2° LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

 Laboratorio de Microbiología Microbiología I- Materiales de Laboratorio: Reconocimiento, Reconocimiento, Utilidad y Limpieza

I.- OBJETIVOS                      

                     

Que el alumno conozca parte del material necesario en un laboratorio de microbiología microbiología y parasitología. parasitología. Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio de microbiología microbiología y parasitología. parasitología.

II.- MARCO TEORICO

Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de dilata dilatació ción, n, tenien teniendo do una gran gran aplica aplicació ción n en la fabric fabricaci ación ón de materi materiale aless de laboratorio, uno de los mas conocidos es .el vidrio PYREX. Así como los elaborados de distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio, cobre que les otorgan características como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son muy manejables sin alterar su composición.

Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el  mech mecher ero o Buns Bunsen en,, son son de los los más más comu comune nes s en la mayo mayorí ría a de los los labo labora rato tori rios os científicos.

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MATERIAL DE VIDRIO

Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue en el laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen material", son: 1. Ser de buena calidad; es decir que no sean fácil de quebrarse. Ser de color neutro. 2. Ser de Poseer resistenc resistencia ia a la lass ac acci cion ones es me mecá cáni nica cass y a las las vari variac acio ione ness de 3. Poseer temperatura así como también a los álcali-libre (no se raje). 4. Poseer bajo coeficiente de dilatación (que no pierda su forma). Tubos de Ensayo:

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Se emplean como recipientes de medios de cultivo. Tubos de prueba Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin rebordes para facilitar el taponamiento. De 16 x 150 mm De 15 x 125 mm De 13 x 100 mm para estudio de fermentación –trabajos mecánicos De 10 x 75 mm pruebas, estudios serologicos. Tubos de Roux Con escotadura de 4 cm. de fondo, de 25 x 200 mm para Tubos de centrífuga De vidrio, pueden ser cónicos o cilíndricos, siempre de paredes gruesas, De paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta velocidad. De polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas semejantes a los anteriores.

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Cápsulas o Placas Petri:

Cajas cilíndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y aislamiento de microorganismos. Las más usadas son las de 10, 15 ó 20 mm x 100 mm.

Cultivos bacterianos

Colonias de bacterias Escherichia coli (más grande, rosa) y Proteus vulgaris (más   pequeña, de color castaño) que crecen juntas en una placa Petri. En circunstancias norm normal ales es esta estas s bact bacter eria ias s son son inof inofen ensi siva vas s y habi habita tan n en el inte intest stin ino o huma humano no favore favorecie ciendo ndo la digest digestión ión,, si bien bien pueden pueden conver convertir tirse se en patóg patógena enas s y produc producir  ir  infecc infeccion iones es del tracto tracto urinar urinario. io. Los cientí científic ficos os y médico médicos s llevan llevan a cabo cabo cultiv cultivos os bacter bacterian ianos os y estud estudian ian sus carac caracter terísti ísticas cas con el fin de adquir adquirir ir conoci conocimie miento ntos s respecto a las enfermedades bacterianas bacterianas y su prevención. Placas Brewer:

Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaeróbicos. Son idénticas a las anteriores, con excepción de las tapas que además de ser  mas pesadas están adaptadas para crear anaerobiosis. Pipetas:

Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, graduados al décimo o al centésimo de mI. Se emplean en la medición de pequeñas cantidades de líquidos. Pueden ser: Serológicas: son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 ml.

se reconocen por presentar una dilatación bulbosa central con unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la pipeta, se les llama también pipetas de bola bola,, las medidas más conocidas son de 10, 25, 50 y 100 ml. Volumétricas ,

Pipetas Pasteur:

Confeccionados Confeccionados de varillas de vidrio de diámetro de 4 x 20mm de 30 ó 40cm de longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la acción directa de la llama llama del mecher mechero, o, para para conseg conseguir uir por estira estiramie miento nto la capila capilarid ridad ad

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. Matraces y Erlenmeyers:

Reci Recipi pien ente tess de form forma a cóni cónica ca y cuel cuello lo cort corto, o, volu volumé métr tric icos os útil útiles es para para la preparación y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de cultivos, etc.

Matraces Aforados o Fiolas :

Recipientes de forma esférica y base plana. Están calibr4ados a medidas exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que se indi indica ca la medi medida da.. Se empl emplea ean n para para la prep prepar arac ació ión n de reac reactitivo voss de preferencia solución buffer.

Los matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma troncocónica que se utilizan en el laboratorio para medir o contener líquidos. Kitasato:

Son frascos muy parecidos a los Erlenmeyers, se caracterizan por sus paredes gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de tabulación lateral para hacer el vacío. Se utiliza

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Probetas:

Recipientes graduados de forma cilíndrica y capacidad variable, con base para la esterilidad. Pueden estar graduada.

Vasos Vasos de Precipitación o Beacker:

Reci Recipi pien ente tess cilí cilínd ndri rico coss y cort cortos os,, con con una una depr depres esió ión n en el marg margen en de la bocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, Cultivos de Tejido:

Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca, Con capacidad para 50ml y 100ml blancos o de color ámbar pueden utilizarse para para la reserv reserva a de soluci solucione oness y medios medios de cultiv cultivo o en stock, stock, previa previamen mente te taponados con algodón esterilizados, Perlas de Vidrio Neutro:

Se emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosechas microbianas en la preparación de antígenos, antígenos, De 4 a 6 mm. Varilla: de Vidrio Macizo

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MATERIAL MATERI AL DE OTRA NATURALEZA NATURALE ZA

Vástago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en el extremo proximal una tuerca para insertar el alambre de plástico o necron, Asa de Kolle

Varillas metálicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino; cuando el alambre es recto se llama Necrón y cuando el alambre forma un anillo de diámetro variable en su extremidad toma el nombre de asa. Espátulas de Metal con mango de madera Estuches cilíndricos o Cubículares

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EQUIPOS DE LABORATORIO Potenciómetro:

Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, hidrogeniones, conectados a un potenciómetro que indique las mediciones, Los potenciómetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estándar.

Centrífugas:

Se utiliza en la separación de sólidos suspendidos en líquidos. Hay centrífugas de tamaño y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por  minuto minuto,, La veloci velocidad dad a la cual cual sedime sedimenta ntaran ran las las partíc partícul ulas as en un líquid líquido o dependen de varios factores: Tamaño de la partícula. El peso de la partícula. La viscosidad del líquido. La fuerza gravitaciona gravitacional.l.

Ultra centrifugación; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100

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(mitocondrias, etc.), la separación se debe efectuar en gradiente de densidad. Incubadoras y Hornos

Los hornos son capaces de mantener t° mas de 100°c y las incubadoras menos de 100° c .Los hornos no tienen salida de aire, las incubadoras si.

Baños de agua

También llamados BAÑO MARIA tienen salida de aire presentan un termostato que qu e re regu gula la la te temp mper erat atur ura a de dell ag agua ua pr pres esen enta ta un pi piso so pa para ra co colo loca carr lo loss materiales que se desea.

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Refrigeradoras y congeladoras

Son incubadoras de temperatura fría menor de cero grados y los frigideres de dos a siete grados.

Filtración

Sirve para separar materiales líquidos de sólidos un ejemplo los FITROS DE MEMBRANA.

Espectrofotómetro

Se puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el

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Autoclave

Funciona por las presiones presiones que se dará a una mayor temperatura temperatura logrando su esterilización como por ejemplo las conservas.

Horno Pasteur 

Es como una mufla que tiene tiene tres paredes paredes y la cubierta es de asbesto asbesto sirve para la esterilización por el calor seco. Estufas de aire caliente

Al igual que el anterior es utilizado en la esterilización por el calor seco. Tienen solo dos paredes y son de forma cúbica.

Aparato de arnolo koch

Es un tipo de esterilizador esterilizador con calor calor húmedo de forma cilíndrica. cilíndrica.

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III.-MATEIAL PARA LA PRÁCTICA 

Pipetas de diferentes graduaciones.

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Asas Bacteriológicas de aro y punta.

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Caja de Petri.

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Tubos de ensayo con tapón de rosca y tapón de algodón.



Probeta.

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Matraz Erlenmeyer.



Vaso de precipitado.



Mechero Bunsen.



Torundas de algodón.

IV. EXPERIMENTO

Siga cada uno de los pasos como lo indica su Profesor, Técnico o instructor. 1.

Encienda el Mechero.

2.

Esterilice su asa en el mechero hasta que este al rojo vivo y enfríe en el área de seguridad.

3.

Abra Abra su su caja caja de Pet Petri ri den dentro tro del área área de de ester esterili ilida dad d hasta hasta que apren aprenda da a

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V.- RESULTADO

Obviam Obviament ente, e, hay unos unos cierto ciertoss tipos tipos de experi experime menta ntacio cione ness que realiz realizamo amoss o determinamos con mas mas frecuencia que otras. Sin embargo, embargo, el personal del Laboratorio esta siempre dispuesto a considerar nuevos retos. No pretendemos ser capaces de realizar cualquier tipo de determinación, pero prometemos considerar, desde nuestra experiencia, experiencia, todas las posibles alternativas alternativas es por eso lo imprescindible imprescindible de reconocer  reconocer  todos todos los materiale materiales, s, su utilidad utilidad y su debida debida limpieza limpiezapara para cumplir cumplir con nuestros nuestros propósitos.

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VI.- CONCLUSIONES

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Es muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en el laboratorio y saber su utilidad para la práctica. También era necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no lamentar consecuencias. Una de las conclusiones es haber reconocido algunos reactivos que se debe tene tenerr cuid cuidad ado o y coge cogerl rlo o con con los los guan guante tess para para prev preven enir ir algú algún n tipo tipo de contaminación. Haber reconocido los equipos a utilizar como la centrifuga, el potenciómetro y la estufa de aire caliente. Conocer la calidad de las principales principales herramientas herramientas a utilizar utilizar como los tubos de ensayo, las pipetas, las placas petri, los matraces, etc. Saber desinfectar las placas cuando se encuentren con algunas bacterias u hongos o ácidos, también saber desinfectar las manos y los materiales a utilizar.

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VIII.- CUESTIONARIO 1. ¿Para que sirve una caja de Petri?

Son utilizadas en bioquímica para llevar a cabo cultivos de microorganismos. microorganismos.

2. ¿Cuál es la finalidad de utilizar materiales estériles en el laboratorio?

El propósito del proceso de esterilización es destruir la contaminación microbiana de los productos no estériles. La destrucción microbiana mediante agentes físicos o químicos sigue una ley exponencial, que nos permite calcular la probabilidad de supe superv rviv iven enci cia a de un micr microo oorg rgan anis ismo mo a part partir ir de la dosi dosiss sumi sumini nist stra rada da en el tratamiento. La probabilidad de supervivencia está en función del número y tipos de microorganismos (carga biológica), de la letalidad del proceso de esterilización y en algunos casos, del medio ambiente en el que se encuentren los microorganismos durante la esterilización. esterilización. 3. ¿De que esta formada el asa bacteriológica?

Son varillas metálicas o de vidrio que llevan de un extremo alambre de platino; cuando El alambre es recto se llama aguja y cuando el alambre forma un anillo de diámetro variable en su extremidad tómale nombre de asa.

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