientes de la mucosa de la boca. 

Método químico: Se procede a la investigación de amilasa y sulfocianatos.

 Métodos inmunológicos: Se aplican técnicas de absorción – elución de antígenos para la determinación del grupo sanguíneo.

1.2.

ORINA

La orina es secretada por los riñones, y constituye la principal vía de excreción del cuerpo humano. 1.2.1. Características: - En soportes absorbentes: las manchas de orina son de color amarillo – verdosas, con olor sui generis, de bordes irregulares, definidos y con concentración del color en ellos. Es también posible encontrarla en su estado natural, o sea como líquido de color amarillo y olor característico. 1.2.2. Localización y Recolección: Cuando no es posible observar características físicas (en soportes oscuros), la lámpara de Wood resulta también eficaz, y se observa una fluorescencia blanco celeste. Para la recolección de soportes posibles portadores de orina, se utilizan pinzas y si aún están húmedos, secarlos antes de colocarlos en los contenedores adecuados (bolsas de papel). Si se la encuentra es su estado natural, se utiliza pipetas tipo Pasteur, y se dispone la muestra en tubos de ensayo limpios y secos. 1.2.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Investigar la presencia de saliva.  Métodos de Estudio – Utilidad Criminalística: En su diagnóstico genérico, no existe un único método que arrojará certeza absoluta. Su identificación puede

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aportar datos sobre el modo de comisión del delito, ó como signo característico de las muertes por ahorcamiento (por la relajación de esfínteres y su relación con la uretra) 1.3. HECES FECALES Las heces constituyen el producto de eliminación del cuerpo humano. 1.3.1. Características: Las muestras de heces son bien conocidas por sus características externas de color, olor y forma. En caso de presentarse como manchas, éstas son de color pardo marrón, con olor característico y depósito de sustancia. 1.3.2. Localización y Recolección: Reconocidas sus características físicas, se utilizan espátulas para la recolección de una pequeña porción de la muestra y se las deposita en recipientes adecuados de boca ancha, si la remisión al laboratorio va ser inmediata, no es necesario agregarle ningún conservante. Si se encuentra en forma de mancha, es necesario tomar las precauciones propias de la recolección y enviar todo o parte del soporte que las contiene hasta el laboratorio. 1.3.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Investigar la presencia de heces o materia fecal.  Métodos de Estudio - Utilidad: Su diagnóstico genérico, se realiza fácilmente por sus características físicas. - Método óptico: - Microscopía, se buscan restos vegetales y animales característicos, así como también la flora Gram positiva y Gram negativa propia de las heces fecales. La confirmación de heces constituye un dato importante en los casos de violación por Vaso Indebido, sobre todo en niños menores, pudiendo inclusive resultar de gran especificidad ante el hallazgo de particularidades parasitarias, que pueden establecer un nexo específico entre muestras levantadas de ropas y/o genitales del supuesto autor y la muestra extraída del ano – recto de las víctimas, cuando se produce el hallazgo de huevos de parásitos intestinales (Giardia sp., Anquilostoma duodenale, Ascaris lumbricoides, etc.). En otros casos poco frecuentes, es posible que el nerviosismo del delincuente lo obligue a dejar este indicio, aunque muchas veces es también un signo de provocación.

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1.4. MECONIO El meconio es la primera evacuación del recién nacido y debe producirse dentro de las 6 a 12 primeras horas de vida. 1.4.1. Características: Las manchas del meconio son de color amarillo verdoso, con depósito de material, bordes irregulares y forma según la dinámica que les dio origen. 1.4.2. Localización y Recolección: Observadas sus características físicas, frecuentemente estas pueden estar acompañadas por manchas de sangre, líquido amniótico, unto sebáceo, pelos fetales (lanugo) carentes de médula y también células epiteliales o del endometrio. Recolectar los objetos posibles de contener meconio, utilizando pinzas para su posterior embalado en bolsas de papel. 1.4.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Investigar la presencia de meconio.  Métodos de Estudio - Utilidad: La identificación del meconio, junto a las demás sustancias mencionadas, resulta de gran utilidad en la investigación de infanticidios. a) Método óptico: - Microscopía, el macerado de manchas que contengan meconio, pueden contener unos corpúsculos característicos de color amarillo translúcidos que se denominan corpúsculos del meconio. Además es posible observar células y pelos fetales. b) Método químico: Resulta también de gran utilidad para la identificación genérica del meconio, la investigación de ácidos biliares y colesterina mediante reacciones químicas.

1.5.

LÍQUIDO AMNIÓTICO

Contenido en la matriz uterina de la hembra, el líquido amniótico rodea y protege al embrión. 1.5.1. Características: Es un líquido fluido, de color amarillo lechoso; que en caso de contener meconio es de color amarillo. Las manchas producidas por él, son de color amarillento o sanguinolentas, de gran extensión y apergaminadas al tacto.

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1.5.2. Localización y Recolección: Observadas sus características físicas, se deben recolectar los soportes que contengan estas manchas con pinzas o manos enguantadas, para posteriormente embalarlas convenientemente. Su reacción a la luz ultravioleta (lámpara de Wood), da una fluorescencia de color violeta – rojizo hacia el centro y amarillenta en los bordes. 1.5.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Investigar la presencia de líquido amniótico. 

Métodos de Estudio - Utilidad: La identificación del líquido amniótico es también de utilidad en la investigación de infanticidios, aunque no existe un método que determine con certeza su naturaleza.

a) Método óptico: - Microscopía: El líquido amniótico no posee elementos característicos a observar, solo puede resultar de orientación el hallazgo de células del endometrio y pelos fetales. b) Método químico: Basado en la investigación de derivados biliares. 1.6. CALOSTRO Y LECHE El calostro es la secreción de las glándulas mamarias femeninas producida después del parto y durante los 6 a 8 días consecutivos para convertirse después en leche materna. 1.6.1. Características: El calostro es de color amarillento, sanguinolento y deja sobre soportes absorbentes manchas de bordes sinuosos y color amarillento; en tanto que las manchas de leche son de color blanco amarillo, bordes irregulares y apergaminadas al tacto. 1.6.2. Localización y Recolección: Los soportes sospechosos de contener estas manchas deben recolectarse con pinzas o manos enguantadas y embalarlas convenientemente. 1.6.3. Objeto de la Pericia Química Forense: – Investigar la presencia de calostro y/o leche.  Métodos de Estudio - Utilidad: La identificación de estas sustancias son de utilidad para el acompañamiento de la investigación de los infanticidios y abortos provocados a término.

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a) Método óptico: (Microscopia) El macerado de calostro, contiene corpúsculos característicos llamados corpúsculos de calostro y además glóbulos de grasa. Estos pueden observarse: En una preparación directa: los corpúsculos de calostro, se caracterizan por ser de mayor tamaño que los glóbulos de grasa (13 a 14 micras) de superficie irregular y de aspecto granulado. Los glóbulos de grasa son de menor tamaño (1 a 10 micrones), aunque están en mayor cantidad que los anteriores, son muy refringentes y de superficie regular. Con el agregado de: -yodo: en cuyo caso se colorean de marrón; o con -ácido crómico: siendo entonces la coloración de ellos negra. b) Método químico: Se aplican: 1) Reacciones de coloración: a) para la identificación de leche cruda: Al macerado agregar; agua oxigenada 2 % + Guayacol 1:10 se obtendrá color amarillo – anaranjado; b) para diferenciar leche de mujer de las otras hembras ó Reacción de Umikoff: 5 cc del macerado o leche + 2.5 de amoniaco 1:10, calentar a 60ºC por media hora. La leche de mujer se colorea de rosa – violáceo. 2) Reacciones enzimáticas para la determinación de lactosa. 2.

INDICIOS FISICOS Y QUIMICOS

2.1. FIBRAS Engloba todos los tipos de fibras, sean textiles o no, inclusive las que provienen de vegetales naturales. Con el análisis pericial de ellas es posible obtener la siguiente información: - El tipo de fibra: Por ejemplo, si es animal (lana), vegetal (algodón), sintético (hecho por el hombre) o mineral (vidrio). - Determina si la fibra analizada tiene el mismo color y las mismas características microscópicas de la pieza de evidencia que pertenece al sospechoso o viceversa. 2.1.1. Características: Se las identifica en el lugar de los hechos, generalmente por su forma alargada, aunque pueden muchas veces, encontrarse en forma de fragmento o segmento de tela, alfombras u otros objetos por ellas compuestos; pueden estar coloreadas o no. 2.1.2. Localización y Recolección: Debido a que las fibras son consideradas micro huellas o indicios microscópicos, es conveniente buscarlas con la ayuda de una lupa de bajo aumento. Su hallazgo puede verificarse en el escenario del lugar de

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los hechos, en las prendas de vestir, otros objetos como joyas, vehículos; y el cuerpo mismo de la víctima y victimario. Para su recolección se utilizan pinzas, y posteriormente las muestras se depositan en sobres de papel, que deben cerrarse herméticamente. 2.1.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Establecer semejanza o diferencia entre muestras; y/o determinar procedencia natural de las muestras. 2.1.4. Limitaciones de la Pericia de Fibras: No es considerada evidencia inequívoca, pero es buena evidencia circunstancial.  Métodos de Estudio - Utilidad: El estudio morfológico y/o comparativo de las fibras puede resultar de utilidad en todos los tipos de hechos punibles investigados, ya que al tratarse de micro huellas su intercambio prácticamente es inevitable en el triángulo de un hecho (Victima – Victimario – Lugar del Hecho) a) Método óptico: - Microscopía, la observación de las fibras se realiza en forma directa con aumento de 10x y 45x. En ésta observación se tendrá en cuenta parámetros como: o Color o Tipo: sintético, algodón vegetal, etc. o Trama: (si es un fragmento textil) oblicuo, perpendicular, etc. o Conformación: simple (una sola hebra), compuesta (dos o más hebras), imperfecciones. o Aspecto: enlazado, torcido sobre su eje, liso, etc. o Medidas: Diámetro de la fibra compuesta y de las microfibrillas que la componen. o Número: Cantidad de fibras que la componen. b) Método físico: Reacción a la temperatura, apoyando una fuente de calor a la muestra y observar: si se quema, se derrite, se desprende humo, olor característico, etc. c) Método químico: Se puede aplicar: 1) Cromatografía en capa delgada, en caso de que las fibras sean coloreadas y se tenga suficiente cantidad y capacidad de extracción del colorante. Se establecen corridas comparativas y los solventes se buscan conforme al colorante de las fibras; 2) Medición cualitativa de la resistencia del color; utilizando diferentes solventes, empezando por el agua con lo que se ve y se compara la resistencia del color en la fibra tratada. Técnica: Se coloca la fibra sobre papel de filtro, y gota a gota se agregan los diferentes solventes observando la acción de estos sobre el colorante de la fibra.

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2.2. TIERRA Se define como tierra todo material natural, que se encuentre en partículas finas en la superficie terrestre y que puede contener otras partículas manufacturadas como carbonilla, piedras para tejas, partículas de vidrio, pintura, productos de corrosión, etc. El análisis pericial en este caso tiene por objeto cotejar si dos o más muestras de tierras, desde el punto de vista morfológico, sin entrar a determinar su composición geológica en particular. 2.2.1. Interés Pericial: Este tipo de análisis tiene interés en numerosos tipos de hechos punibles, como por ejemplo cuando se quiere determinar si un sospechoso se hallaba en la escena del crimen, a través del análisis de la tierra adherida a su calzado, ó si un vehículo realizó recorrido en un determinado terreno de tierra, ó fueron trasladadas muestras de tierra de un lugar a otro por diversos modos como el calzado, neumáticos, sobre prendas de vestir, etc. 2.2.2. Localización y Colección: En general las muestras de tierra pueden localizarse sobre los más diversos soportes y para su localización es suficiente realizar una buena observación de los materiales en estudio, así por ejemplo: a) En calzados y neumáticos, el barro quedará fuertemente adherido a los diseños de ellos y podrán ser retirados por la técnica de raspado o lavado, colectando el producto obtenido en frascos de vidrio limpio y de boca ancha. Si la tierra está seca la adherencia es menor y será suficiente el raspado. b) En situaciones relacionadas a enterramientos de cadáveres; se tomarán muestras del elemento sospechoso (palas, picos, etc.), por la técnica del raspado, diferenciado los levantamientos de cada zona del elemento. Para las muestras testigos, una vez delimitada la fosa del enterramiento, se procederá a colectar muestras de los diferentes estratos de tierra detectados en el trayecto su profundidad, utilizando para ello diferentes cucharas o por lo menos limpiarla cada vez que se va levantar un estrato diferente. c) En vehículos suele ser de interés colectar muestras del interior, principalmente de las alfombras y del exterior, aquellas muestras que se hallen adheridas a los guardabarros y para golpes. d) En el caso de localizar muestras de tierra en prendas de vestir, se las colecta por simple raspado, en recipientes de vidrio o plástico adecuados. Cuando la cantidad es escasa, la extracción se dificulta y los intentos por extraer la tierra en el lugar del hecho pueden destruir características valiosas de las muestras, por lo que se recomienda proceder en el laboratorio al lavado de ellas, filtración del agua del lavado y secado en estufa de la tierra colectada.

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1)

2) 3)

4) 5) 6)

En general se debe tener en cuenta los siguientes cuidados: Las muestras testigos del terreno, deben ser tomadas con poca profundidad ya que la adherencia a los soportes mencionados más arriba, solo será de la parte superficial, y está relacionada a la dureza del terreno; se utiliza para la colección cucharas o espátulas. Se debe obtener muestras que parezcan ser iguales a la tierra que se encuentra en los soportes sospechosos. Debido a las variaciones: - Se toman varias muestras, - A lo menos en cuatro direcciones hasta una distancia de por lo menos 30 metros, - De una profundidad no mayor de la que se vería afectada por huellas de zapatos o de llantas. No poner la tierra en sobres. Utilizar envases de cierre hermético Recordar que siempre es necesario recolectar muestras testigos de diferentes zonas del terreno.

2.2.3. Objeto de la Pericia Química Forense: Determinar semejanza o diferencia entre las muestras de tierra. 2.2.4. Limitaciones de la Pericia de tierra: La tierra muestra grandes variaciones de un punto a otro de la superficie terrestre, aún más con la profundidad, por lo que no es posible decir que una muestra de tierra proviene de un cierto lugar con exclusión a todos los demás.  Métodos de Estudio: El cotejo de estas muestras se basa en una serie de pasos en los cuales se irá observando el comportamiento y la composición morfológica de ellas. Algunas muestras necesitan preparación previa; como por ejemplo secado en estufa si están húmedas; - disgregación en mortero cuando se presentan en forma de grumos gruesos. Acabada la preparación previa se procede a la separación en dos fracciones, una fina y otra gruesa, lo que se obtiene haciendo pasar la muestra por un juego tamices de laboratorio o en su defecto una gasa fina de 10 cm x 10 cm. a) Método óptico: Ambas fracciones son sometidas, por separado, a observación macroscópica y epimicroscópica, asentando todos los detalles observados y separando partículas específicas que pueden resultar de interés como trocitos de ladrillo, pasto, vegetales secos, carbón, etc. De este modo se establecen parámetros de comparación sin realizar una clasificación mineralógica ya que el químico no posee conocimientos geológicos. Estos parámetros son: proporciones de elementos observados (tamaño y cantidad), predominio de elementos y coloración de los mismos.

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b) Métodos físicos Procedimiento: 1. Determinación del ph: Suspender una porción de la fracción fina en agua destilada y medir el ph. 2. Determinación de la sedimentación espontánea: Pesar 1 a 2 gramos de muestra proveniente de la fracción fina y colocarla en probeta con 10 ml de agua destilada, agitar fuertemente las probetas y cargar rápidamente en pipetas de eritrosedimentación, colocarlas también rápidamente en posición vertical y leer la sedimentación al igual que la eritrosedimentación, con la diferencia de que los intervalos de tiempo entre lecturas, van de 30 segundos a 1 minuto, las lecturas se finalizan cuando la sedimentación se estabiliza. En caso de que la muestra sea muy arenosa y la sedimentación sea prácticamente instantánea, suspender la muestra en una solución de alta densidad como Cloruro de Zinc de densidad 2, todas las muestras deberán ser suspendidas para cotejo en la misma solución. Graficar una curva de sedimentación. 3. Sedimentación por centrifugación: Colectar el sobrenadante de la determinación anterior, y trasladarlas a tubos de centrífuga, equilibrando los pesos mediante balanza para evitar diferencias debidas a la diferencia de volumen contenido en las muestras. Centrifugar a una velocidad media por 10 minutos. Retirar el sobrenadante, observar una posible distribución de elementos en capas, resuspender en el líquido remanente y volcar sobre papel de filtro, observar y comparar macro y microscópicamente. Secar los sedimentos y comparar macro y microscópicamente. Pesar los residuos depositados sobre el papel de filtro. Anotar además el color del sobrenadante, la textura de los residuos, etc. 4. Se puede también realizar el análisis espectrofotométrico del sobrenadante, así como el análisis de contenido orgánico en las muestras.

2.3.

ACELERANTES DE LA COMBUSTIÓN Sustancia o mezcla de ellas, que agregadas intencionalmente o accidentalmente a un material combustible, tienen la propiedad de facilitar el desarrollo del fuego, transformando un material combustible, en uno de alta inflamabilidad. La investigación pericial de éstas sustancias tiene interés cuando se trata de determinar las causas de un incendio, y que por lo general pueden darse tres causales: a) Eléctricas, b) Mecánicas y c) Químicas, debidas especialmente a la presencia de una sustancia o mezclas de sustancias caracterizadas como acelerantes de la combustión.

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2.3.1 Características: La gran variedad de sustancias con la propiedad de acelerante, no permite establecer características particulares pues no solo se tratan de líquidos que son los más frecuentemente utilizados, sino que también combustibles sólidos, tales como velas y una variedad de mezclas que constan de un agente oxidante y un compuesto combustible. 2.3.2. Localización y Recolección: Es prudente en estos casos de investigación, dejar la recolección de muestras a cargo de especialistas como el cuerpo de bomberos o por lo menos estar acompañados de ellos, pues estos tienen una idea clara y precisa para distinguir los llamados focos de incendio que serían los principales centros de búsqueda. Sin embargo si no es posible contar con ellos, se indican a continuación, algunos signos en incendios premeditados: a) Areas de incendio múltiples no relacionadas, b) Hallazgo de dispositivos de incendios como velas plantadas, cigarrillos en cajas de fósforos, cocktails de molotov, unión de masas químicas y/o dispositivos electrónicos, c) Presencia de caminos o rutas del fuego de papel o telas, quemados en alfombras o en madera, d) Remoción de propiedad, falta de artículos que se supone deberían de encontrarse en la escena. Las muestras a recolectar por predilección, deben ser de un material absorbente que retenga los líquidos como por ejemplo: muebles acojinados, alfombras, yeso, tierra, ropa, pisos de madera y cenizas. Para la colección de muestras, se recomienda: a) De ser posible determinar el punto de origen del incendio y obtener las muestras de dicho punto y alrededor de él. Si no es obvio un solo punto de origen, se deben colectar muestras separadas de todos los posibles puntos de origen. b) La recolección adecuada, según naturaleza de las muestras y un envasado hermético para preservar los compuestos volátiles, llenando al máximo los recipientes de colección. c) Utilizar frascos de vidrio con boca ancha o de plásticos especiales para el efecto. d) Si se trata de materiales voluminosos o intransportables, recolectar una parte de los mismos especialmente de las zonas con caracteres organolépticos (olor, aspecto) que indique la presencia de sustancias acelerantes. e) Toda mancha fresca debe ser colectada. f) En caso de suelo, es necesario cavar en la capa más profunda para asegurarse de obtener muestras de absorbente, pues los líquidos tienden a encontrarse en las áreas más profundas.

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g) Colectar muestras de control de sustancias obtenidas como evidencia, estas muestras de control deben ser colectadas de áreas no quemadas. 2.3.3. Objeto de Pericia: - Investigar la presencia de sustancias acelerantes de la combustión. - Determinar el tipo de acelerante. - Informar sobre las propiedades termodinámicas de inflamabilidad y combustibilidad del mismo.  Métodos de Estudio - Utilidad: Indudablemente que el método de análisis recomendado para esta investigación es el instrumental. La selección de la técnica instrumental específica a utilizar dependerá de factores como disponibilidad del instrumental, de la muestra y la exigencia analítica inmediata, por la naturaleza volátil de muchas de estas sustancias. Se hace mención a continuación de una metodología para la investigación de sustancias acelerantes; rápida y sencilla aunque no específica para la identificación, ni cuantificación de ellas. a) Método óptico: Describir en detalle los caracteres organolépticos de las muestras como el color, olor, aspecto, ya que la mayoría de estas sustancias son hidrocarburos derivados del petróleo, por lo que poseen aspecto oleoso y olor característico aportando así una valiosa información. b) Marcha Analítica: Consiste en el aislamiento de hidrocarburos livianos como el kerosén y la nafta, según la técnica de Macoun Procedimiento: 1. Colocar la muestra en cantidad suficiente de alcohol absoluto, en un recipiente tapado. 2. Dejar 24 horas, y agitar eventualmente. 3. Transvasar el alcohol, escurriendo al máximo todo el alcohol. 4. Medir y agregarle el doble de su volumen en agua. En caso de mucha turbiedad se puede filtrar con gasa o algodón. 5. Destilar el líquido obtenido y recoger las tres primeras fracciones de 25 ml cada una, en probetas de 50 ml. 6. Agregar a cada fracción 9 ml de Dicromato de potasio al 2 % y 3 ml de ácido clorhídrico concentrado. Dejar 24 horas en reposo. 7. Observar en la superficie de cada fracción, la eventual aparición de una fase de separación debida a hidrocarburos, que se puede separar por decantación de la fracción acuosa (líquido de color verde), y evidenciar aún más dicha fracción agregándole Sudán III.

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c) Otros ensayos: Cuando la disponibilidad de la muestra es importante se pueden realizar determinaciones físicas como: punto de inflamación, - peso específico, -índice de refracción y – curva de destilación. d) Métodos Instrumentales: Se recomienda principalmente: - Espectrofotometría de Infrarrojo y – Cromatografía gaseosa.

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CAPÍTULO V – PARTE ESPECIAL

PINTURAS Pintura: Se refiere a toda sustancia coloreada depositada sobre cualquier tipo de soporte. La pintura como indicio puede encontrarse, dada la universalidad de su concepto, en los más diversos hechos punibles, siendo más frecuentemente su búsqueda y hallazgo en los accidentes de tránsito. Pueden además encontrase como cosméticos o huellas dejadas por estos; en forma de depósito de sustancia sobre otros soportes, como proyectiles, calzados, prendas de vestir, etc. En general los restos de pintura pueden presentarse en forma de escamas o impregnando un soporte determinado. Genéricamente, según la frecuencia con que se la encuentra y el tipo de hecho punible al que va relacionada; podemos discriminar los siguientes tipos de pintura: Pinturas de vehículos Pinturas de cosméticos o utillaje Pinturas domésticas

1. MUESTRAS PARA ESTUDIO. LEVANTAMIENTO. TRATAMIENTO En todos los objetos de pericia, que requiera de la comparación, se necesitarán dos tipos de muestras, las dubitadas y las indubitadas o testigos.

1.1. CARACTERÍSTICAS. LEVANTAMIENTO

TIPOS

DE

MUESTRAS

NECESARIAS.

a) Muestras dubitadas: Las muestras dubitadas se recogen directamente del lugar del hecho u otros de referencia, remitiendo las manchas de ser posible con el soporte que las contenga. Si se trata de atropellamiento de personas se observará detenidamente las prendas de la víctima en busca de residuos de pintura u otros elementos del móvil causante del accidente. En todos los casos atendiendo a los cuidados generales para el levantamiento de los indicios.

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b) Muestras testigos o patrones: Si se trata de cosméticos se recomienda llevar los cosméticos o pinturas de utillaje tal cual, hasta el laboratorio; si se trata de pinturas domésticas y muestra provenientes pinturas de vehículos, es necesario tomar las muestras en forma de escaras de por lo menos 0,5 cm2, y de profundidad considerable, a fin de asegurar la recolección de todos los parámetros de comparación y cuidando de recolectar las muestras de las zonas de roce y de otras zonas intactas. Todas las muestras se remiten hasta el laboratorio con perfecto rotulado y en bolsas independientes.

1.2.

OBJETO DE LA PERICIA QUÍMICA FORENSE

Según la naturaleza de la muestra y la relación buscada con el hecho punible investigado, correspondería solicitar al laboratorio: a) Establecer semejanza o diferencia entre las muestras remitidas (Indicios levantados en Accidentes de tránsito, Muestras y huellas de cosméticos, depósito sobre soportes varios). b) Determinar naturaleza de la muestra (Depósito sobre soportes varios). c) Establecer número de capas y tipo de pinturas presentes (Investigación de robo de vehículos).

1.3.

ESTUDIOS REALIZADOS

Los estudios realizados a las muestras, se enfocan a la determinación de características físicas y químicas de las muestras. Cabe mencionar que en el Laboratorio Criminalístico de la Policía Nacional, a la fecha de la edición de este material, solo realiza estudio de características físicas. 

Métodos de estudio:

a) Método óptico: Las muestras se observan: - A simple vista: Con luz blanca. Considerando los parámetros de color y aspecto. Se puede completar la observación utilizando filtros de colores, luz ultravioleta y de diferentes longitudes de onda

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- Con elementos ópticos: Lupa. Epimicroscopio (Estereoscopio). Se consideran como parámetros el número de capas que forman la pintura, describiendo el color. 1. Espesor de cada una. 2. Orden de repetición de las capas. 3. Inclusiones presentes. 4. Aspectos generales como transparencia, homogeneidad, refringencia, etc. El valor analítico y pericial de este estudio es de carácter orientativo, pues una semejanza no implica identidad. b) Cromatografía: Como método físico – químico, la cromatografía, en especial la de capa fina, es aplicable a la determinación del número y tipos de colorantes componentes de las muestras sobre todo cuando las mismas se tratan de cosméticos. Para este estudio son necesarios los patrones, y la selección del solvente dependerá del tipo de muestra. No se requieren de reveladores, para determinar la semejanza o diferencia sobre la base de las correspondientes relaciones de frente; pues los colorantes son sustancias coloreadas de por sí. El problema de la viabilidad de éste método en la actualidad consiste en la poca o casi nula solubilidad de las actuales pinturas. c) Instrumentales: Constituye el uso de equipos especiales para determinar la composición química de las muestras, en donde resulta muy eficaz la combinación de técnicas instrumentales, como por ejemplo: - la fluorescencia y difracción por Rayos X, - la microscopía electrónica y espectrofotometría, entre otros.

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CAPÍTULO VI A – PARTE ESPECIAL

QUÍMICA BALÍSTICA Llamamos residuos del disparo a todas las sustancias químicas y elementos producidos, como resultado del accionar y disparar un arma de fuego. Siendo el propio mecanismo del disparo, el hecho que amerita la investigación de éstas sustancias y elementos, y que según la zona de localización de ellas; se realiza la interpretación que corresponda a los cuestionamientos de orden pericial. Según el mecanismo del disparo de un arma de fuego: Al percutir la cola del disparador sobre el culote de la vaina, el golpe hace que el mixto fulminante detone, la chispa producida en la detonación pasa por los oídos de la vaina y es iniciada así la deflagración de la pólvora contenida en el cartucho; ésta deflagración origina gases que al no tener escape hacen que el proyectil (o bala), salga disparado por el tubo cañón del arma, acompañado por sustancias químicas y elementos específicos. Según su origen, estos residuos escapan del arma en dos sentidos llamados en referencia, cono anterior y cono posterior.

Cono Anterior

Cono Posterior

En el Cono anterior, se hallan:  Nitrito (pólvora combustionada), a corta distancia, en los puntos de impacto  Nitratos (pólvora sin combustionar) a corta distancia en los puntos de impacto  Plomo a corta distancia microproyectiles y a larga distancia en orificios de entrada producidos por balas de plomo desnudo.  Otros: quemaduras y chamuscamientos en heridas y puntos de impacto de corta distancia; otros metales componentes del encamisado o cobertura de proyectiles como el cobre y el zinc, estos últimos en los orificios de entrada desde cualquier distancia.

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En el Cono posterior, se hallan:  Nitritos (pólvora combustionada) en manos del tirador  Nitratos (pólvora sin combustionar) en manos del tirador  Plomo (componente del mixto fulminante) en manos del tirador  Bario (Componente del mixto fulminante) en manos del tirador. Entonces de hecho, durante el tiro las partículas provenientes del encendido y disparo, se depositan en las manos, las ropas y el punto de impacto. Estas partículas depositadas contienen los residuos de la explosión, el iniciador, la combustión y el proyectil arrojado.

1.

MUESTRAS PARA ESTUDIO

1.1. BÚSQUEDA Y LOCALIZACIÓN: Las muestras son localizadas por observación directa de los lugares relacionados con los conos de distribución (anterior y posterior) o con ayuda de la luz UV, en cuyo caso los restos de deflagraciones presentan una fluorescencia verdosa. 1.2. LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO: Según cuestionamiento pericial, las muestras pueden recolectarse de:

el

objeto

o

a) Manos del tirador: Para el levantamiento de éstas muestras se utilizan cintas especiales llamadas comúnmente cintas levantadoras. En caso de no disponer de estas cintas, se pueden utilizar cinta para embalaje de tipo transparente, si se utilizan éstas, las mismas deben ser colocadas sobre un soporte contenedor preferentemente de plástico. Las cintas deben ser colocadas sobre el dorso de la mano, en la zona comprendida entre el dedo índice y el dedo pulgar.

b) Prendas de vestir: de la víctima o del tirador en el caso que el mismo use ropas de mangas largas o haya utilizado arma larga. La prenda debe ser remitida hasta el laboratorio.

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c) Punto de impacto: Se puede utilizar las cintas levantadoras y si son prendas de vestir en las que se debe buscar orificios de entrada, remitirlas hasta el laboratorio. d) Heridas: Utilizar para el levantamiento cintas levantadoras, cuidando de no limpiar las heridas antes del procedimiento, pues con esa acción, se pueden arrastrar las partículas de interés analítico. En caso de tratarse de heridas producidas a boca de jarro, tomar la muestra por dentro de la herida ya que los gases en este caso ingresan al interior del cuerpo, produciendo la característica herida en forma de estrella (orificio de entrada mayor al orificio de salida con bordes desgarrados), muchas veces con ausencia de los característicos signos de tatuaje y/o quemaduras. Con ayuda del médico forense puede también obtenerse para el estudio químico de los residuos del disparo, un corte de piel o tejido circundante al orificio de entrada, en cuyo caso la muestra será remitida al laboratorio sin el agregado de ningún conservante. e) Tubo cañón del arma: Cuando se debe investigar tiempo de disparo, la muestra debe levantarse o extraerse del interior del tubo cañón con un hisopo seco. Las muestras obtenidas deben ser remitidas hasta el laboratorio con los cuidados pertinentes: - si son prendas y están impregnadas de sangre u otros líquidos, secarlas previamente antes de embalarlas, cuidando de no doblar las prendas en la zona aledaña a los posibles orificios, - las armas, al igual que las cintas se remiten como tal, perfectamente rotuladas indicando la mano o herida a que corresponde.

1.3. CUESTIONAMIENTOS DE ORDEN PERICIAL Y OBJETO DE LA PERICIA QUÍMICA FORENSE  Si se accionó y disparó un arma de fuego (posible tirador) Objeto de Pericia: Investigar la presencia de elementos y residuos resultantes del disparo (cono posterior).  Distancia del disparo Objeto de Pericia: Determinar distancia del disparo y/o Investigar productos de la deflagración de la pólvora en puntos de impacto. Establecer numéricamente la distancia del disparo (cono anterior).

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 Orificio de entrada de proyectil. Puede proporcionar datos sobre el tipo de arma. Objeto de Pericia: Investigar la presencia de elementos componentes del proyectil (cono anterior)  Tiempo de disparo Objeto de Pericia: Investigar la presencia de residuos de pólvora combustionada (tubo cañón del arma)

2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

2.1.

ELEMENTOS A INVESTIGAR:

a) Componentes del mixto fulminante: Plomo, Bario y Antimonio. El mixto fulminante de mayor difusión, está compuesto por sales de Plomo, Bario y Antimonio, siendo las sales de Plomo las que se encuentran en mayor proporción. El lugar de la recolección de las muestras será las manos del posible tirador. Si el arma usada utiliza munición tradicional, la asociación: Pb (plomo), Ba (bario), Sb (antimonio), es la que corresponde analizar. Sin embargo es importante recordar que las viejas municiones contienen Mercurio, haciendo a la vez mención que los nuevos iniciadores o detonantes, actualmente en el mercado pueden contener SINTOX, en cuyo caso en las partículas, residuos del disparo, se compondrán de Ti (titanio) y Zn (Zinc). b) Componentes de la pólvora: Nitratos. La pólvora sin humo a más de los estabilizadores, mayormente está compuesta de nitrato de celulosa, por lo que se puede investigar la presencia de nitratos. Sin embargo se recuerda, que hoy día la pólvora prácticamente combustiona por completo, lo que da lugar a la investigación de nitritos, producto de la combustión de los nitratos. c) Residuos del proyectil (bala): Elementos metálicos, plomo, cobre, zinc que sé desmembran del proyectil a su paso por el tubo cañón del arma y roce con las estrías internas del mismo. Considerar que el proyectil puede ser de plomo desnudo o encamisado. d) Otros: Se buscan además signos, que señalan distancia de disparo (quemaduras, chamuscamientos, tatuaje, y ahumamiento), u orificios de entrada (aceites lubricantes en el anillo de limpieza o enjuagamiento), así como también la

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presencia de óxido férrico o herrumbre (en tubo cañón de un arma no utilizada recientemente).

2.2.

MÉTODOS DE ESTUDIO

Se describen los métodos y técnicas utilizadas en el laboratorio criminalístico de la Policía Nacional, a la fecha de edición de éste material a) Método óptico: El uso de instrumental óptico adecuado como la lupa simple y la lupa estereoscópica es útil; - en la localización e identificación morfológica de muestras depositadas en prendas de vestir (micro partículas), - para la observación de signos como quemaduras o chamuscamientos (bolitas en los hilos de prendas de vestir de fibra sintética, quemaduras en los hilos de algodón, etc.) y para la observación de micro proyectiles que se incrustan en la piel. Procedimiento analítico: 1. Observar a simple vista muestras provenientes de prendas y del tubo cañón del arma. 2. Observar con lupa simple o lupa estereoscópica las mismas muestras. Extraer las partículas que ameriten un estudio químico para corroborar su naturaleza. La observación a simple vista de manchas de aceites lubricantes en material proveniente del tubo cañón del arma imposibilita predecir sobre el tiempo de disparo. b) Métodos químicos basados en reacciones de coloración: Por medio de reacciones de coloración específicas para una sustancia o elemento en particular puede investigarse la presencia de los elementos de interés, aunque el método no resulte de certeza sobre el origen de estos elementos o sustancias (valor pericial). Se realizan las siguientes reacciones: I. Reacción del rodizonato de sodio: para la investigación de plomo y bario: El reactivo utilizado es una solución acuosa de rodizonato de sodio al 0,2 %, con el agregado de un medio ácido, que se logra con ácido clorhídrico al 1 %, éste facilita además la observación de la reacción de coloración. El rodizonato de sodio en presencia de plomo produce una coloración violeta y en presencia de bario, una coloración rojo – castaño; la presencia de plomo y bario juntos da una certeza casi absoluta de que sean productos del disparo. La observación de la reacción se realiza con ayuda de la lupa estereoscópica y la interpretación es la siguiente: - Si se observan puntos microscópicos de color

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violeta, corresponde a características del plomo proveniente del mixto fulminante, - Si se observa partículas de metal y la coloración violeta, corresponde a microproyectiles provenientes de la bala. La ausencia de coloración, es decir un resultado negativo, buscada en las manos de un posible tirador, no significa que la persona no haya realizado disparo alguno, si no que sencillamente, aunque las técnicas utilizadas son de reconocida sensibilidad, en ocasiones el material depositado en las manos del tirador, se halla por debajo de los límites de detección de la reacción colorimétrica, a lo que se suma el hecho de que estas partículas pueden desprenderse de las manos con un simple roce. Como se mencionara, la reacción es 100% específica para los elementos metálicos investigados, no a sí para establecer el origen de los mismos, ya que un mecánico, un trabajador de imprenta, tipógrafos o soldadores pueden también arrojar resultados positivos, aunque con marcada diferencia en cantidades. Procedimiento analítico: 1. Embeber un trozo de papel de filtro con la solución del rodizonato de sodio. 2. Colocar el papel de filtro sobre la muestra en estudio y presionar ligeramente 3. Colocar por encima del preparado descrito en “2”, un trozo de papel de filtro embebido en ácido clorhídrico al 1 % 4. Observar la reacción a la lupa estereoscópica. 5. La reacción puede practicarse sobre las cintas levantadoras con material de manos, heridas y sobre prendas, cuidando en éstas últimas de utilizar para la reacción una pequeña porción, que permita luego utilizar la muestra para los demás estudios.

Plomo (Color violeta) Detección de Plomo por la técnica del Rodizonato de Sodio ( MICROFOTOGRAFIA )

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II Reacción de Peter Griess: Para la investigación de nitritos. El reactivo utilizado es una mezcla de ácido acético, alfa naftil amina, metanol y agua; éste en presencia de nitritos origina una coloración rosada o fucsia en forma de puntos, los que corresponderían a los granos de pólvora del cartucho, la observación de la coloración en forma de manchas, puede indicar contaminación o resultado falso positivo. La reacción es positiva para los nitritos de cualquier origen. La interpretación es la siguiente, reacción positiva: - en la zona del cono posterior, indica producto de la deflagración de la pólvora contenida en el cartucho, - en la zona del cono anterior, indica disparo de corta distancia (en promedio dentro de los 70 cm dependiendo del tipo de arma utilizada).

Procedimiento analítico: 1. Embeber un trozo de papel de filtro con el reactivo de Griess. 2. Colocar el papel de filtro sobre la muestra en estudio y presionar ligeramente. 3. Utilizar otro papel de filtro seco por encima de del papel con reactivo 4. Observar la reacción a simple vista. Preparación del reactivo de Griess -Solución A 1. Disolver y mezclar 0,83 g de ácido sulfanílico con 25 ml de ácido acético glacial y 225 ml de agua destilada. -Solución B 1. Disolver en caliente 0,35 g de alfa naftil amina en 25 ml de agua destilada. Dejar enfriar 2. Agregar 25 ml de ácido acético glacial y 200 ml de agua destilada. Mezclar las soluciones A y B, conservar en frascos oscuros y si es posible refrigerar. Dura aproximadamente 15 a 20 días, una coloración rosa en el reactivo es indicativo de su caducidad.

III Reacción de la difenil amina sulfúrica: para la investigación de nitratos. El reactivo utilizado es la Paradifenil amina en medio ácido, otorgado por ácido sulfúrico concentrado, el mismo en presencia de nitratos produce una coloración azul. La interpretación es la siguiente: reacción positiva, en la zona del cono anterior, disparo de corta distancia.

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Procedimiento analítico: 1. Observar la muestra a la lupa estereoscópica, buscando partículas de bordes netos y color gris o verde grisáceo. 2. Dispensar una gota del reactivo de reciente preparación, sobre las partículas sospechosas. 3. Observar la reacción a simple vista, una coloración azul intensa indica la presencia de partículas de nitrato. Preparación del Reactivo 1. Pesar 50 mg de difenil amina y disolver en 2 ml de agua destilada. 2. Agregar 10 ml de Acido sulfúrico para análisis en forma lenta y refrigerando. IV Investigación de óxido férrico (Herrumbre): Con Ferrocianuro de Potasio y Tiocianato de Potasio, es posible investigar la presencia de ión férrico, ante el que se obtiene una coloración azul o roja respectivamente. Con esto se confirma la existencia de herrumbre, el que da la interpretación de que el arma no ha sido utilizada en un tiempo considerable. Procedimiento Analítico: 1. Tratar la muestra obtenida del tubo cañón del arma, con una solución acuosa de ácido clorhídrico al 5%. 2. Dispensar sobre el tratamiento anterior, 3 a 4 gotas de una solución acuosa de Tiocianato de Potasio al 5%. 3. Observar la reacción a simple vista, una coloración roja indica la presencia de ión férrico. 4. Se puede seguir el mismo procedimiento y utilizar ferrocianuro de potasio. Se menciona como información de interés que los resultados obtenidos en estos estudios, están sujetos a una serie de factores que influyen directamente en ellos y que son:  El tiempo transcurrido entre la toma de muestra y el hecho investigado.  El número de disparos realizados.  El tipo de arma utilizada (por ejemplo la pistola deja menos residuos por sus características morfológicas)  El calibre el arma.  La cartuchería utilizada.  La distancia de disparo. Es importante destacar que todos estos elementos y muy especialmente los metales pueden ser investigados, con mucha más posibilidad de resultados positivos y específicos, por métodos instrumentales como el espectrofotómetro de Absorción Atómica, Infrarrojo y/o Espectrómetro de masa.

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2.3.

OTROS ESTUDIOS

Determinación Numérica de la Distancia del disparo: Consiste en obtener el mapa de las micropartículas de nitritos, a fin de conocer la distribución de ellas alrededor del punto de impacto. Confrontando los mapas obtenidos a diferentes y conocidas distancias, en puntos de impacto y sobre soportes similares entre la muestra y los patrones es posible establecer relaciones numéricas de distancia. Se utiliza para ello papel fotográfico sensibilizado con el reactivo de Peter Griess. Procedimiento Analítico: Fase I) Preparación del Papel fotográfico: 1. Colocar el papel fotográfico en un recipiente que contenga una solución acuosa reciente de tiosulfato de sodio al 10% y dejar en reposo por 20 a 30 minutos, en un lugar oscuro. Con esto se disuelven las sales de plata que contiene el papel fotográfico, quedando al descubierto la capa de gelatina fijada. 2. Tratar el papel de la preparación anterior, sumergiéndolo en una solución acuosa de ácido sulfanílico al 0,8 %, retirar y dejar secar al aire, en forma vertical. 3. Tratar luego con una solución reciente de alfa naftilamina al 0,5 % en metanol y luego dejar secar de la forma anterior. Fase II) Preparación del Sistema de Reacción: 1. Colocar una tela blanca o gasa sobre la mesa de trabajo. Disponer sobre ella, la prenda en estudio con el orificio sospechoso para arriba. 2. Colocar el papel fotográfico con la superficie sensibilizada, sobre el orificio y por encima del papel otra gasa o tela blanca limpia y seca. 3. Por encima del preparado anterior colocar una gasa embebida y escurrida con ácido acético al 25%. 4. Colocar sobre todo este sistema, una plancha caliente durante 1 a 2 minutos. 5. En caso positivo al retirar la plancha se observará sobre el papel fotográfico, máculas de color rojo-anaranjado.

3.

LIMITACIONES DE LA PERICIA QUIMICA BALISTICA

Ciertos profesionales como fontaneros, mecánicos, electricistas, pintores, técnico electrónico, soldador, etc., son propicios a tener en las manos, partículas que contienen los elementos Plomo, Bario y Antimonio, origen que la sola pericia química balística no podrá discernir. Solamente un análisis bajo el microscopio electrónico de barrido podrá determinar si son residuos de disparo o no.

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CAPÍTULO VI B – PARTE ESPECIAL

EXPLOSIVOS Antes de introducirnos en el análisis químico pericial de los residuos dejados tras una explosión, es necesario entender básicamente, algunos conceptos generales relativos a los explosivos y a la explosión en particular. (Mayor información sobre ellos pueden obtenerse en libros de autores especializados en el tema) CONCEPTOS a) Explosión: Liberación brusca de energía producida por transformación instantánea en productos gaseosos de una o más sustancias sólidas o líquidas, contenidas en un volumen relativamente pequeño. Se acompaña de estruendo, desprendimiento de calor, luz y secuelas mecánicas ostensibles. b) Explosivo: Sustancia o mezcla de sustancias capaces de reaccionar químicamente en forma brusca y rápida, originando un volumen mayor de otras nuevas sustancias, lo que implica efectos mecánicos de proyección o destrucción. c) Clasificación de los explosivos: Existen numerosas formas de clasificar explosivos, utilizaremos una clasificación genérica dando ejemplos de los explosivos más conocidos, aclarando que la lista de ellos es extensa. I. Según su constitución, los explosivos pueden ser: I.1. De una sola especie química: Nitroglicerina, nitrocelulosa, TNT o Trotyl, ácido pícrico, nitrato de amonio, picrato de amonio. I.2. Por mezclas de sustancias no explosivas por sí mismas: Pólvora negra, pólvoras sin humo de doble base: nitroglicerina y nitrocelulosa, alcanfor, tanino, almidón. I.3. Por mezcla de varias sustancias con una o más de ellas explosivas: Dinamita – nitroglicerina II. Según su velocidad de propagación: II.1. Lentos, progresivos o bajos deflagrantes: Pólvora negra. II.2. Rápidos, rompedores o altos deflagrantes: Nitroglicerina, TNT, ácido pícrico. II.3. Iniciadores, primarios, fulminantes o detonantes: Fulminato de mercurio, azida de plomo.

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III. Según su estado físico: III.1. Sólidos: Ácido pícrico, TNT. III.2. Líquidos: Nitroglicerina. III.3. Gaseosos: Combustibles mezclados con oxígeno en recipientes cerrados.

d) 1.

Sistemas de encendido. Se clasifican: A mecha: El extremo que se introduce en la carga principal cuenta con un detonante.

2.

Mecánico: Mecanismo de relojería.

3.

Eléctrico: Pueden ser por resistencia eléctrica; por filamento de lámpara; ó por lámpara de flash.

4.

Químico: Por reacción oxidante (un ácido en contacto con sodio, clorato de potasio, o, mezcla de clorato de potasio, azufre y azúcar).

5.

Combinados: Formas diversas.

ACCIONES PRIMARIAS RECOMENDADAS EN LA INVESTIGACIÓN DE UN EXPLOSIVO Como norma general: NO TOCAR cualquier paquete, bulto u objeto, sospechosos de contener explosivos. El examen cercano, desarmen, transporte y destrucción de un artefacto sospechoso, inclusive cuando la explosión haya ocurrido la verificación del lugar y de los restos es una operación de riesgo donde son precisos ciertos conocimientos, por lo que estas tareas deberán ser realizadas por personal técnico especialmente entrenado en la materia. Las tareas realizadas por los especialistas se centrarán en: a) De no haber explosión, localizar el explosivo y desactivarlos. b) Ocurrida la explosión: - determinar el centro de la explosión, aislarlo y protegerlo; - dirigir la búsqueda para el hallazgo de mechas, artefactos de relojería, carcazas y residuos metálicos, proyectiles colocados en el interior del artefacto para aumentar el daño, etc.

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1.

MUESTRAS PARA ESTUDIO

1.1. BÚSQUEDA Y LOCALIZACIÓN: La búsqueda y localización de muestras, se hará en tres áreas: - Investigación del lugar del hecho, - Investigación de afuera y – El Centro de Mando. 1.1.1 Recomendaciones para la investigación del lugar del hecho: a) Procesar la búsqueda dentro del perímetro del lugar del hecho. En una área al aire libre, el perímetro, debe de ser a una distancia doble de la evidencia encontrada mas lejos del cráter (o foco de la explosión). Ajustar continuamente, como sea necesario si se ha localizado mas evidencia del perímetro original b) Tener en cuenta los indicios relacionados a una bomba: mecha, rellenos, contenedores del explosivo, artículos extraños al lugar del hecho. c) Observar detenidamente objetos adyacentes que puedan tener residuos de explosivos atrapados. d) Para el empaque o embalaje de evidencias: Usar contenedores contra pérdida de vapores, como latas de pintura recicladas o bolsas de Nylon, que pueden ser selladas con cinta. e) Para la obtención de muestras testigos, disponer: -un hisopo seco como muestra de control, - un hisopo seco del área sospechosa, usando como solvente de extracción Agua Destilada o Metanol o isopropanol f) Obtener muestras del cráter: - cerca de la orilla; de tierra a una profundidad de 1 o 2 metros y de 1 o 2 centímetros de profundidad para obtener una muestra del mismo nivel de la muestra del cráter. 1.1.2. Recomendaciones para la investigación de afuera: La investigación de afuera para el laboratorista, se centra específicamente en la investigación relacionada con la víctima; habrá para ello: Observar la autopsia y heridas a fin de recolectar artículos removidos del cuerpo de la víctima, así como su vestimenta. Las muestras son localizadas por observación directa o con ayuda de la luz UV, teniendo en cuenta que los objetos ubicados en los alrededores del centro de la explosión han sido alcanzados por la honda expansiva y sobre ellos se ha depositado él o los compuestos químicos que constituían el explosivo. Algunos explosivos dejan manchas características como: - manchas negras (pólvora - TNT), -manchas amarillas (Acido Pícrico), - manchas oleosas (Nitroglicerina), pudiendo también quedar manchas fluorescentes a la luz UV, o no haber quedado ningún tipo de mancha, por lo que todas las superficies deberán ser objeto de muestreo, es decir levantar muestras de ellas.

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1.2. LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO: Existen diversas técnicas para el levantamiento de muestras que puedan contener residuos de una explosión. Una de las más sencillas de aplicar, consiste en utilizar trozos de gasa, embebidos en agua destilada, con los que se lavan minuciosamente todas las superficies posibles y depositarlas luego en frascos de vidrio o plástico con cierre hermético. En lo posible procurar un trozo de gasa que pueda ser dividida en tres porciones para realizar la marcha analítica a detallar, más adelante. 1.3.

OBJETO DE LA PERICIA QUÍMICA FORENSE

El Laboratorio (*) puede determinar los siguientes cuestionamientos periciales:    

Que tipo de explosivo se utilizo para componer la bomba Identificar cada uno de los componentes. Comparar con cualquier otro artefacto que se haya sometido anteriormente. Investigar la presencia de sustancias componentes de explosivos y/o residuos de la explosión.

(*) El laboratorio Criminalístico de la Policía Nacional a la fecha de edición de éste material, se encuentra limitado en sus capacidades para responder a los cuestionamientos citados.

2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALÍTICO Con el objeto de identificar sustancias relacionadas a la composición de explosivos, se propone seguir una marcha de análisis, dividiendo las muestras en tres fracciones, a ser procesadas por separado y a través de métodos diferentes. MUESTRA

Facción 1 Extracción con Eter Etílico

Facción 2 Extracción con Acetona

Facción 3 Marcha analítica Inorgánica

Las fracciones 1 y 2 se analizarán por cromatografía en capa fina o capa delgada, con reveladores selectivos.

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La fracción 3 será sometida a marcha química analítica (por todos los químicos conocida) para la identificación de aniones y cationes relativos a los explosivos. Se hace la salvedad de que estos son los métodos al alcance del Laboratorio Criminalístico de la Policía Nacional y que de contar con métodos instrumentales como la cromatografía gaseosa - espectrometría de masas y la absorción atómica, serían éstas las técnicas de elección. 2.1. Cromatografía de capa fina: basada en la separación de los componentes de una mezcla, atendiendo a sus características físicas y químicas y la afinidad de estos por los componentes del sistema. La identificación se realiza según reacciones específicas de coloración. Procedimiento analítico por cromatografía: 1. Separar las fracciones acuosa y orgánica. 2. Filtrar las fases orgánicas (1 y 2) por separado y secar cada una. 3. Correr las placas, según los solventes descritos en la tabla de abajo. 4. Revelar las placas independientemente, con reveladores químicos respectivos para cada grupo y recordando de utilizar previamente el revelado con luz U.V. (*) La fase etérea (FET) se correrá en dos placas, eligiendo uno de los solventes señalados con los reveladores correspondientes para cada grupo. (**) La fase acetónica (FAC) se correrá en un total de seis placas, dos igual que la FET dos con etanol y dos con cloroformo:acetona y reveladores respectivos para cada grupo. Fracción

Solvente 1) benceno-hexano 1:1

Revelador 1 y 2) NaOH 10% + Griess

2) xileno-hexano 3:2

1 y 2) Cl3Ti + DMAB

1) benceno-hexano 1:1

1 y 2) NaOH 10% + Griess

2) xileno-hexano 3:2

1 y 2) Cl3Ti + DMAB

3) etanol

3 ) Difenil amina 3) etanol + Nessler 4) NaOH 10% + Griess 4) Timol sulfúrico

Color rojo

Identifica Nitrados no aromáticos

Etérea

Acetónica

4) cloroformoacetona 1:1

Nitrados aromáticos Nitrados no aromáticos

rojo

azul naranja rojo púrpura

Nitrados aromáticos Nitratos Amonio Nitrados-PETNEDX RDX

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2.2 Método químico: basados en reacciones de coloración específica para aniones y cationes. Procedimiento analítico 1. Sumergir en agua destilada, la tercera fracción de gasa, dejar por lo menos 2 horas. 2. Retirar la gasa y filtrar. 3. Realizar las reacciones colorimétricas específicas., según el cuadro de abajo. Investigación de Aniones Procedimiento 1) Evaporar a sequedad una fracción y agregar 1 gota de difenilamina al 1 % 2) 1 ml de muestra + reactivo de Griess 3) 1 ml de muestra + 1 gota de nitrato de plata 0,1 F 4) Sobrenadante de la reacción anterior + 1 gota de nitrito de sodio al 10 % 5) 1 ml de muestra + 2 gotas de nitrato de potasio al 10% 6) 1 ml de muestra + 2 gotas de cloruro de bario al 10% 7) 1 ml de muestra + 2 gotas de cloruro de bario al 10%

8) 1 gota de muestra + 1 gota de ácido clorhídrico al 10%

Reacción

Color rojo

Revela Nitratos – Nitritos Cloratos Nitritos

Precipitado blanco caseoso

Cloruros

Precipitado blanco

Cloratos

Precipitado blanco

Percloratos

Precipitado blanco Precipitado blanco, soluble por el agregado de ácido clorhídrico al 10 % y desprendimiento de gas Produce gas de olor desagradable

Sulfatos

Color azul

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Carbonatos

Sulfuros

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CAPÍTULO VII – PARTE ESPECIAL

QUÍMICA DOCUMENTOLÓGICA

La investigación de hechos punibles, que implican maniobras dolosas sobre documentos de diversa naturaleza, como por ejemplo: papel moneda, cheques, certificados, títulos de propiedad, etc. ha sido asistida desde sus inicios por la química analítica; en la búsqueda de la detección y/o descifrado de esas maniobras dolosas. Surge así, la Química Documentológica, conocida como la parte de la química encargada del análisis físico y químico de los dos elementos fundamentales en los documentos: -El soporte de la escritura y el –Escrito o Pigmento Escritural. Sobre estos elementos fundamentales se tratan in extenso, en los libros especializados de documentología; en este material a modo de introducción y como conceptualización general, enfocaremos algunos puntos básicos, en especial para el colega químico interesado en esta área.

A) Papel: Producto laminar formado por entrecruzamiento de fibras celulósicas, adheridas entre sí mediante sustancias encolantes y con el agregado de sustancias minerales para hacerlo apto para la escritura. A.1 – Materia Prima para el Papel: básicamente es la celulosa de origen vegetal * y la misma como tal puede provenir de diferentes especies, entre las especies vegetales más utilizadas como fuente de celulosa podemos citar: - lino, cáñamo, algodón, almidón, madera, residuos; y entre los reciclados citamos los trapos y residuos de imprenta. * Polisacárido formado por pentosas o exosas condensadas por pérdida de agua, insoluble en agua y solventes orgánicos, con estructura de red cristalina, con distinto grado de polimerización, forma el tejido celulósico de todos los vegetales, constituye prácticamente la mitad de los componentes de las paredes celulares que forman la madera y con el envejecimiento en los intersticios se deposita lignina y sustancias pépticas.

A.1.1 Tipos de pastas de Papel La pasta es la materia prima procesada cuyo origen es la madera, y de acuerdo a su modo de procesamiento podemos distinguir los siguientes tipos de pasta:

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a) Pasta mecánica: Obtenida por tratamiento mecánico de la madera, con pulpa de bajo contenido en celulosa y poco resistentes (maderas blandas como el álamo o sauce). Es aplicable a la fabricación de periódicos, cartón para cajas, empapelado de paredes o para mezclas con pasta química a objeto de abaratar el costo de los productos. El proceso incluye los siguientes pasos: -Trozado, Descortezado, Pulpeado, Molido, Cribado, depurado, Espesado y desecado. b) Pasta química: Este tipo de pasta se caracteriza por someter a un tratamiento con reactivos químico en un proceso llamado –Cocción- a la materia prima, luego del chipeado. Según el reactivo utilizado para la cocción que se realiza en los llamados digestores, pueden resultar: b.1 – Pasta al sulfato: Con hidróxido de sodio, sulfuro de sodio y sulfato de sodio. Utilizada para papeles de bajo precio y color muy pobre aunque son de alta resistencia. b.2 – Pasta a la soda: Con soda cáustica, o carbonato de sodio e hidróxido de calcio. Se utilizan maderas blandas de fibras cortas y se obtienen papeles para revistas y libros. b.3 – Pasta al sulfito: Se utiliza bisulfito de calcio o magnesio. Se usa para papeles de alta calidad y para billetes. c) Pasta semiquímica: En donde se realiza una mezcla de procedimiento mecánico con el químico por lo que la lignina no es totalmente eliminada y resulta un procedimiento más económico con un producto de más calidad A.2 Encolantes: Son sustancias generalmente de naturaleza orgánica que tienen la función de mantener unidas las fibras de celulosa entre sí, algunas de ellas son: Cola vegetal (almidón), Cola animal (gelatina) y sintéticas. Actualmente es muy común también el agregado de un aglutinante por lo general sulfato de alúmina. A.3 Carga mineral. Compuestos de origen mineral, cuya función es dar resistencia al papel a la penetración de los líquidos y otorgarle características como opacidad, blancura, dureza, etc. Los más utilizados son: caolín, talco, yeso, arcilla, carbonato, etc. Consignase también que muchos papeles llevan como componente, sustancias colorantes de naturaleza orgánica o mineral, cuando se trata de papeles coloreados. B) Pigmento Escritural: Sustancia coloreada o no, que conforman los rasgos convencionales (signos, números, letras) de una escritura.

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B.1 - Estos pigmentos son trasladados al papel a través del elemento escritor, que puede tener diversa naturaleza; bolígrafos, plumas, sellos, maquinarias de impresión, lápices, crayones, etc. De forma general estos pigmentos, pueden dividirse en: Tintas: Soluciones o suspensiones que al ser depositadas sobre el papel, dejan por depósito, penetración, evaporación del solvente o reacciones de sus componentes, residuos de color, intensidad y perennidad tales que hace posible la escritura. Lápices: Artificios adecuados que mantienen un eje o mina de sustancia sólida coloreada, de dureza adecuada y que por desgaste de la misma al pasar por el papel origina deposición del pigmento sobre éste. B.2 - Referencia de tintas conocidas a lo largo de la historia (*) (*) Cuadro de referencia extraído del “Manual de Química Forense” – Dra. Patricia M Caro

Tinta Carbonosa (China)

Fecha de Aparición a.C. s VIII

Ferrogalotánicas (*) s XIX

1847

Composición Negro de humo + cola o goma Extracto de nuez de agallas c/ sales de hierro + cola o goma. Acidos tánico y gálico – sulfato ferroso – colorante – conservadores – coloides – ácidos minerales. Hematoxilina – cromato de potasio.

Al Campeche 1857 A la Nigrosina

1867

A la anilina

1871

Alcalinas

1917

De bolígrafo

1945

Lápices de fibra Fluidas

1964 1980

Hematoxilina – alumbre – sulfato de Cobre Anilina del nitrobenceno + cloruro férrico = nigrosina Colorantes sintéticos – conservantes – fluidificantes – sales de Cobre Metavanadato de amono o ftalocianina (Cu) + coloide (almidón) Colorantes sintéticos + vehículo oleoso o alcohólico Anilinas en base acuosa Anilinas

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Tinta (continuación)

Fecha de Aparición

Sellos

Composición Colorantes básicos de anilinas – glicerina o glicol – alcohol bencílico o acetina – acetona, etanol o butanona – tanino – goma arábiga – cola o dextrina – aceite de lino – colofonia. Negro de humo – soportes oleosos – pigmento azul (azul de Prusia) Oxido férrico – negro de humo – cera – copolímero de etil-vinilacetato

De máquinas de imprenta Tonner

(*) Por su importancia en la determinación de la edad de un escrito se hará referencia especial de las tintas ferrogalotánicas, llamadas también tintas férricas, azul - negras o evolutivas. Son ejemplos de sustancias más utilizadas como componentes de las tintas citadas en el cuadro precedente, los siguientes: Colorantes sintéticos a la anilina: Básicos: verde de malaquita, violeta de metilo, azul Victoria, rodamina B, azul de metileno. Acidos: azul de naftaleno, amarillo naftol, eosina, amarillo metamilo. Directos: pardo de difenilo, azul de difenilo, rojo congo. Derivados de la ftalocianinas: Complejos de Cobre Conservantes: Fenol, timol, formaldehído, Beta-naftol. Fluidificantes: Glicerina, etilenglicol, glucosa, dextrina. Vehículos oleosos (para tintas de bolígrafos): Oleína, aceite de castor, aceite mineral, adicionados con éter de petróleo o benceno. Vehículos alcohólicos: Polietilenglicol, butilenglicol, octilenglicol.

B.3 – Tintas Ferrogalotánicas Su composición básica es la siguiente: 

Solvente: Agua.

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

    

Pigmento: Tanato férrico, que se forma en el soporte, una vez realizada la escritura; por oxidación de los componentes Sulfato ferroso a férrico en conjunción con los ácidos tánico y gálico. Colorante Auxiliar: El primero fue el índigo que luego fue reemplazado por el azul soluble, siendo su función hacer visible la escritura desde el mismo acto de ejecución. Conservadores: Como el fenol y el ácido bórico para evitar la proliferación de hongos y bacterias. Coloides Protectores: Goma Arábiga o Cola, evita la precipitación del tanato férrico en el tintero, manteniéndolo en suspensión. Acidos Inorgánicos: Generalmente el ácido sulfúrico o clorhídrico, cuyo objetivo es disminuir la ionización del ácido tánico.

La formación del tanato férrico en el soporte papel, con el consiguiente paso del color azul (debido al colorante auxiliar) a negro que se verifica en el escrito es la característica evolutiva de éstas tintas en referencia al tiempo. Aunque esta característica está sujeta a la incidencia de factores como el clima, la exposición al aire, el calor, la humedad y la luz; es posible el análisis y medición comparativa de este proceso químico, permitiendo establecer o determinar fehacientemente la edad de un escrito. Para desarrollarse totalmente el color negro de la tinta en toda su intensidad se requieren varios años. Dada la complejidad de la composición de estas tintas, que resulta en una desventaja comercial, las mismas prácticamente están en desuso

1. MUESTRAS PARA ESTUDIO Indudablemente las muestras para estudio serán: los diferentes documentos y/o valores, como escritos en general impresos o manuscritos, cheques, papeles de tipo sellados, moneda, de tramitación controlada, etc. En todos los casos, indefectiblemente se necesitarán para el estudio confrontativo y según el interés pericial muestras testigos o de referencia.

1.1.

NORMATIVAS A SEGUIR EN LA RECEPCIÓN DE MUESTRAS

-

Recibir la solicitud de pericia y el documento a peritar bajo acta, describiendo el tipo y estado del documento.

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Fotografiar el documento en planos general y en detalle, con el fin de registrar imperfecciones, accidentes, defectos, marcas o detalles que interesen a la peritación. Multicopiar el documento a peritar a objeto de fijar en él, los detalles y observaciones que resulten de los análisis a realizar. En caso de utilizar un método destructivo o que alterará el estado original del documento comunicar y solicitar por escrito la autorización competente para proseguir con dichos estudios.

-

-

1.2

OBJETO DE PERICIA QUÍMICA DOCUMENTOLOGICA

Las interrogantes periciales que hacen el objeto de la pericia química documentológica, en general tienden a buscar respuesta a: - La contemporaneidad de un documento en referencia al tiempo de ejecución del escrito o entre partes del mismo, lo que técnicamente llamamos Edad Absoluta y Edad Relativa, respectivamente. - La similitud o diferencia del pigmento escritural utilizado; en referencia: - Partes de un mismo documento (para establecer agregados y/o falsificaciones), o - Un determinado elemento escritor. Para dar respuestas a lo requerido en la pericia química documentológica, se pueden analizar; ambos componentes del documento (el soporte y el pigmento escritural), aunque la mayoría de las veces con el estudio de uno de ellos será suficiente. Es importante además aclarar que por la naturaleza de las interrogantes y atendiendo a las cantidades disponibles de estos componentes en los documentos; en general no es necesario establecer la composición química exacta de ellos sino más bien determinar semejanza o diferencia en cuanto a las características físicas y químicas de ellos. Cabe entonces solicitar al perito químico, determine:   

Semejanza o diferencia de un escrito, en cuanto al pigmento escritural respecta (Establecer semejanza o diferencia entre las tintas) Semejanza o diferencia entre muestras de soportes de documentos. El tipo de pigmento escritural a fin de poder establecer la edad, para el caso de tintas ferrogalotánicas.

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2. ESTUDIOS REALIZADOS Los estudios realizados implican determinaciones físicas y químicas aplicables al soporte y al pigmento escritural. Por razones de que el papel, es el soporte más difundido para la documentación escrita y las tintas para la realización del escrito, en este material referiremos métodos y técnicas a ser utilizados en el estudio pericial de estos, recordando que existen otros soportes y otros tipos diferentes de pigmento escritural, que podrían requerir el estudio químico documentológico.

2.1

ANALISIS PERICIAL DEL PAPEL

2.1.1. Análisis físico: Constituye el análisis de las características físicas del papel. Las determinaciones a realizar son: - Observaciones macro y microscópica. - Medida del gramaje, que expresa el contenido de material fibroso. - Medida del espesor. - Tipo de papel.- Características particulares: marcas de agua, fibrillas, filigranas, etc. - Propiedades: color, blancura, transparencia, satinado, opacidad, permeabilidad, rigidez, suavidad, textura, fluorescencia, brillo, superficie, etc. - Medidas de resistencia a: a) la tracción, que determina la fuerza necesaria para provocar la ruptura de una franja o tira de papel y se expresa como la longitud en metros que debe tener una tira de papel para romperse por su propio peso. b) la explosión, que es la presión necesaria para provocar el estallido de una muestra colocada en un diafragma circular y se expresa en Kg./cm. c) al rasgado, que determina la fuerza necesaria para producir y continuar un desgarro o rompimiento en el papel. d) al plegado, Se estudia el aguante del papel al ser doblado.

a y b son determinaciones de interés industrial, que generalmente carecen de valor pericial para las interrogantes planteadas, salvo casos que se estudien falsificaciones y/o adulteraciones de papel a gran escala.

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Procedimiento Analítico: 1. Las observaciones se harán en primer lugar, utilizando luz solar y luz artificial blanca y/o con diferentes filtros; atendiendo de utilizar las fuentes luminosas con los tres ángulos de rigor para el examen documentológico (rasante, perpendicular y oblicua). 2. Finalizada la observación macroscópica se procede a la observación detallada con elementos e instrumental adecuado como ser, en orden de resolución: lupa, microscopio de comparación y el Epimicroscopio, estas observaciones permitirán establecer las cualidades de la muestra, acompañando por análisis táctil. 3. La determinación del gramaje se realiza en balanza analítica, pesando 1 dm2 de muestra libre de escrito u otro agregado, cuidando de colocar la muestra en desecador antes de la pesada. El valor obtenido se extrapola para expresarlo en g/m2. 4. La determinación de espesor se realiza utilizando el micrómetro y expresando los resultados en un valor promedio. 5. En cuanto a le determinación de la permeabilidad será suficiente gotear agua destilada sobre un sector de la muestra y apreciar el tiempo de penetración de las gotas en el seno del papel.

2.1.2. Análisis Químico: El análisis químico implica determinaciones que buscan determinar los componentes del papel, a continuación se detallan las reacciones de mayor utilidad. a) Determinación de la Sustancia Encolante: Por su disponibilidad y rendimiento en costo para la industria del papel, se detallan a continuación la metodología de las sustancias más comúnmente utilizadas. Procedimiento Analítico Almidón 1. Raspar finamente la superficie del papel y recoger el producto del raspado sobre vidrio reloj o lámina portaobjeto. 2. Agregar agua destilada y cubrir con cubreobjeto. 3. Agregar por capilaridad unas gotas de solución diluida de yodo. 4. Aparece coloración azul o azul violeta en caso positivo.

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Cola Animal o Gelatina 1. Suspender trocitos de muestra en agua destilada y concentrar a Baño María. 2. Agregar unas gotas de solución acuosa de ácido tánico al 10 %. 3. Aparece un precipitado coposo, en caso de hallar la proteína. Resina 1. Colocar trocitos de la muestra en alcohol de 95 grados, para disolución y extracción de la resina, pasar a un recipiente de porcelana, luego de agitar enérgicamente por un breve tiempo. 2. Evaporar a sequedad y agregar dos gotas de anhídrido acético y dos gotas de ácido sulfúrico. 3. Aparece color violeta rojizo en caso positivo. Caseína 1. A una porción desmenuzada de muestra, agregar hidróxido de sodio al 1 %. 2. Acidificar con ácido acético hasta formación de precipitado de caseína. 3. Filtrar y secar, el precipitado en estufa. 4. Calentar a BM agregando 10 gotas de ácido sulfúrico y 20 gotas de ácido acético. 5. Aparece color violeta rojizo en caso positivo Agregados Plásticos (Resinas naturales, sintéticas o de poliamidas) Estudios por espectrofotometría infrarrojo. b) Determinación de la Lignina: La presencia de ésta hace la diferencia de papeles fabricados con pasta mecánica de los que provienen de pasta química. Procedimiento Analítico: Existen dos reacciones aplicables: 1. Colocar una gota de reactivo formado por 1 g de sulfato de anilina en 50 ml de agua destilada y una gota de ácido sulfúrico (de preparación reciente). En caso positivo aparecerá color rojo intenso a rojo violeta. 2. Colocar una gota del reactivo formado por 1 g de floroglucinol en 50 ml de etanol y 25 ml de ácido clorhídrico. En caso positivo aparece color rojo intenso a rojo violeta.

c) Análisis de colorantes: Especialmente en papeles coloreados.

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Procedimiento Analítico: 1. Agotar la muestra en agua destilada a 90º, durante varias horas. 2. Concentrar y realizar corrida cromatográfica. d) Análisis de Fibras: Determina el tipo de materia previa utilizada en la fabricación del papel. Procedimiento Analítico: 1. Eliminar encolantes y carga por tratamiento con solución acuosa de hidróxido de sodio al 1% y calor hasta ebullición. 2. Enfriar y agitar, lavar con agua corriente, escurrir y separar en porciones sobre lámina. 3. Agregar a cada porción el reactivo de la tabla siguiente. Reactivo Herzberg: 25 ml de solución acuosa de cloruro de zinc conteniendo 0,25 g de yodo y 5,25 g de yoduro de potasio, disueltos en 1,25 ml de agua destilada.

Color de las fibras Rojo oscuro

Sutermeister: A 45 ml de solución preparada con 100 g de cloruro de calcio y 150 ml de agua destilada, agregar 5 ml de solución preparada con 0,9 g de yoduro de potasio y 0,65 g de yodo en 50 ml de agua destilada, más una laminilla de yodo

Rojo castaño

Amarillo Azul violeta

Azul oscuro Violeta rojizo Verde

Reactivo “C” de Craff: 20 ml Amarillo – naranja de solución acuosa de cloruro de aluminio de densidad 1,15 Amarillo – púrpura más 10 ml de solución acuosa de cloruro de calcio de Verde a púrpura densidad 1,36; agregando 12,5 pálido ml de solución preparada con 0,90 g de yoduro de potasio y Amarillo pálido a 0,65 g de yodo en 50 ml de púrpura pálido. agua destilada. Rojo - naranja

Revela presencia de Celulosa normal, algodón, lino cáñamo Pasta mecánica, yute Pastas químicas blanqueadas de madera lignocelulosa, yute, paja, bambú Algodón, lino, cáñamo, ramio. Pulpa a la soda blanqueada, madera dura Pulpa al sulfito blanqueada. Yute, paja, bambú

Pasta mecánica Coníferas al sulfito Coníferas al sulfato

Maderas latifoliadas al sulfito Paja

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e) Determinación de la carga: Consiste en conocer el mineral presente como carga. Para ello se pueden aplicar técnicas de espectrofotometría de absorción atómica, y una técnica más sencilla y al alcance de laboratorio químicos básicos que consiste en seguir la marcha analítica para cationes y aniones, e investigar los siguientes: - Cationes: hierro, magnesio aluminio, calcio, bario, sodio, potasio, cobre, manganeso, plomo, titanio, zinc; y - Aniones: silicato, sulfatos y carbonatos. Procedimiento Analítico: 1. Calcinar 250 – 1 g de muestra a 900º, hasta peso constante de las cenizas blancas obtenidas. 2. Colocar las cenizas en una cápsula de porcelana y agregar en pequeñas porciones, cantidad suficiente de Acido clorhídrico al 20 %, hasta que cese el desprendimiento de gas. Si la disolución de las cenizas es total la carga queda identificada como CARBONATO. 3. Si queda residuo insolubles secar a BM y agregar carbonato de sodio anhidro, 5 a 6 veces del peso de la muestra y calentar sobre mechero hasta que se funda y desprenda CO2, continuar hasta disgregación total y enfriar. Si no queda residuo queda identificado el CAOLIN como carga 4. Si aún queda residuo blanco, tratar con ácido clorhídrico al 20 % hasta disolución. Si queda residuo la carga identificada es el ÓXIDO DE TITANIO. Si no queda residuo se puede tratar de OXIDO DE MAGNESIO, CARBONATO DE CALCIO O CARBONATO DE BARIO, que son insolubles en medio ácido. 5. Continuar con ensayos específicos aplicados a la solución resultante del paso anterior, que se dividirá en porciones según el número de ensayos a realizar. Se detalla en la tabla siguiente, las reacciones químicas de los minerales más comúnmente utilizados. Catión – Anión Silicato Sulfato

Aluminio

Ensayo específico Agregar ácido clorhídrico gota a gota hasta reacción ácida Agregar ácido clorhídrico gota a gota hasta que cese efervescencia y la reacción sea ligeramente ácida; luego agregar gota a gota una solución de cloruro de bario al 10 % Agregar ácido clorhídrico gota a gota hasta reacción ligeramente ácida; luego agregar cloruro de amonio y calentar a ebullición, finalmente agregar amoniaco gota a gota hasta reacción alcalina

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REACCIÓN Precipitado gelatinoso

Precipitado blanco

Precipitado blanco gelatinoso

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Calcio

Bario Magnesio

Agregar amoniaco hasta reacción ligeramente alcalina, luego agregar gota a gota oxalato de amonio al 10 % Agregar a la solución 2 a 4 gotas de ácido sulfúrico al 5 % Agregar cloruro de amonio y 1 a 2 gotas de fosfato ácido de sodio al 10 % y luego gota a gota, amoniaco hasta reacción alcalina

Precipitado blanco Precipitado blanco

Precipitado blanco

Interpretación de los resultados: Carga - Caolín - Talco - Espato Pesado - Carbonato de calcio - Carbonato de bario - Sulfato de calcio - Oxido de titanio

2.2.

Indicado por: silicato – aluminio silicato – magnesio sulfato – bario carbonato – calcio carbonato – bario sulfato – calcio titanio

ANALISIS PERICIAL DE TINTAS

2.2.1. Análisis Físico: Comprende la observación directa del documento, así como con instrumental óptico y lumínico adecuado, utilizando distintas fuentes de luz con diferentes ángulos de incidencia. Ello permite: - revelar el color, - los brillos, las fluorescencias y/o - luminiscencias, - la penetración y/o - adherencias al papel; así como también características propias de la escritura como, - profundidad de los surcos y/o - posibles yuxtaposiciones. 2.2.2. Análisis Químico: El análisis químico pericial de la tinta tiene por objeto en general, establecer semejanza o diferencia entre las muestras de partes distintas de un mismo documento o entre varios documentos. Respecto a la determinación de la “Edad” de un escrito (tiempo o data de ejecución), resulta imposible por métodos analíticos comunes a la fecha de edición de este material, determinar fehacientemente la fecha o tiempo de su ejecución; por el hecho que en las tintas de uso moderno no existen componentes que presenten una variación medible. Una excepción son las antiguas tintas llamadas ferrogalotánicas, conocidas también como “evolutivas”, a las que haremos referencia más adelante.

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En cuanto a las determinaciones aplicables en el análisis químico de las tintas, citaremos: a) El ensayo a la gota: Consiste en la puesta en contacto (temporal) de los trazos del escrito con una serie reactivos y observar sus reacciones. Varios son los reactivos preconizados, la batería de reactivos utilizada por la autora es la que recomiendan textos internacionales, conocida como la de “O’ Hara y Osterburg“ y consta de los siguientes grupos de reactivos: -

Acidos: Ac. Clorhídrico 5 %, Ac. Sulfúrico 5%, Ac. Nítrico 5%, Ac. Oxálico 10 %, Ac. Tartárico 10 %, Ac. Cítrico 10%. Básicos: Hidróxido de sodio 2%, Carbonato ácido de sodio saturado. Reductores: Cloruro de estaño 10% en ácido clorhídrico 0,1 N, Anhídrido sulfuroso. Oxidantes: Hipoclorito de sodio concentrado, Hipoclorito de calcio concentrado, Agua de cloro, Agua de bromo Complementarios: Ferrocianuro de potasio al 5% en ác. clorhídrico 0,8%, Cloroformo, Piridina, Etanol, Butanol:Acido acético 40:10

Procedimiento Analítico 1. Agregar sobre el trazo en estudio, una gota de reactivo en micropipeta (se puede utilizar un solo reactivo de cada especie). 2. Observar el efecto o reacción que se produce con lupa de bajo aumento, en un tiempo máximo de 2 minutos. 3. Eliminar el exceso de reactivo con papel de filtro. 4. Lavar con pequeñas alícuotas de agua destilada. 5. Elaborar un cuadro con los resultados obtenidos para la comparación final. b) Cromatografía: La cromatografía es un método físico – químico de separación de componentes de una mezcla, en función a la distribución de ellos según sus características físicas y químicas por una de las dos fases componentes del sistema cromatográfico, que son la Fase Estacionaria y la Fase Móvil. De los varios tipos de cromatografía existentes; la de aplicación para el estudio de tintas de uso de la autora; es la cromatografía en capa fina o capa delgada, siendo las fases estacionarias utilizadas: -la placa de aluminio y -la placa de silicagel o gel de sílice. En cuanto a la selección de los solventes que integrarán la fase móvil es un poco más complicada y se hará atendiendo a los siguientes factores:

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

Deberá solubilizar los solutos de la muestra pero no el adsorbente.



No deberá experimentar reacción química en particular con ninguno de los componentes de la muestra, ni con el material adsorbente.



Procurar la pureza del solvente evitando significativamente la polaridad del solvente puro.



Optar por los solventes de baja viscosidad, brindando la posibilidad de mayor velocidad de migración.



Optar por solventes de baja toxicidad, disminuyendo así el riesgo del analista.

mezclas

que

alteren

 La polaridad y selectividad de los solventes. La polaridad se puede definir como una medida de la capacidad del solvente para experimentar interacciones moleculares en general y la selectividad es la potencialidad relativa para generar interacciones intermoleculares específicas como los puentes de hidrógeno por ejemplo. El modo de expresar los resultados obtenidos en la corrida cromatográfica es el RF (Factor de retardo o retención – Relación de frente), con el cual se logra establecer la posición final de las máculas resultantes que significarán un componente en particular. Entonces el RF es un indicador numérico de relación existente entre la distancia recorrida o de migración de un determinado compuesto, desde el punto de siembra en la cromatoplaca, y la distancia recorrida por el frente del solvente, desde el punto de siembra hasta la posición final de cada uno de ellos en la cromatoplaca una vez finalizado la corrida cromatográfica.

El valor de Rf se halla comprendido en un rango cuyos extremos son “0” y “1”. Un Rf = 0 es indicativo de que la fase móvil utilizada no es la apropiada pues la muestra no ha abandonado el punto de siembra, por el contrario un RF = 1 es indicativo de que las interacciones moleculares del solvente con la muestra es definitivamente preponderante y por lo tanto no es útil como líquido resolutivo. Se considerará un sistema adecuado cuando las máculas obtenidas estén posicionadas y nítidamente distanciadas entre sí con un RF comprendido entre 0,15 y 0,85, considerando la posición inicial y la posición final del solvente.

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Procedimiento Analítico 1. Seleccionar ambas fases integrantes del sistema. 2. Preparar la cuba cromatográfica en la que se desarrollará cromatográfica, con los solventes elegidos y en la relación atendiendo a que el volumen de ésta fase no sobrepase luego siembra. 3. Realizar la siembra de las muestras cuidando que el espacio entre por lo menos 1 cm y todas coincidan en la línea de siembra. 4. Eliminar el exceso de reactivo con papel de filtro. 5. Lavar con pequeñas alícuotas de agua destilada.

la corrida establecida, la línea de ellas sea de

3. INFORMACIÓN ADICIONAL y OTROS ESTUDIOS DEL CAMPO: Es tarea también del perito químico ocuparse del análisis del documento a fin de obtener respuesta sobre: - la antigüedad de una escritura, y – la presencia de borrados.

3.1. Determinación de la Antigüedad de las escrituras: Como se mencionara en el objeto de pericia, cabe el análisis del documento a fin de establecer la Edad Absoluta y/o la Edad relativa. Edad Absoluta, se podrá resolver aplicando en conjunto: - los métodos analíticos disponibles; - los conocimientos previos referentes a tipos de tintas, papel, elemento escritor, etc. y - datos históricos que refieran, tiempo de aparición de los diferentes compuestos y agregados realizados tanto al soporte como al pigmento escritural, el conjunto de éstos factores, permitirá ubicar los escritos o documentos en el tiempo; limitando la precisión sobre la probable fecha de ejecución del documento. Edad Relativa, se impone para la resolución de ésta, el análisis confrontativo de las partes del documento o escrito en cuestión, y en el caso particular del pigmento escritural, se deberá buscar una “propiedad evolutiva”, es decir una característica del mismo que se modifique a través del tiempo una vez asentada la escritura, este condicionamiento constituye la mayor limitación de alcance mundial para la resolución de éste problema pericial. En base a las características conocidas en las tintas, desde la antigüedad hasta nuestros días se diferencian las mismas en:

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- Tintas Evolutivas que corresponden a las ferrogalotánicas y - Tintas No Evolutivas que abarca a todas las demás tintas de escritura antigua y modernas. 

Métodos de estudio: Se mencionan a continuación algunas técnicas que ofrecerán cierta probabilidad para llegar a una conclusión, ya que por la limitación explicada, ninguna tiene carácter contundente e infalible.

TINTAS NO EVOLUTIVAS a) Métodos Físicos Procedimiento Analítico 1. Observar el escrito con los respectivos tipos y ángulos de luz y aumentos adecuados de menor a mayor. Atender a los siguientes parámetros: brillo, color, intensidad. 2. Apelar a la propiedad copiativa de las tintas para escritura manual, sobre todo en tintas de baja calidad ya que las mismas poseen solventes que no secan inmediatamente y a medida que el tiempo transcurre esa capacidad irá disminuyendo. Recordar que en estos casos el análisis es de carácter confrontativo. b)

Métodos Químicos: Se podrán también aplicar los métodos descritos que si bien no aportan datos sobre el tiempo de ejecución, en caso de arrojar diferencias entre las partes estudiadas; ayudará a un resultado concluyente.

TINTAS EVOLUTIVAS a) Métodos Físicos Procedimiento Analítico 1. Observar el escrito conforme a la técnica de análisis y atender al cambio progresivo del color azul a negro, procurando establecer diferencias entre las partes estudiadas. Utilizar microscopio provisto de dos objetivos. 2. Determinación de la solubilidad: Se fundamenta en que a medida que se va formando el tanato férrico (pigmento definitivo) se verifican procesos de resinificación; lo que hace que la difusión rápida y fácil del pigmento auxiliar disminuya y de verificarse inclusive por tratamiento acuoso, pasa a ser resistente inclusive a tratamientos con reactivos ácidos y alcalinos enérgicos. El procedimiento analítico en sí, se basa en determinar cronométricamente, el tiempo de difusión del colorante auxiliar, aplicando con micropipeta una gota de ácido oxálico al 5 %.

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b) Métodos Químicos Procedimiento Analítico: La oxidación del ión ferroso a férrico, presente en la tinta se verifica en un lapso variable. Al asentarse el escrito sobre el papel primeramente habrá predominio de ión ferroso y con la evolución éste se irá convirtiendo en férrico. Tal consideración propone el reconocimiento del ión ferroso y la determinación de su concentración que irá disminuyendo para obtener elementos de juicio y establecer comparativamente la antigüedad del escrito. El reactivo utilizado es el 2 – 2’ bipiridilo al 1 % en ácido clorhídrico al 5 % en volumen, que ante la presencia del ión investigado dará un neto color rojo; para la práctica analítica: colocar sobre el rasgo una gota de solución acuosa de ácido clorhídrico al 10 % en volumen, dejar 1 minuto y aplicar 1 gota del bipiridilo, aparece color rojo en el entorno de la mancha azul del colorante auxiliar, pudiéndose registrar colores complementarios de acuerdo a las proporciones del complejo metálico(rojo) y del colorante (azul)

3.2 Determinación de Borrados Se llama borrado o erradicación a la remoción de una parte de un documento por medios físicos o químicos. Este hecho es muchas veces es utilizado con fines dolosos para adulterar parcialmente un documento, lo que indiscutiblemente resultará más fácil para el falsario que realizar íntegramente todo el documento. Los tipos de borrados y métodos para su ejecución se citan a continuación: I) Borrado Físico Por abrasión de la superficie escrita. Por lavado con disolventes adecuados Por combinación de los dos métodos citados. II) Borrado Químico: Consiste en un tratamiento químico de tipo oxidativo en el que las sustancias coloreadas se vuelven incoloras y/o solubles.  Métodos de Estudio: Se describe a continuación, algunas técnicas aplicables para detectar la existencia de un borrado, aclarando que no todas las veces es posible obtener o descifrar el escrito erradicado y existen otras técnicas similares pero de mayor especificidad para el efecto.

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3.2.1. DETECCIÓN DE BORRADOS FISICOS a) Métodos Físicos Procedimiento Analítico 1. Observar directa del documento con los respectivos tipos y ángulos de luz y aumentos adecuados de menor a mayor. Atender a los siguientes parámetros: reducción del espesor del papel, presencia de mancha al dorso coincidente con la parte afectada. 2. Observar con lupa binocular o estereoscópica, buscando levantamiento ý desprendimiento de fibras celulósicas del papel. 3. Observar con luz Ultravioleta en la búsqueda de sectores que presenten diferencia franca de fluorescencia. 4. Uso de polvos o vapores de yodo: En ambos casos los elementos utilizados se adherirán selectivamente al lugar en donde las fibras hayan quedado al descubierto por la disminución del encolado.

b) Métodos Químicos: Se podrá buscar la presencia de trazas de azufre proveniente de la goma de borrar cuando ésta haya sido utilizada como medio para la erradicación. Procedimiento Analítico 1. Aplicar una lámina de plata limpia y exenta de impurezas, sobre el sector dubitado. 2. Colocar sobre la lámina de plata, una plancha térmica durante 1 hora. 3. Si la reacción es positiva se revelará sobre el papel una mácula de color castaño correspondiente a sulfuro de plata.

3.2.2. DETECCIÓN DE BORRADOS QUÍMICOS a) Métodos Físicos 1. Procedimiento Analítico Observar el escrito conforme a la técnica de observación ya descrita y atender a los siguientes cambios: - disminución del brillo por acción de los reactivos erradicadores y el plegamiento o arrugamiento del soporte. 2. Observar con luz Ultravioleta en la búsqueda de diferencia ostensible de fluorescencias, aunque esto no es determinante de la existencia de un borrado. 3. Utilizar papel indicadores de ph, que aplicados húmedos sobre el sector dubitado y no dubitado puede arrojar similitudes o diferencias que se deben a la existencia de residuos del reactivo erradicador.

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b) Métodos Químicos Es posible también realizar la investigación específica de los restos del erradicador utilizando reacciones colorimétricas para los erradicadores de uso más común. a) Hipoclorito con nitrato de plata al 2% produce precipitado blanco caseoso. b) Permanganato: Por tratamiento con una gota del reactivo constituido por partes iguales de agua oxigenada de 20 volúmenes y amoníaco concentrado aparecerá en el sector dubitado un color castaño de bióxido de manganeso. RECORDAR QUE LAS REACCIONES SE VERIFICARÁN EN CANTIDADES MÍNIMAS, Y SERÁ MEJOR OBSERVAR LA REACCION CORRESPONDIENTE EN UNA LUPA ESTEREOSCÓPICA O EPIMICROSCOPIO PARA SU CORRECTA INTERPRETACIÓN.

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CAPÍTULO VIII – PARTE ESPECIAL

QUIMICA PAPILOSCOPICA La aplicación de la química forense es también extensible a la PAPILOSCOPIA, ciencia que estudia la morfología papilar de los dedos y palma de las manos, así como de la planta de los pies; con fines de identidad personal. La morfología papilar se presenta con iguales características en: - las yemas de los dedos y su estudio se conoce como “Dactiloscopia”, - la palma de las manos, su estudio se conoce como “Palmatoscopía”, y - la planta de los pies, designándose su estudio como “Pelmatoscopía”. De las tres subdivisiones descritas en ésta ciencia, la de mayor difusión por su gran utilidad es la Dactiloscopía y la utilidad de la Química en la Papiloscopía, se basa en el soporte de numerosos métodos químicos utilizados para el tratamiento de muestras, detección y revelado de huellas o rastros papilares. Se hace referencia, de algunos conceptos necesarios para introducirnos en el área química de ésta disciplina. -

Crestas papilares y surcos interpapilares: Constituyen las rugosidades de la piel, formadas por papilas dérmicas o salientes que corresponden a las crestas papilares y las depresiones entre ellas, conforman los surcos interpapilares.

-

Dactilograma: Es el conjunto de papilas dactilares que conforman dibujos en las yemas de los dedos, los que al ser apoyados sobre determinados objetos, imprimen sus figuras por medio de la secresión sudoripara o por efecto y/o acción de sustancias coloreadas o métodos adecuados para su revelado.

-

Dactiloscopía: ciencia que estudia y compara las huellas dactilares que se producen con las yemas de los dedos de las manos, con el objeto de identificar a personas vivas o muertas. La identidad dactiloscópica es la resultante de la comparación o confrontación de las impresiones dactilares obrantes en archivo, con las impresiones obtenidas en el lugar de los hechos.

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-

Huella dactilar positiva: es la impresión artificial de la figura dactilar de los dedos de las manos (puede ser total o parcial), sobre alguna superficie, a causa de la impregnación de éstos con alguna sustancia colorante.

-

Huella dactilar negativa: Es la impresión artificial de la figura dactilar de los dedos de la mano, (puede ser total o parcial) observables sobre materias blandas (plastilina, arcilla, yeso, pintura fresca, etc.) que registran sus relieves y surcos.

-

Huella latente: Figura invisible que se produce al contacto de las papilas y surcos interpapilares, con una superficie lisa o pulida, a causa del sudor emanado por los poros sudoríparos ubicados en la cima de las papilas. Corresponde al dibujo o figuras formadas por las papilas y surcos de los pulpejos de los dedos.

-

Origen de las huellas: Si bien es cierto que el dactilograma está conformado por el conjunto de las crestas papilares y surcos interpapilares: lo que en realidad hace posible la transferencia de estos diseños a otras superficies, son las secresiones producidas por las glándulas sudoríparas halladas en la piel, a lo que en ciertas regiones específicas del cuerpo sumamos otras como: las glándulas exocrinas en las palmas y plantas de los pies, las glándulas apocrinales en la ingle, axilas, y áreas perianales y, las glándulas sebáceas, en la raíz de pelos, cara, labios de la vagina, entrerrosca del pene y areolas de las mamas.

Componentes químicos de las secresiones INORGÁNICOS agua (98 %) cloruros sulfatos fosfatos amoníaco hierro

ORGANICOS aminoácidos urea ácido úrico y láctico azúcares creatinina colina proteínas hidratos de carbono esteroles ácidos grasos triglicéridos hidrocarburos alcoholes

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SISTEMA DACTILOSCOPICO DE JUAN VUCETICH El Profesor Juan Vucetich, de origen dálmata naturalizado argentino, basa su sistema en la formulación de cuatro tipos fundamentales: ARCO: Sus crestas papilares corren de un lado a otro sin regresar, carecen de deltas y pueden adoptar diversas formas como el arco normal o piniforme o en tienda.

-

PRESILLA INTERNA: Sus crestas papilares nacen a la izquierda, corren un trayecto a la derecha, dan vuelta y regresan al mismo lado de partida, formando un núcleo. Tiene también un delta a la derecha del que observa.

-

-

PRESILLA EXTERNA: Sus crestas papilares nacen a la derecha, corren un trayecto a la izquierda, dan vuelta y regresan al mismo lado de partida, formando un núcleo. Tiene también un delta a la izquierda del que observa.

VERTICILO: Tiene dos deltas, uno a la derecha y otro a la izquierda del que observa. Su núcleo adopta diversas formas, helicoidales, circulares, elípticas, espirales, etc.

El sistema del Profesor Juan Vucetich es mucho más complejo al entrar en las variantes, combinaciones de éstas y puntos característicos que el mismo define. El conocimiento exhaustivo de estos queda a cargo del Perito Dactiloscopo, cuya función es la clasificación del dactilograma para la identificación de personas; en tanto que para el químico que trabaja al lado de éste profesional, es suficiente

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distinguir las características básicas de una huella dactilar, palmar o plantar, a fin de coadyuvar en su detección, revelado y transporte hasta el laboratorio.

1. MUESTRAS PARA ESTUDIO Los materiales en los que se procederá a buscar posibles rastros papilares pueden ser de la más variada naturaleza, y según ésta se distinguen en: - Materiales suaves como masilla, cera, adhesivos y pinturas - Materiales porosos o nó porosos Y según la característica de estos en superficies lisas y corrugadas Los rastros papilares presentes en el lugar de los hechos o en soportes remitidos hasta el laboratorio podrán ser: - Rastros visibles a simple vista y - Rastros no visibles o invisibles 1.1

LOCALIZACIÓN Y TRATAMIENTO

Rastros visibles: se localizarán con una buena inspección técnica ocular, haciendo uso de elementos ópticos auxiliares como lámparas de luz blanca y ultravioleta. Rastros invisibles: Dada su condición de invisibilidad, estor rastros deberán ser revelados. Los diferentes métodos o procesos de revelado son: - Optico - Fisico - Químico - Fisico – químico La elección del proceso a utilizar depende de: - La naturaleza del soporte, característica de la superficie y - de la precedencia de los rastros.

1.2.

OBJETO DE LA TAREA QUÍMICA

El trabajo del químico en este caso es el revelado de los rastros no visibles o invisibles.

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2. DESCRIPCION DE LOS METODOS DE REVELADO  Método óptico: Comprende el examen VISUAL, con los elementos auxiliares como la LUZ BLANCA y la luz ultravioleta, obteniendo mayor eficacia con la luz reflejada, lo que no implica la omisión del uso de los tres ángulos de luz, utilizados normativamente en un laboratorio forense; esto es luz reflejada, rasante y transmitida.  Método Físico: En el método físico, se utilizan distintos tipos de sustancias que por procesos físicos de absorción o adsorción, se unen a las sustancias responsables de la huella dactilar, las que son secretadas principalmente por las glándulas sudoríparas. Las sustancias más difundidas por su eficacia, costo y sencillez son: a) Los polvos reveladores, para su selección, hay que tener en cuenta, -la naturaleza del soporte y el color de su superficie. Entre los más comunes contamos con el polvo de grafito y el polvo magnético. b) Micropartículas suspendidas: Constituyen los sprays que contienen una dispersión de partículas en un solvente determinado que permite la suspensión o adhesión de las partículas a las huellas. c) Violeta de Genciana  Método Químico: Basado en el uso de sustancias que se constituyen en los reactivos, que son responsables de reaccionan específicamente con los componentes orgánicos e inorgánicos de las huellas, en reacciones colorimétricas que permiten el revelado de las huellas. Entre los reactivos más difundidos podemos citar: cristales de Ninhidrina, DFO, Rodamina 6G, Amido Black, Adrox Dye Spray, Basic Yellow, Physical Developer, SPR, Mixtura MBD, Ácido Fucsina, Sudan Black, Iodina, Nitrato de Plata, TEC, Basic Red, RAY, RAM, Fluoresceína, Zinc Chloride, Nile Red, Phloxine B, Coomassie Blue y Crystal Violet.  Métodos Físico – Químico: Resulta de la aplicación de procesos físicos y químicos, generalmente los físicos se aplican en una primera etapa, y sirven para detectar huellas latentes; luego se aplican los reactivos específicos para el correspondiente revelado, que permitirá el estudio dactiloscópico correspondiente. Las técnicas más difundidas en estos casos, corresponde:

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-

Al uso del Cyanoacrylato, preferentemente para superficies no porosas y no absorventes como vidrio y metal. Yodo, para superficies porosas (papeles), así como para las no porosas y no absorbentes (vidrio, metal).

Procedimiento Analítico: Varias son las técnicas utilizadas en la revelación de huellas latentes por los distintos métodos, se citan a continuación algunas de ellas, con reactivos muy difundidos y de fácil aplicación. NINHIDRINA La ninhidrina reacciona con los aminoácidos presentes en el rastro investigado, de un color carmesí. Es muy eficaz para detectar rastros latentes en superficies porosas tales como papel, cartulina, madera etc. Sin embargo no es muy eficaz en superficies de no porosas como el papel aluminio o térmico y los objetos húmedos o mojados. Preparación del reactivo: a) Método Tradicional: - 5 gramos de ninhidrina; - 27 mililitros de metanol; - 640 mililitros de éter de petróleo b) Método Modificado (ipsc lausanne): - 4 gramos de ninhidrina; - 20 mililitros de metanol; - 10 mililitros de ácido acético; - 70 mililitros de acetato de etilo; - 900 mililitros de éter de petróleo Procedimiento: - Sumergir el soporte en el reactivo durante algunos segundos; - dejar escurrir; - Suspender el soporte en una caja oscura al abrigo de la luz; - en caso de necesidad, realizar un segundo tratamiento.

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VIOLETA de Genciana (Crystal Violet)

El cristal de violeta o simplemente violeta de genciana, se trata de un tinte colorante de naturaleza proteínica que mancha las secreciones sebáceas presentes en la piel, el sudor y las huellas tornándolos de un color púrpura intenso. Dada esta naturaleza proteínica, también puede usarse para resaltar huellas dactilares contenidas de sangre. Es aplicable al revelado físico de huellas dactilares sobre el lado adhesivo de casi cualquier cinta adhesiva: - scotch, - de embalage, - para electricista, etc. Con frecuencia, el cristal violeta es usado también para detectar objetos hurtados o robados ya que estos al contener el polvo, manchan y son fácilmente reconocibles en manos del delincuente. Se aplica una fina capa de polvo sobre el objeto y cuando éste entra en contacto con la humedad presente en las manos, toma un color púrpura oscuro y deja una marca característica sobre cualquier cosa que toque. Es factible también utilizarlo en el seguimiento de entregas controladas de efectivo en casos de secuestro colocando una fina capa de polvo sobre los paquetes de dinero. Preparación del Reactivo y Procedimiento 

Técnica 1

Fórmula -

1 gramo de violeta de genciana en 1 litro de agua destilada. Revisar el pH del agua. Ajustar el pH del agua de 7 a 8, para una preparación adecuada. El pH puede ajustarse usando amoníaco

La solución, una vez lista para ser usada, tiene la apariencia de la tinta de color amatista intenso o morado profundo, y una vez preparada la solución no debe guardarse por más de seis meses. Técnica: 1. Preparar los trozos de cinta adhesiva sospechosa. 2. Verter la solución del reactivo en una bandeja lo suficientemente larga como para alojar todo el pedazo de cinta. Si no se dispone de bandeja, remojar la cinta una y otra vez sujetándola con una pinza, a la vez de estirar la cinta con delicadeza a medida en que es introducida en la solución; esto se debe a que de hacerlo en forma apresurada podríamos distorsionar o destruir la huellas presentes 3. Remojar la cinta en la solución por unos minutos. 4. Enjuagar el excedente del reactivo con agua corriente.

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5. 6.



Las huellas se harán visibles en un contraste que puede ir de leve a profundo. Si las huellas no se aprecian bien, repetir la operación remojando la cinta en la solución por algunos minutos más. Esta operación puede repetirse varias veces, cuidando de no sobre-revelar las huellas. Técnica 2

Fórmula - Mezcla para Almacenaje: 1.5 gramos de violeta de genciana en 100 ml de alcohol etílico. - Solución de Trabajo: Diluir 2 ml de la mezcla de almacenaje descrita arriba en 100 ml de agua corriente. - Solución de Limpieza: Agregar 10 ml de ácido clorhídrico a 90 ml de agua corriente. Técnica: En este caso, usaremos el mismo procedimiento de remojar y enjuagar descrito en el método uno. Sin embargo, si las huellas resultan reveladas más de la cuenta la cinta debe remojarse en la solución de limpieza, esta ayuda a definir y lograr mejor contraste. COOMASSIE BLUE

Aplicable también al revelado de huellas latentes sobre cintas adhesivas, de manera similar a la técnica del violeta de genciana, aunque no puede usarse en todo tipo de cintas, por ejemplo scotch o cinta de tape, ya que ataca y disuelve la cinta misma.

Procedimiento ante cinta aisladora. Con frecuencia los delincuentes usan cinta adhesiva para distintos fines, maniatar a sus víctimas o amordazarlas, empaquetar sustancias ilícitas, unir cables en dispositivos detonantes, cargadores de armamentos, etc. El problema se presenta cuando la cinta sobre la que han de revelarse las huellas no ofrece buen contraste debido a su color, es el caso de la cinta para electricista, muy popular por su bajo costo y eficiencia. Esta puede ser de varios colores, en el caso de que de color negro, tal vez el color más común en el mercado, se utilizará un método diferente para revelar las huellas.

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Técnica: 1. Colocar la cinta bien lavada, enjuagada y seca, con las huellas reveladas, entre dos hojas de papel fotográfico, el lado menos pegajoso de éste, debe estar en contacto con la cinta en su lado adhesivo. Se recomienda el papel fotográfico utilizado para impresoras. Calentar una plancha para ropa, sin vapor, a temperatura moderada y pasarla sobre el 2. papel fotográfico. 3. Despegar cuidadosamente las hojas de papel fotográfico y retirar la cinta. 4. Las huellas se habrán transferido a una de las hojas de papel fotográfico. 5. Las huellas obtenidas por el procedimiento descrito aparecen invertidas. A los fines de imprimir las fotografías será necesario invertir el negativo antes de colocarlo en la ampliadora.

Nota: La descripción de la presente técnica, fue extraída del material del Abogado Carlos Zagala. Universidad Gran Mariscal de Ayacucho, Bolívar, Venezuela

Rastro papilar de la región palmar. Revelado por método físico y levantado del lugar del hecho

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CAPÍTULO IX – PARTE ESPECIAL

EL LABORATORIO Y LA TOXICOLOGÍA FORENSE La ciencia encargada del estudio de los tóxicos y los estados ocasionados por estos, en el ser humano y los animales es la TOXICOLOGÍA. La toxicología es una vasta ciencia que abarca: - el estudio del agente tóxico en su origen y propiedades; - los mecanismos de acción en los seres vivos; - sus efectos nocivos, consecuencias y tratamiento de los mismos; - los métodos analíticos utilizables para su diagnóstico y monitoreo; - así como los medios profilácticos y prevención de los efectos nocivos en los seres vivos y en el ambiente en general. En este material bibliográfico se hace referencia a algunos estudios toxicológicos, que en general, tienen relación con la comisión de hechos punibles violentos, sin abarcar in extenso y a profundidad, la amplia gama de la Toxicología, para lo cual existen innumerables bibliografías temáticas. A continuación se aborda una serie de conceptos importantes para el área forense en su relación con el laboratorio. TÓXICO: Es cualquier sustancia capaz de generar una reacción adversa, letal o no, en un organismo vivo. Desde el punto de vista de la toxicología en particular, se considera tóxico a todo agente químico que ingresando en el organismo, altera elementos bioquímicos fundamentales para el normal desarrollo de la vida. INTOXICACIÓN: Conjunto de trastornos físicos y/o bioquímicos observados en un organismo vivo a consecuencia de la presencia de un tóxico. Se distinguen tres formas de intoxicación según la rapidez de aparición, severidad y duración de los síntomas: 1. Intoxicación aguda: Por exposiciones de corta duración, dosis única o múltiples. Las manifestaciones clínicas se manifiestan con rapidez, inclusive la muerte. 2. Intoxicación subaguda: Por periodos de exposiciones frecuentes o repetidas de varios días o semanas. Los síntomas aparecen después de estos periodos.

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3. Intoxicación crónica: Por exposición repetida al tóxico, durante largos periodos de tiempo. Otro factor condicionante para que se produzcan los efectos nocivos en el organismo, dependiendo de la vía de absorción, es la Toxicidad del agente tóxico. El criterio más comúnmente utilizado para determinarla, es la Dosis o cantidad del tóxico que en determinadas condiciones es capaz de producir efectos. Las dosis consideradas son: - DE50 (Dosis Efectiva) cantidad que en determinadas condiciones produce efectos en el 50% de una población animal determinada. - DL50 (Dosis Letal) cantidad que produce la muerte del 50 % de una población animal determinada. CONCEPTOS BÁSICOS EN DROGODEPENDENCIAS 

Alucinación: Percepción sensorial falsa que puede afectar todos los sentidos, aunque los más frecuentes de afección son el oído y la vista.



Adicción: Habito de consumo que cuando no se realiza, se producen un conjunto de síntomas propios conocidos como Síndrome de Abstinencia.



Delirio: Trastorno del estado de conciencia del sujeto en el que existe una disociación de él y el mundo real que lo rodea, se caracteriza por inquietud motriz, confusión desorientación, desconcierto, agitación y labilidad afectiva, obnubilación de la conciencia, alucinaciones.



Dependencia: Es el estado psíquico o físico producido en el organismo por el consumo de una droga y puede ser: a) Dependencia Psíquica: Deseo abrumador o necesidad de seguir consumiendo la droga. b) Dependencia Física u orgánica: Los efectos de la sustancia hacen verdaderamente necesario el uso de la droga para evitar el síndrome de abstinencia.



Drogadicción: Adicción o dependencia a una droga. Son sinónimos toxicomanía, Drogodependencia.



Estupefaciente o Narcótico: Sustancia narcótica y analgésica que causa hábito, altera las condiciones fisiológicas y psíquicas del sujeto y produce un estado especial de euforia.



Farmacodependencia: dependencia a los medicamentos o fármacos.

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

Hipnótico: Fármaco que se utiliza para producir sueño.



Sedante: Sustancia que tiene la propiedad de calmar el dolor o la excitación, la mayoría ejerce su acción sobre el sistema nervioso central.



Síndrome de abstinencia: Conjunto de signos y síntomas físicos causados por la supresión de la droga.



Tolerancia: Tendencia a aumentar la dosis de consumo de la sustancia para conseguir los efectos deseados. La tolerancia es distinta para cada persona.

DESCRIPCIÓN DE LAS DROGAS DE ABUSO ILICITO, MAS IMPORTANTES Se pueden dividir en cinco grupos: 1. Depresoras: Producen sobre el Sistema Nervioso Central (SNC) una depresión de su actividad. Aparecen efectos como: disminución de la vigilancia y los reflejos, alteraciones del equilibrio, pasividad, desorientación y disminución de la ansiedad. Son sustancias depresoras: Alcohol etílico, barbitúricos, tranquilizantes (benzodiacepinas) y metacualona. 2. Alucinógenas: Actúan a dosis infinitesimales sobre el SNC provocando desorganización de los procesos cerebrales con lo que se producen alucinaciones sensoriales agradables o terroríficas. Son ejemplos: el L.S.D. y la mescalina. 3. Derivados opiáceos: Producen sobre el SNC euforia y analgesia (calman el dolor). Existen sustancias naturales y sintéticas, por ejemplo: Heroína, morfina, codeína y metadona. 4. Estimulantes: Estimulan el SNC por un tiempo prolongado, dando lugar a la excitación y aumento de la actividad cerebral con euforia, aumento de sensaciones y sentimiento de energía. Las más importantes son: Anfetaminas, metanfetaminas entre ellas la MDMA (metilen-dioximetanfetamina) y cocaína. 5. Cannabinoides: Son las sustancias psicoactivas de la planta Cannabis sativa que actúan sobre el SNC dando lugar a euforia y tranquilidad, estimulan percepciones visuales y auditivas, con frecuencia tendientes a la hilaridad.

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Tras estos conceptos básicos del campo, se incursiona en una subdivisión de la Toxicología, ligada íntimamente al estudio científico del delito, ella es – La Toxicología Forense que se encarga de establecer la etiología tóxica de un determinado crimen a través del estudio del cadáver, el medio ambiente, el tóxico en particular, la actividad laboral, etc. Desde el punto de vista de la Toxicología Forense nos ocuparemos de las intoxicaciones y según su etiología, ellas son: a) Intoxicación criminal: Cuando se emplea el tóxico con fines criminales, entre los que se citan el homicidio, abortos, pérdida momentánea de conciencia, entre los más comunes. b) Intoxicación voluntaria: Comprende el suicidio y la drogadicción. c) Intoxicación accidental: Se distinguen: las alimenticias, por picadura de animales, accidentales, medicamentosas y profesionales. En general en hechos en donde se sospecha la intervención de una sustancia de efectos adversos sobre el organismo, siempre y cuando los hallazgos en el lugar de los hechos o en la víctima no conduzcan a la búsqueda de una sustancia en particular se realizará la investigación de: (*) Drogas de Abuso Ilícito: Alcohol etílico, marihuana, cocaína, benzodiacepinas, barbitúricos, opiáceos, anfetaminas. Agroquímicos: warfarínicos.

Carbamatos,

organoclorados,

organofosforados,

piretroides,

Varios: Medicamentos, solventes orgánicos, etc. (*) Se transcribe en cada grupo, la lista de sustancias más comúnmente relacionadas con la comisión de hechos punibles en nuestro país; en base a la capacidad analítica y estudios realizados en el área toxicológica del laboratorio de la Policía Nacional, a la fecha de edición de este material.

1. MUESTRAS PARA ESTUDIO Siempre que se sospeche de la acción de un tóxico; el lugar de los hechos es sin duda el principal lugar para iniciar la búsqueda; se mencionan los hallazgos más frecuentes en él; cuando existe una intoxicación de tipo criminal o voluntaria en sus dos aspectos:

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-

-

-

1.1

Ausencia de violencia. Hallazgo de frascos, recipientes con contenido o restos de naturaleza desconocida o dudosa. Jeringas y agujas. Pastillas, comprimidos, cápsulas o líquidos. El siguiente punto de la inspección es la víctima, en la que se deberá buscar: Un cadáver sin lesiones traumáticas graves a nivel externo y/o con signos característicos como ser coloraciones específicas; por ejemplo el rojo- vino en la intoxicación por monóxido de carbono muy común en nuestro país, espuma por las vías áreas superiores o por la boca. Pinchazos en vasos de los antebrazos o piernas. BUSQUEDA Y LOCALIZACIÓN:

Para el hallazgo de éstos elementos es necesario una buena inspección del lugar del hecho y del cadáver en compañía del medico forense.

1.2

LEVANTAMIENTO, TRATAMIENTO Y ENVIO AL LABORATORIO:

Los hallazgos o indicios encontrados en el lugar de los hechos, deberán recogerse según los cuidados generales para la recolección de indicios. Son de interés en este caso: pastillas, polvos, píldoras, líquidos desconocidos, etc. En cuanto a muestras provenientes de la víctima, se puede sistematizar en general, las muestras que serán de utilidad, atendiendo al estudio toxicológico solicitado y el estado de la víctima: - Vísceras: Divididas en: a) El estómago, su contenido y una porción proximal del yeyuno- íleon de aproximadamente 60 cm. b) órganos parenquimatosos: hígado, riñón y encéfalo. - Fluidos biológicos: Orina: Toda la que se pueda conseguir por punción de la vejiga, micción voluntaria o por sonda, es la muestra de elección por la practicidad para obtenerla, por la concentración de la droga y sus metabolitos en ella y por el volumen de la muestra que facilitará la aplicación de una batería de reactivos.

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Sangre: de 10 a 50 ml con fluoruro de sodio o mejor aún sin anticoagulante, es útil particularmente para determinar el consumo reciente de drogas. No se recomienda la toma de sangre de cavidades abiertas. La sangre total y el plasma son las muestras más representativas. Bilis: Todo lo que se pueda extraer por punción de la vesícula, es la muestra de especial interés en los casos de muerte por narcóticos. Humor vítreo: Es muy utilizada por su estabilidad ante el proceso de putrefacción, especialmente recomendada para la investigación de alcohol etílico obteniéndose, mediante punción de la cámara posterior del ojo, con una aguja gruesa y aspirado suave. Esta muestra sirve también para determinaciones tanatoquímicas (dosage de glucosa, potasio, etc.). - Muestras adicionales: Para casos en los que se sospecha de un tóxico en particular podrán recogerse además: a) Pulmón (cadmio) b) Ventrículos (digital) c) Colón: 60 cm (mercurio) d) Grasa y músculo esquelético: 200 g de cada uno (insecticidas organoclorados) e) Pelos arrancados y uñas de pies, manos: 10 g (arsénico) f) Piel y tejido celular subcutáneo, y/o tejido muscular subyacente: Cuando se sospecha de absorción por contacto o inyección intramuscular, en un radio de 5 cm alrededor del pinchazo. g) Lavados gástrico (cuando la víctima es auxiliada por personal médico o paramédico) h) Vómitos. Cuidados generales para las muestras -

Utilizar frascos adecuadamente etiquetados, preferentemente de vidrio con boca ancha, tapa a rosca y perfectamente limpios. En lo posible evitar la cámara de aire llenándolos por completo. Las vísceras deben ir por separado las muestras descritas en “a”, de las parenquimatosas. Queda prohibido mezclar los fluidos biológicos entre sí o con las demás muestras. Aunque el único conservante permitido es el fluoruro de sodio, es mejor prescindir de él. El mejor e inocuo conservante es el frío y la medida más adecuada, el rápido transporte de las muestras hasta el laboratorio.

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-

Si se tratan de muestras sospechosas o confirmadas de estar contaminadas con Hepatitis, SIDA u otras enfermedades contagiosas deben colocarse etiquetas de advertencia. 1.3

MUESTRAS PROCEDENTES DE AUTOPSIA TARDIA

Una situación muy particular se da cuando la solicitud de análisis toxicológico sobreviene a una inhumación, requiriendo en primer lugar la correspondiente exhumación. Para dicha actividad pericial, se recomiendan las siguientes normas: - Describir el tipo de sepultura. - Recoger 100 g de muestras de la tierra que rodea al ataúd o el cadáver cuando la sepultura es en el suelo, a los efectos de descartar la contaminación con un tóxico que esté en el ambiente. - Observar el grado de descomposición del cadáver para condicionar la técnica a seguir. - Si la descomposición no es muy avanzada recoger las muestras descritas sistemáticamente. - En caso que la descomposición no permita la identificación de las vísceras se recogerá el magma existente en las cavidades esplácnicas, si es posible con cierta indicación topográfica, hipocondrio derecho, fosas renales, etc. - Las muestras recogidas durante una autopsia, tendrán indefectiblemente doble destino: estudio toxicológico y estudio anatomopatológico.

2. ESTUDIOS REALIZADOS Existe una gran variedad de técnicas analíticas que abarcan desde los métodos no instrumentales, hasta el uso de instrumental muy avanzado y sofisticado, citaremos: a) Tests generales de orientación o de campo: que son pruebas química de colorimetría aplicables en particular y a modo de orientación; sobre materiales directos, más comúnmente para el grupo de las drogas de abuso ilícito. b) Métodos instrumentales cuantitativos: En los que se destaca la cromatografía gaseosa con o sin detector de masa, cromatografía líquida, espectrofotometría U.V y de absorción atómica, etc.

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c) Otras técnicas Analíticas: Entre ellas: 1. Inmunoensayos que utiliza anticuerpos específicos para cada droga (Enzimoinmunoanálisis –EIA, Radioinmunoanálisis RIA); 2. TLC (cromatogafía en capa fina) que aunque tiene como limitaciones: -la escasa sensibilidad, -la necesidad de contar con patrones de referencia y la imposibilidad de cuantificar los resultados, es una técnica disponible, de fácil realización y que arroja buenos resultados en la investigación de drogas o venenos en materiales directos. Como se describiera al principio de éste capítulo, la toxicología es una amplia y vasta ciencia, razón que imposibilita resumirla en unas pocas hojas. La intención de la autora, es hacer referencia de ésta ciencia tan importante en el campo forense, ofreciendo conocimiento básico para las primeras gestiones a realizar, en lo que refiere a toma de muestras, envío al laboratorio y estudios a solicitar cuando antes o durante la comisión del delito se sospeche de la intervención de un tóxico. Además se hace referencia a las técnicas básicas y primarias utilizadas en el área Toxicológica del laboratorio Criminalístico de la Policía Nacional y a otras obtenidas de las fuentes bibliográficas de consulta para la elaboración del presente material; a los efectos siempre, de auxiliar el trabajo del químico.

A) TESTS GENERALES Procedimiento Analítico: Los siguientes son adecuados para la investigación de drogas en material directo. Investigación Reactivo de: Tiocianato de Cobalto Cocaína 0.8g + Acido Ortofosfórico 1 ml + Metanol (2:3) 100 ml DimetilaminobenzalL.S.D. dehído al 5 % en ácido ortofosfórico con metanol (1:1) Marquis: Anfetamina Formaldehído 10 cc + Acido sulfúrico concentrado 100 cc

Procedimiento 1. Colocar la muestra en el centro de papel de filtro. 2. Añadir una gota de reactivo 1. Se añade a la muestra ácido sulfúrico y reactivo. 2.Se calienta y se agita 1. Colocar la muestra en una placa de ensayo. 2. Añadir unas gotas de reactivo

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Color de Reacción Azul turquesa a los 5 segundos Malva a los pocos minutos

Naranja

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Investigación Reactivo de: Dille-Koppanyi A- Acetato de Cobalto 0,1 g+ Metanol 100 ml Barbitúricos + Acido Acético Glacial 0,2 ml B- Isopropilamina 5 ml + Metanol 95 ml Duquenois A- Acetaldehído 5 gotas + Vainillina 0,4 Marihuana gotas en 20 ml de alcohol etílico de 95 % (conservar en botellas oscuras) B- Acido clorhídrico concentrado C- Cloroformo

Procedimiento

Color de Reacción

1. Colocar la muestra en una placa de ensayo. 2. Añadir tres gotas de reactivo A e inmediatamente, 3. Añadir tres gotas de reactivo B 1. Colocar una pequeña cantidad de muestra en un tubo de ensayo y agitar con 2 ml de reactivo A durante 1 min. 2. Añadir igual volumen de reactivo B 3. Si aparece algún color al cabo de unos minutos agitar la mezcla con 1 o 2 ml de reactivo C

Púrpura rojizo

Violeta o Azul

B) TLC – Cromatografía en capa Fina En el área de toxicología del laboratorio Criminalístico de la Policía Nacional, se utiliza como método analítico de identificación la cromatografía en capa fina en la investigación de drogas de abuso y venenos, ya sea de materiales directos y/o en materiales biológicos; requiriendo estos últimos, de un proceso de extracción previo a la siembra. Básicamente el esquema siguiente resume el procedimiento. MATERIALES BIOLÓGICOS (EXTRACCIÓN)

Extracto éter de petróleo ácido Plaguicidas: Clorados, Fosforados, Carbamatos Piretroides

Extracto con éter etílico

Extracto con Cloroformo

Barbitúricos Otros:Analgésicos Antipiréticos, warfarínicos.

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Alcaloides Psicotrópicos Anestésicos locales.

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Procedimiento Analítico: I) Técnica de Extracción – Método Fassi modificado y adaptado: (Cuidar de procesar por separado el estómago y su contenido, de las demás vísceras). 1. Picar las muestras con procesadora, y separar aproximadamente 50 g de muestra o pool de las vísceras. 2. Agregar a las muestras separadas ácido tartárico (cantidad suficiente para reacción ácida franca) y sulfato de sodio (cantidad suficiente para secar), mezclar y dejar en reposo por 24 horas. 3. La muestra seca se coloca en una ampolla de decantación, se añade éter de petróleo, y se deja en contacto por 24 horas 4. Extraer la fase etérea, rotular (fase ácida 1) y evaporar a sequedad, utilizar este extracto para investigación de plaguicidas. 5. A la muestra contenida en la ampolla de decantación, se añade éter etílico. 6. Agitar por espacio de 30 minutos y dejar en contacto por 24 horas. 7. Separar la fase etérea. ácida, rotular (fase ácida 2) y evaporar a temperatura ambiente. 8. Alcalinizar el residuo con amoníaco, hasta ph 9 – 10, añadir cloroformo, mezclar y dejar en contacto por 24 horas. 9. Separar, rotular (fase alcalina) y evaporar a sequedad a temperatura ambiente. Los extractos obtenidos sirven para ser analizados por cromatografía de capa fina (TLC), gaseosa (GS) o líquida (HPLC) II) – Cromatografía en Capa Fina: Los extractos de materiales biológicos y los materiales directos se disolverán para el momento de la siembra en metanol y se realizarán las siguientes placas: 1. Placa ácida para plaguicidas: Se siembra el extracto ácido del éter de petróleo, conjuntamente con testigos de plaguicidas clorado, fosforado, carbamato y piretroide. Solvente: Ciclohexano 8: n-Hexano 8: Acetona 2: Cloroformo 2 Luego de la corrida, secar y observar a la luz UV, para localizar las manchas. Revelar en el siguiente orden (**), con: 1) Difenilamina al 0,5 % en medio alcohólico. Exponer luego a la luz UV o rayos solares directamente por aproximadamente 1 hora, se revelan los clorados de color gris o verde grisáceo.

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2) Hidróxido de potasio 2 N, se revelan carbamatos de color amarillo. 3) Reactivo paladioso (0,5 % en ácido clorhídrico 0.1 N), se revelan los fosforados

de color amarillo o café. (**) La interpretación de las relaciones de frente y color de las manchas reveladas deben cotejarse siempre con patrones indubitables, preferentemente no de una sola especie.

- Si se trata de investigación específica de carbamatos, después de la siembra se corre en Tolueno: Eter 9:3, se seca la placa y se observa a la luz UV, los carbamatos presentan florescencia; luego se revelan en el siguiente orden: 1) Hidróxido de potasio 2N, la fluorescencia se intensifica a la luz UV. 2) Preparado fresco de Nitrobencenodiazonio-tetrafluoroborato en solución de etanol 2:8, los carbamatos se revelan de color rosa. 2. Placa ácida para barbitúricos y benzodiacepinas: que fueron extraídas en medio ácido, se pueden también investigar aspirina, difenilhidantoína y warfarina. Solvente: Cloroformo-Acetona 90:10Se siembra. Luego de la corrida, secar y observar a la luz UV., para localizar las manchas. Revelar en el siguiente orden, con: 1) Difenilcarbazona (4 g de cloruro mercúrico en 200 ml de etanol absoluto y 400 mg de difenilcarbazona en 200 ml de etanol absoluto, mezclar). Calentar en plancha térmica a 30 – 40 ºC, los barbitúricos se revelan de color violeta. 2) Cloruro férrico al 5% acuosos, para revelar warfarina de color blanco y analgésicos antipiréticos de color violeta. 3) Calentar en plancha térmica y los warfarínicos se tornan de color amarillo.6 4) Reactivo de Dragendorf: Se revelan las benzodiacepinas de color marrón que se extractan en medio ácido. 3. Placa alcalina: Sembrar los extractos alcalinos con testigos de Estricnina, cocaína, benzodiacepinas y anfetaminas. Solvente: Metanol - Amoníaco 100:1,5 Luego de la corrida, secar y observar a la luz UV, para localizar las manchas. Revelar en el siguiente orden, con: 1) 2,4 Dinitrofluorobenzeno al 1 % en etanol absoluto, calentar en plancha térmica 30–40 ºC y acidificar con HCl concentrado, las anfetaminas se revelan de color amarillo. 2) Reactivo Iodoplatinado, para revelar alcaloides de color marrón.

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3) Reactivo de Dragendorf, para revelar alcaloides que no aparecieron anteriormente. Si se trata de investigar específicamente benzodiacepinas, realizar la corrida con Cloroformo- Acetona 4:1, luego de la corrida secar la placa y observar bajo luz UV, la mayoría de las benzodiacepinas presentan fluorescencia, revelar específicamente con: Acido tricloroacético al 1% acuoso. Se revelan de diferentes colores: Amarillo (Lorazepato, Diazepam, Tenazepam, Nitrazepam), blanco (Lorazepam), anaranjado (Medazepam). - Para la investigación específica de Cannabinoles y derivados: Sembrar el extracto alcalino con testigos de marihuana, utilizar como solvente Hexano – Dioxano 9:1. Luego de la corrida secar la placa y observar bajo luz UV; revelar luego con Fast Blue al 1 %, los cannabinoles se revelan de color rojo carminado y frente a vapores de amoníaco se intensifica el color inicial.

3. OTROS ESTUDIOS Basados siempre en la metodología disponible en el área de trabajo de la autora y demás profesionales del Laboratorio Criminalístico de la Policía, se describe a continuación, una sencilla técnica y muy utilizada dada la problemática del país en lo que refiere al consumo de la “Cola de Zapatero”, sobre todo por menores. 3.1 Investigación de solventes (Tolueno, xileno y benceno): utilizando como método de análisis el químico, específicamente reacción colorimétrica. Procedimiento Analítico: 1. Mezclar 17,5 ml de 0,1 N de ácido clorhídrico y 2,5 ml de sangre. 2. Agitar y extraer con 2,5 ml de tetracloruro de carbono. 3. Separar el tetracloruro de carbono por centrifugación 4. Agregar 2,5 ml de reactivo de Marquis y mezclar. 5. Se obtiene coloración roja, para muestras que contenga alguno de los solventes citados. Utilizar controles de los mismos.

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ANEXOS

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ADN EN EL CAMPO FORENSE Fue a mediados del siglo XX, gracias al descubrimiento del ADN y su estructura y al posterior avance en las técnicas de análisis de dicha molécula, que la Hemogenética Forense, evolucionó considerablemente hasta el punto que hoy en día puede hablarse de una nueva subespecialidad dentro de la Medicina Forense: la GENETICA FORENSE. Dicha ciencia estudia básicamente ciertas regiones del ADN que presentan variabilidad entre los distintos individuos, es decir regiones polimórficas del ADN conocidas como “huella genética”; constituidas por una serie de fragmentos de ADN presentes en todos los individuos, pero que tienen la característica de ser altamente variables o polimorficos entre los mismos. El ADN es el material encargado de almacenar y transmitir la información genética. Su estructura helicoidal de doble cadena sostenida por elementos centrales que forman una escalera de caracol de doble hélice, fue establecida en 1953 por 2 científicos Watson y Crick, quienes gracias a ello obtuvieron el Premio Nobel en 1962. Se trata de una macromolécula constituida por una sucesión de unidades básicas llama-das nucleótidos compuestos cada uno de ellos de sólo tres elementos; dos de los cuales son constantes el azúcar (desoxirribosa) y el radical fosfato (PO4) y uno variable constituido por las bases nitrogenadas (puricas y pirimídicas), químicamente denominadas, adenina (representada por la letra A), timina (por la letra T), citosina (por la letra C) y guanina (por la letra G). Esta molécula contiene la información genética para ser transmitida exactamente generación tras generación, perpetuando así la especie. Toda la información del ADN puede ser copiada de forma muy precisa mediante la separación de sus cadenas, la que es seguida de la síntesis de dos cadenas nuevas exactamente iguales. La diversidad genética es una cualidad común a todas las especies. Cada ser vivo tiene una apariencia física que responde a una única composición hereditaria o genética, constituyendo esto la identidad genética, la excepción a esta regla la constituyen los gemelos univitelinos, los cuales tienen idéntica información genética, es decir idéntico patrón de ADN.

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Esta identidad genética puede ser visualizada como un conjunto de señas utilizando técnicas de Biología Molecular, las cuales ponen de manifiesto, de manera directa los genes heredados de los progenitores (50% de la madre y 50% del padre), constituyendo esto el genotipo del individuo. La identificación de las personas mediante técnicas de Biología Molecular, alcanza ribetes significativos en varias ramas del Derecho: en Derecho de Familia, con el objeto de determinar parentesco biológico de un modo concluyente (maternidad y paternidad); en cuestiones concernientes al Derecho Penal (por ej. determinación del autor de una coacción sexual, de un homicidio); Derecho Internacional Público (por ej. entrada ilegal de inmigrantes) y Derecho Constitucional, por involucrar el derecho a la identidad personal, a la intimidad, a la disposición del propio cuerpo, etc. También puede utilizarse para casos de adopción, específicamente la maternidad, la cual certificaría que la mujer que entrega en adopción es la verdadera madre, ya que existen una gran cantidad de secuestros de niños recién nacidos en los países subdesarrollados, para entregarlos en países como Estados Unidos, Alemania, el Reino Unido, etc. donde la demanda de niños para adoptar es muy grande. También en casos de personas perdidas o desaparecidas; en grandes catástrofes, etc. Es ilimitado el campo de aplicación de la información genética obtenida a través de estas técnicas, por tratarse, de técnicas exactas (permitiendo certeza en los resultados), rápidas (debido a la automatización) y seguras (repetibles un sinnúmero de veces), representando un gran avance a la hora de “administrar justicia”, permitiendo el cumplimiento de los valores fundamentales de la misma: celeridad, seguridad y lo más importante eficiencia.

ASPECTOS TECNICOS: AVANCES El primero en utilizar el ADN a los casos forenses en 1984, fue el médico inglés Alec Jeffreys, investigador del Lister Institute Research de la Universidad de Leicester UK, cuyo descubrimiento fue patentado en 1987 por el Reino Unido; quien ideó una técnica conocida como fingerprinting. Jeffreys advierte que a lo largo de toda la cadena del ADN existen secuencias cortas que aparecen en sucesivas repeticiones en tandem. Estas regiones se denominan minisatélilites. El número de repeticiones y por lo tanto, su tamaño, son variables en los alelos de diferentes loci (locus: lugar físico que ocupa un gen para un carácter dado en un cromo-soma, plural loci) genéticos.

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Cuando el ADN es tratado con enzimas de restricción (sustancias químicas que reconocen en la molécula del ADN, sitios específicos de corte, actuando por tanto a modo de tijeras biológicas, fragmentando la molécula y dando lugar a fragmentos de tamaño variable, cuya medición arroja un perfil diferente para cada individuo (RFLPs: fragmentos de restricción de longitud polimórfica), haciendo posible su utilización en la identificación de personas. Estudios posteriores de Jeffreys demostraron que las diferencias en el tamaño de los fragmentos se debían a que estas regiones consistían en un determinado número de repeticiones en tandem de una secuencia central, que varían de un individuo a otro denominados VNTR (Variable Number of Tandem Repeats), analizados mediante la técnica de hibridación con sondas o Southern blot, la cual consiste primero en fragmentar el ADN con las enzimas de restricción, luego la separación electroforética en gel de agarosa, de los fragmentos por su tamaño; la transferencia a una membrana de nylon y luego la desnaturalización, es decir la separación del fragmento de ADN de doble hebra, por tratamiento con álcalis, en hebras simples, las cuales se hibridizan con pequeñas secuencias de ADN marcadas con radioisótopos o quimioluminiscentes, denominadas sondas, lo suficientemente similares a la muestra problema, pero también, lo suficientemente distintas, como para no aparearse con el resto. El resultado es una autorradiografía donde pueden verse los alelos detectados con la sonda. En la práctica esta metodología tuvo una escasa utilización, debido a la dificultad de su estandarización, a la imposibilidad de creación de base de datos y a la difícil interpretación bioestadística de los resultados. En la actualidad, la utilización de la PCR (reacción en cadena de la polimerasa), permite analizar de manera sencilla y exacta algunos polimorfismos del ADN minisatélites y otros STRs (short tandem repeats) bastante estables y con posibilidad de ser analizados simultáneamente (multiplex), aún en muestras tan mínimas como un pelo con raíz, una minúscula mancha de sangre o semen, e incluso caspa, permitiendo así la resolución de un gran número de casos en Criminalística. Esta técnica creada por Kary Mullis, en 1989, obteniendo el Premio Nobel de Química en 1993, permite amplificar más de un millón de veces un ADN obtenido de una región seleccionada del genoma, siempre y cuando se conozca una parte de su secuencia de nucleótidos. Se utilizan dos oligonucleótidos, complementarios a las zonas flanqueantes a la región que se quiere amplificar, estos oligonucleótidos, conocidos como primers, actúan como cebadores para la síntesis in vitro de ADN, catalizada por una enzima la Taq polimerasa. La reacción se lleva a cabo en una serie de ciclos térmicos, cada uno de los cuales incluye 3 fases:

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I) II) III)

Desnaturalización o separación en dos cadenas simples, mediante aplicación de calor 90 – 95º C. Hibridación o annealing o apareamiento a una temperatura de 40 – 60 ºC, específica para cada primer. Extensión, mediante la cual la enzima Taq polimerasa incorpora nucleótidos en cada extremo de la cadena desnaturalizada; esto se lleva a cabo a 72º C.

Posteriormente el ADN amplificado es separado, en función al tamaño de los fragmentos amplificados, por electroforesis en gel de poliacrilamida o por electroforesis capilar, los cuales son revelados y comparados con ladres alélicos para determinar el par alélico estudiado, permitiendo obtener resultados informatizados, evitándose así problemas de interpretación. Desde el análisis de los primeros polimorfismos de ADN con fines identificativos, la Genética Forense ha experimentado una gran evolución. Los expertos en la materia han sido testigos de cómo el descubrimiento de la PCR revolucionó las técnicas de identificación genética, al punto de que a la fecha pueden ser analizados marcadores de cromosomas específicos como los del Cromosoma Y para determinar el origen masculino de las muestras, o los del ADN mitocondrial, a fin de establecer el linaje materno. Es difícil prever cuales serán los avances que se producirán en un futuro próximo, teniendo en cuenta la velocidad vertiginosa con que se desarrollan las tecnologías en el campo de la Biología Molecular, pero lo que sin duda podemos decir es que, desde el punto de vista biológico, el ser humano es lo que su ADN es.

Sencillo aporte de la Dra. Marta Oviedo de Duarte. Jefa Laboratorio Genético. Policía Nacional.

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Documentación e Informes Tipos

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SOLICITUD DE PERICIA Forma a ser llenada por el solicitante, salvo que el solicitante sea una institución pública que responda al régimen de un formato documental, aunque en este caso es importante corroborar que ese documento institucional contenga los datos necesarios y en su defecto requerir del remitente lo necesario Lugar,.................de...............de 200.....

Solicitud de Pericia Nº (Otorgar número o código del registro de Laboratorio) Hecho Punible Investigado: SUPUESTO HECHO PUNIBLE CONTRA ............ ......................................................................................................................................... Lugar del Hecho: ........................................................................................................ Victima: N.N....................................................................................................................................... Victimario: N.N..................................................................................................................................... Fecha y Hora del hecho investigado: Intervinientes (Judicial y/o policial) ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... .................................................................................................................................................. Indicios Remitidos ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... OBJETO DE LA PERICIA: ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ...................................................................................................................................................

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Persona que recolectó los indicios: ............................................................................. Fecha y Hora del levantamiento de indicios: ............................................................ Datos de interés para el laboratorio.................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ..................................................................................................................... Solicitante: (Nombre y C.I.Policial) Teléfono laboral del solicitante: Recibido por: (Nombre del personal de laboratorio.) Fecha y Hora de la recepción

Firma del Solicitante

Firma del Recepcionista

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REGISTRO DE MUESTRAS El registro de muestras básicamente es la documentación interna que deberá manejar el laboratorio, y en la que consta la identificación o número de entrada asignado al caso por el laboratorio. El registro de muestras se inicia, con el número de entrada o codificación que reciba dicha muestra en el laboratorio. Por ejemplo el sistema utilizado en el laboratorio criminalístico de la Policía Nacional (PY), consta de dos partes: La primera numeración corresponde a la fecha de ingreso del caso a estudiar en el laboratorio y,  La segunda, corresponde a la numeración consecutiva que utilice el laboratorio por ej: 

20/02/05- 456 Con la identificación designada y registrada para cada caso, las muestras a ser estudiadas en relación a cada caso en particular tendrán, bajo el mismo código identificatorio, una numeración consecutiva empezando con el número 1, 2, 3, etc.; aún cuando las muestras hayan sido remitidas en fechas posteriores a la que originó su identificación. Sea cual sea el sistema de identificación o código identificatorio a utilizar, todas las muestras de un mismo caso deben tener el mismo código de identificación. Aún cuando el informe de resultados se realice independientemente unas muestras de otras. Para asegurar la preservación del registro, es necesario contar con más un registro; lo ideal sería contar con un registro informático y otro de escritura de puño y letra, amén del registro que se origina con el archivo de las solicitudes de pericia correspondientes.

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ACTA PARA LEVANTAMIENTO O EXTRACCIÓN DE MUESTRAS ACTA Nº ---/200.... (Completar con la numeración consecutiva del registro de actas del laboratorio)

EXTRACCION – LEVANTAMIENTO DE MUESTRAS En la ciudad de ...................................................., de la República del Paraguay, a los ................días del mes de ........................ del año........., se procede a la extracción – levantamiento de muestras - indicios de ......................................................................... .................................................................................................................................................. pertenecientes a ..................................................................................................................., de............ años de edad, de profesión................................................................., con C.I. Policial Nº........................................................................................................................... Las muestras serán sometidas a análisis químico-laboratorial, a fin de cumplir con el objeto pericial de: ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................... El procedimiento de extracción – levantamiento, está cargo del profesional ............. ................................................................, con C.I. Policial Nº.............................................., Funcionario del laboratorio.................................................................................................. El acto se realiza de pleno consentimiento del afectado y en presencia de: 1-....................................................................... C:I.Nº 2- ...................................................................... C.I.Nº

Firman al pie del acta, el afectado/a, el profesional actuante y los testigos. ………………………….

……………………………………….

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RESULTADO LABORATORIAL TOXICOLOGICO Código de identificación N°: 04/01/06-017. Hoja 1 de 2.

SE EXAMINAN LOS MATERIALES REMITIDOS Y DESCRITOS A CONTINUACIÓN: 1- Muestra de sangre extraída a la víctima N.N. 2- Muestra de orina perteneciente a la víctima N.N. Realizándose análisis químicos laboratoriales a las muestras identificadas, con los siguientes objetivos: Parte A: “Investigar la presencia de alcohol” Parte B: “Investigar la presencia de drogas de abuso” EXAMENES REALIZADOS Y RESULTADOS OBTENIDOS PARTE A: Se estudia M1 (Método cualitativo: microdifusión de Conway) 1. Investigación de alcohol: Resultado. PARTE B: Se estudian M1 y M2. (Método cromatografía en capa fina e Inmunocromatografía). Previa extracción y tratamiento de la muestra M1, se investigan: DROGAS DE ABUSO RESULTADO 1. Marihuana Resultado 2. Barbitúricos ( Fenobarbital sódico) 3. Benzodiacepinas (Alprazolam, Disomnilam, Bromazepam ) 4. Cocaína

Resultado Resultado Resultado

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Código de identificación N°: 04/01/06-017. Hoja 2 de 2.

Inmunocromatografía para M2, se investigan: DROGAS DE ABUSO 1. Marihuana 2. Barbitúricos 3.Benzodiacepinas 4. Anfetaminas 5. Cocaína

RESULTADO Resultado Resultado Resultado Resultado Resultado

Limite de detección para Inmunocromatografía (Método utilizado en el laboratorio Criminalístico de la Policía Naciona PY)     

Cocaína: 150 ng/ml Marihuana: 50ng/ml Anfetamina: 300 ng/ml Benzodiacepinas: 300 ng/ml Barbitúricos: 300 ng/ml

CONCLUSIÓN: Parte A:

En la muestra M1, se detecta o NO se detecta Resultado.

Parte B:

En las muestras M1 y M2 se detecta o NO se detecta Resultado.

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RESULTADO LABORATORIAL BIOLOGICO Código de identificación N°: 04/01/06-017. Hoja 1 de 1. SE EXAMINAN LOS MATERIALES REMITIDOS Y DESCRITOS A CONTINUACIÓN: 1Mancha levantada del interior del domicilio del supuesto autor, frente a la puerta de entrada lateral de la vivienda, identificada como M1. 2Un destornillador de 23 cm de longitud con mango de color amarillo. Presenta: a) Manchas de color marrón achocolatado ubicadas en la punta, identificadas como M2a. b) Manchas de color marrón achocolatado ubicadas en el mango, identificadas como M2b. c) Manchas características de óxido. 3Una camisa mangas cortas de color rosado, con rayas de colores azul, blanco y rojo; con una etiqueta interna de colores rojo, blanco y gris, en la que se lee: -MC GREGOR TALLE 46-. Presenta manchas de color marrón achocolatado ubicadas en la parte delantera del lado izquierdo, identificadas como M3. Realizándose análisis químicos laboratoriales a las muestras identificadas, con el siguiente objetivo: “Investigar la presencia de sangre y en caso positivo determinar especie y grupo” EXAMENES REALIZADOS Y RESULTADOS OBTENIDOS Se estudian: M1, M2a, M2b, y M3. (Métodos: Químico de coloración e Inmunológico) Reacción genérica para sangre Resultado Investigación de especie Humana Resultado Investigación de grupo sanguíneo Resultado CONCLUSIÓN:

Las muestras M1, M2a, M2b y M3 se comportan, no se detecta , etc. Resultados Firma Profesionales Aclaración de Firma

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RESULTADO LABORATORIAL BIOLOGICO Código de identificación N°: 04/01/06-017. Hoja 1 de 1.

SE EXAMINAN A CONTINUACIÓN, LOS MATERIALES REMTIDOS: 1.

Pelos levantados del automóvil marca Volkswagen tipo Santana, identificados como M1.

2.

Pelos testigos extraídos de la víctima N.N., identificados como M2.

Realizándose análisis químicos laboratoriales a las muestras identificadas, con el siguiente objetivo: “Establecer semejanzas o diferencias entre las muestras de pelos” EXAMEN REALIZADO Y RESULTADO OBTENIDO Se estudian: M1 y M2. (Método: óptico) 1- Observación microscópica: En los parámetros morfológicos (color, punta, corteza, pigmentación, etc) y medidas determinadas (largo total, diámetro medular, diámetro total, etc) no se encuentran características semejantes con la muestra testigo.

CONCLUSIÓN 

Las muestras M1 NO presenta características morfológicas semejantes a los pelos testigos M2.

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RESULTADO LABORATORIAL INDUSTRIAL Código de identificación N°: 04/01/06-017. Hoja 1 de 2. SE EXAMINAN LOS MATERIALES REMITIDOS, DESCRITOS A CONTINUACIÓN: Indicios levantados del Camión marca XX; cabina de color blanco y carrocería de color rojo, Chapa N° XX: 1. Muestra de adherencias de color rojo, ubicadas en el vértice izquierdo del paragolpe metálico frontal pintado en color blanco, a una altura de 52 cm de la línea de tierra, identificada como M1; 2. Muestra de adherencias de color rojo, ubicadas en la parte posterior del guardabarro anterior derecho, a una altura de 50 cm de la línea de tierra, identificada como M2; 3. Muestra testigo de pintura, levantada del camión, identificada como M Indicios levantados del automóvil marca XX, color rojo, con franjas de color naranja, Chapa N° XX: 4. Adherencias de color blanquecino, levantadas del tercio izquierdo del capot, a una altura de 70 cm de la línea de tierra, identificadas como M4. 5. Muestra testigo de pintura de color rojo, levantada del automóvil, identificada como M5. Realizándose análisis laboratoriales a las muestras identificadas, con el siguiente objetivo: “Determinar semejanza o diferencia entre las muestras de pinturas” EXAMENES REALIZADOS Y RESULTADOS OBTENIDOS Se estudian M1, M2, M3, M4, y M5. (Método Optico) 1. Observación macroscópica: M1: Resultado M2: Resultado M3: Resultado M4: Resultado M5: Resultado

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Código de identificación N°: 04/01/06-017. Hoja 2 de 2.

2. Observación epimicroscópica: M1: Resultado de observaciones realizadas en cada capa. M2: Resultado M3: Resultado M4: Resultado M5: Resultado CONCLUSIÓN:

Las muestras Mx, Mxx, presentan características semejantes o NO semejantes a My, en cuanto a los parámetros observados.

Firma Profesionales Aclaración de Firma

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Antón y Barberá, Francisco – De Luis y Turégano, Juan Vicente. “POLICIA CIENTÍFICA”. Volumen II. Tirant Lo Blanch. Valencia – España 1998. Antón y Barberá, Francisco- Méndez Baquero, Francisco. “ANALISIS DE TEXTOS MANUSCRITOS, FIRMAS Y ALTERACIONES DOCUMENTALES”. 2da. Edición. Tirant Lo Blanch. Valencia – España 2005 Capello, Roberto, Crio. Mayor (R) – Gobbi, Eduardo J., Dr. Crio. Inspector Qco.,Policía Federal Argentina). “TRATADO DE CRIMINALISTICA”. Tomo I DOCUMENTOS. SU ESTUDIO ANALITICO PERICIAL. Tomo II LA QUÍMICA ANALITICA EN LA INVESTIGACIÓN DEL DELITO. Editorial Policial. Argentina. Capital Federal – República Argentina 1983. Caro, Patricia M. “MANUAL DE QUIMICA FORENSE”. Ediciones La Rocca. Buenos Aires – República Argentina. 2004. Gisbert Calabuig, J.A.. “MEDICINA LEGAL Y TOXICOLOGIA”. Salvat Editores. Barcelona – España 2000. James, Stuart H. – Eckert William. “INTERPRETATION OF BLOODSTAIN EVIDENCE AT CRIME SCENES”. CRC Press. New York, Washington - E.E.U.U. 1998 Montiel Sosa, Juventino. “MANUAL DE CRIMINALISTICA”. Tomos I, II, III y IV. Ediciones Técnicas S.A. Editorial Limusa. Naucalpan - México D.F. 1991. Oegle, Roberte R., JR, Fox Michelle J. “ATLAS OF HUMAN HAIR. Microscopic Characteristics”. CRC Press. New York, Washington – E.E.U.U. 1999. Vera Planás, Néstor. “VADEMÉCUM DE CRIMINALÍSTICA”. Asunción – Paraguay. 2004. Policía Nacional. ”MANUAL POLICIAL”. Publicaciones Policiales. Asunción - Paraguay.

Tomo XXII. Departamento de

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Apuntes Varios: Instituto Médico legal de la ciudad de Buenos Aires – República Argentina. Año 1991 Instituto Médico legal de la Policía Civil de Brasilia – República Federativa del Brasil. Año 2002 Cátedra de Química Legal. Facultad de Ciencias Química – U.N.A. San Lorenzo – República del Paraguay. Colegas Químicos Internacionales, abocados a la Química Forense.

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